有声小说在线收听网,古风君子以泽,大主宰 http://dadafen.cn 生化試劑、耗材專業(yè)供應(yīng)商 Fri, 12 Jul 2024 02:11:19 +0000 zh-CN hourly 1 https://wordpress.org/?v=6.2.6 Human EPO ELISA Kit http://dadafen.cn/62801.html Fri, 12 Jul 2024 02:11:19 +0000 http://dadafen.cn/62801.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

PE230
Human EPO ELISA Kit
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3518

的Human EPO ELISA Kit (Human Erythropoietin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人促紅細(xì)胞生成素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的EPO的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為14.4pg/ml,與人IL-1β、IL-1RA、IL-2、IL-3、 IL-4 、IL-5 、IL-6、 IL-8、IL-10、小鼠 EPO等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin, EPO)是由腎臟產(chǎn)生的一種糖蛋白,參與調(diào)節(jié)哺乳類動物中紅細(xì)胞生成。EPO的產(chǎn)生受到氧利用率變化的調(diào)節(jié),在缺氧條件下,EPO水平會有所上升,從而導(dǎo)致紅細(xì)胞數(shù)量增加。EPO的過表達(dá)與部分病理生理性變化相關(guān)。紅血球增多癥是指體內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)量過多,原發(fā)性紅血球增多癥主要是由于EPO非依賴性的紅細(xì)胞祖細(xì)胞生長,患者血液中EPO濃度基本處于正常水平。然而,繼發(fā)性紅血球增多的發(fā)生則與異常升高的EPO水平有關(guān)。當(dāng)居住于高海拔地區(qū)或出現(xiàn)慢性阻塞性肺疾病、紫紺型心臟病、睡眠呼吸障礙、血紅蛋白病、吸煙和局部性腎組織缺氧時,機(jī)體會呈現(xiàn)缺氧狀態(tài),此時機(jī)體會出現(xiàn)適應(yīng)性反應(yīng),上調(diào)EPO的產(chǎn)生。另外,在多種腫瘤患者中也會出現(xiàn)EPO水平增加、紅細(xì)胞數(shù)增多的情況。EPO濃度過低與某些特定類型的貧血癥相關(guān),例如腎性貧血和慢性貧血、早產(chǎn)性貧血、甲狀腺功能減退性貧血和營養(yǎng)不良導(dǎo)致的貧血。上述許多情況都與IL-1和TNF-α有關(guān),這兩種細(xì)胞因子能夠抑制EPO的活性,從而抑制血紅細(xì)胞產(chǎn)生。但是有部分形式的貧血屬于EPO非依賴性,因此在這些患者中EPO通常仍舊處于較高水平,例如再生障礙性貧血、缺鐵性貧血、地中海貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血和骨髓增生異常綜合征等。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人EPO的濃度,其原理見圖1。人EPO特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人EPO會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人EPO抗體后,生物素化抗人EPO抗體與人EPO結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人EPO濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中人EPO濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PE230-1

人EPO抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PE230-2

樣品分析緩沖液

5ml

PE230-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

PE230-4

人EPO標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PE230-5

人EPO生物素化抗體

10ml

PE230-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PE230-7

洗滌液(20X)

30ml

PE230-8

TMB溶液

10ml

PE230-9

終止液

5ml

PE230-10

封板膜(透明)

2張

PE230-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組份4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Mouse Leptin ELISA Kit http://dadafen.cn/62672.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:46 +0000 http://dadafen.cn/62672.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP66
Mouse Leptin ELISA Kit
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3198

??????的Mouse Leptin ELISA Kit (Mouse Leptin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Leptin的ELISA試劑盒。
??????本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為134.6pg/ml,與人G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6等均沒有交叉反應(yīng),與大鼠Leptin有40%交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
??????小鼠瘦素(Leptin)是小鼠obese基因產(chǎn)物,該基因出現(xiàn)異常后,小鼠會出現(xiàn)肥胖、糖尿病、代謝緩慢和體溫降低的情況。成熟的小鼠瘦素與大鼠瘦素和人瘦素分別具有96%和84%的氨基酸同源性。小鼠瘦素cDNA編碼產(chǎn)生167個氨基酸長度的多肽,剪切掉21個氨基酸的信號肽后得到成熟的蛋白分子。瘦素mRNA被證實僅在胚胎和脂肪組織中表達(dá)。
??????瘦素的高親和受體OB-R與糖蛋白130和粒細(xì)胞集落刺激因子受體具有一定的同源性,根據(jù)胞外域長度的不同分為OB-RL和OB-RS。OB-RL具有完整的胞外域,具有信號傳導(dǎo)的能力;OB-RS胞外域較短,只能與瘦素結(jié)合,但不能傳遞信號。OB-RL主要表達(dá)在下丘腦,被認(rèn)為是體重調(diào)節(jié)的重要分子;OB-RS則在肺、腎和造血細(xì)胞等多處都有表達(dá)。在小鼠、大鼠和人血漿中都檢測到了較高濃度的瘦素,在進(jìn)食或受到胰島素、胰高血糖素、細(xì)胞因子刺激后的機(jī)體應(yīng)答中,瘦素被認(rèn)為發(fā)揮了重要的作用。血漿中,瘦素主要以與瘦素結(jié)合蛋白結(jié)合的形式存在。
??????瘦素受體與瘦素結(jié)合后通過招募JAK2使瘦素受體上的三個關(guān)鍵酪氨酸位點(diǎn)發(fā)生磷酸化,磷酸化的Tyr位點(diǎn)能夠招募STAT3并使之磷酸化激活,隨后發(fā)生二聚化進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮功能,啟動SOCS3和NpY等靶基因的表達(dá);另外,SOCS3蛋白又能抑制激活的JAK2-STAT3通路,從而實現(xiàn)負(fù)反饋調(diào)節(jié)。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中小鼠Leptin的濃度,其原理見圖1。小鼠Leptin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的小鼠Leptin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠Leptin抗體后,生物素化抗小鼠Leptin抗體與小鼠Leptin結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠Leptin濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中小鼠Leptin濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

??????一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP66-1

小鼠Leptin抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP66-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP66-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJP66-4

小鼠Leptin標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP66-5

小鼠Leptin生物素化抗體

10ml

JJP66-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP66-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP66-8

TMB溶液

10ml

JJP66-9

終止液

5ml

JJP66-10

封板膜(透明)

2張

JJP66-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
??????標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
??????由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
??????洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
??????為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
??????TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
??????加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
??????由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
??????充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
??????本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
??????洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
??????檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
??????加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit http://dadafen.cn/62669.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:40 +0000 http://dadafen.cn/62669.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP64
Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit
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3403

研發(fā)的Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit (Human IL-38/IL-1F10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白細(xì)胞介素38酶/IL-1家族成員10聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-38的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為32.2pg/ml,與人的IL-1Ra、IL-36Ra均沒有交叉反應(yīng),與小鼠IL-38有17.9%交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。 白細(xì)胞介素(Interleukin)是構(gòu)成免疫信號通路重要組成部分。白細(xì)胞介素38 (Interleukin 38, IL-38),即IL-1家族成員10 (IL-1 family member 10, IL-1F10),由IL-1F10基因編碼,屬于IL-1家族和IL-36亞家族的成員。IL-38在組織中廣泛表達(dá),如皮膚、脾、胸腺、扁桃體等。成熟的IL-38由152個氨基酸組成,無信號肽和caspase-1切割位點(diǎn),在先天性和適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。 IL-38的特異性受體是IL-1受體相關(guān)蛋白2 (IL-1 receptor related protein 2, IL-1 RRP2),即IL-36R。IL-38的基因序列與IL-36受體拮抗劑(IL-1 Receptor antagonist, IL-36Ra)的基因具有43%的同源性,二者具有相似的生物學(xué)功能。IL-38可以以類似于IL-36Ra的形式阻斷IL-36R信號傳導(dǎo)的激活[1]。 IL-38與多種疾病有關(guān),包括心血管和自身免疫疾病,可以作為抗炎細(xì)胞因子在炎癥性疾病中發(fā)揮作用。研究表明,系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清中的IL-38濃度高于健康患者。當(dāng)用重組IL-38治療自發(fā)性SLE的小鼠模型時,小鼠的蛋白尿和皮膚損傷等癥狀顯著較少。同時也發(fā)現(xiàn)這些小鼠血清中IL-17和IL-22的水平也較低, 這說明IL-38可以抑制Th17細(xì)胞產(chǎn)生IL-17和IL-22等炎癥介質(zhì)[2,3]。 本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-38/IL-1F10的濃度,其原理見圖1。人IL-38/IL-1F10特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-38/IL-1F10會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-38/IL-1F10抗體后,生物素化抗人IL-38/IL-1F10抗體與人IL-38/IL-1F10結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-38/IL-1F10濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。 圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖 。 一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。 包裝清單: 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 JJP64-1 人IL-38/IL-1F10抗體預(yù)包被板 8孔×12條 JJP64-2 樣品分析緩沖液 5ml JJP64-3 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 10ml JJP64-4 人IL-38/IL-1F10標(biāo)準(zhǔn)品 2-4瓶 JJP64-5 人IL-38/IL-1F10生物素化抗體 10ml JJP64-6 辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin 10ml JJP64-7 洗滌液(20X) 30ml JJP64-8 TMB溶液 10ml JJP64-9 終止液 5ml JJP64-10 封板膜(透明) 2張 JJP64-11 封板膜(白色) 2張 — 說明書 1份 保存條件: 標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。 注意事項: 由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。 洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。 為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。 TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。 加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。 由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。 充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。 本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。 洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。 檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。 加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Human IL-37 ELISA Kit http://dadafen.cn/62668.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:38 +0000 http://dadafen.cn/62668.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP62
Human IL-37 ELISA Kit
96次

2922

生產(chǎn)的Human IL-37 ELISA Kit (Human IL-37 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白細(xì)胞介素-37酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-37的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為30.4pg/ml,與人的IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-38均沒有交叉反應(yīng),與小鼠IL-18BP、IL-36α、IL-36γ、IL-38等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素(Interleukin)是構(gòu)成免疫信號通路重要組成部分。白細(xì)胞介素-37 (Interleukin 37, IL-37),即IL-1家族成員7 (IL-1 family member 7, IL-1F7),也被稱為FIL-1-zeta、IL-37、IL–1H4、IL-1HL或IL–1RP1,是一種抗炎細(xì)胞因子。IL-37基因在人基因組內(nèi)位于2號染色體的長染色體臂上,在小鼠基因組中尚未發(fā)現(xiàn)任何同源基因。IL-37與IL-1家族的其它成員相同,是以前體形式合成的,完全激活需要Caspase 1的切割。Caspase-1切割后的IL-37可以轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中,與磷酸化或未磷酸化的Smad3形成復(fù)合物,影響炎癥細(xì)胞因子IL-1β、IFN-γ等的表達(dá)。IL-37不僅具有抗炎作用,而且在抗菌反應(yīng)或抗腫瘤免疫中也發(fā)揮重要作用。
IL-37選擇性剪接產(chǎn)生5種在分子的N末端區(qū)域有缺失的剪接變體IL-37a-e,且所有IL-37變體都缺乏典型的信號肽。其中,IL-37b是最大和研究最多的一種,它共享分布在IL-1家族內(nèi)的β桶型結(jié)構(gòu)(Beta barrel structure),分別與成熟的IL-1α、IL-1β和IL1-ra具有大約21%、24%和30%的氨基酸序列同源性。IL-37b在多種組織中均有表達(dá),如腎、骨髓、皮膚、血液、呼吸系統(tǒng)以及泌尿生殖系統(tǒng)等。在外周血單核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中,炎癥刺激可上調(diào)IL-37b的表達(dá)。此外,人IL-37b對小鼠有一定的活性。在小鼠體內(nèi),過表達(dá)IL-37b可抑制小鼠炎癥反應(yīng)并保護(hù)小鼠免受結(jié)腸炎和LPS誘導(dǎo)的炎癥性休克。
IL-37b與IL-18結(jié)構(gòu)相似,都具有兩個保守的氨基酸殘基(IL-37b的Glu-35和Lys-124分別對應(yīng)于IL-18的Glu-42和Lys-89),因此可以與IL-18受體(IL-18R)相互作用。與IL-18相比,IL-37b對IL-18Rα的親和力要低得多,可結(jié)合IL-18Rα,但不產(chǎn)生任何激動或拮抗IL-18的作用。然而,IL-37b可與IL-18的抑制性結(jié)合蛋白IL-18BP (IL-18 binding protein)結(jié)合,隨后與IL-18Rβ形成復(fù)合物,并通過它抑制IL-18的活性。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-37的濃度,其原理見圖1。人IL-37特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-37會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-37抗體后,生物素化抗人IL-37抗體與人IL-37結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-37濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖 。
一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP62-1
人IL-37抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJP62-2
樣品分析緩沖液
5ml

JJP62-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

JJP62-4
人IL-37標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJP62-5
人IL-37生物素化抗體
10ml

JJP62-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJP62-7
洗滌液(20X)
30ml

JJP62-8
TMB溶液
10ml

JJP62-9
終止液
5ml

JJP62-10
封板膜(透明)
2張

JJP62-11
封板膜(白色)
2張


說明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Human IL-36β ELISA Kit http://dadafen.cn/62667.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:36 +0000 http://dadafen.cn/62667.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP6
Human IL-36β ELISA Kit
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3518

的Human?IL-36β?ELISA?Kit?(Human Interleukin 36β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白細(xì)胞介素36β酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-36β的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為9.6pg/ml,與人IL-36α、IL-36γ,小鼠IL-36β等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素36β?(Interleukin?36β,IL-36β),又被稱為IL-1F8和IL-1H2,是IL-1家族中的一員。IL-1家族中還包括IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra/IL-1F5、IL-36α/IL-1F6、IL-37/IL-1F7、IL-36γ/IL-1F9和IL-1F10。人IL-36β具有157個氨基酸殘基,不具有信號肽。由于C端70個氨基酸的不同存在兩種亞型:IL-36β1和IL-36β2。IL-36β1缺少IL-1家族保守的4個β折疊結(jié)構(gòu)。人IL-36β2與小鼠、犬、牛和馬相應(yīng)的IL-36亞型分別具有62%、67%、63%和59%的同源性。
IL-36β主要表達(dá)在角質(zhì)細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。當(dāng)發(fā)生炎癥反應(yīng)刺激以及在出現(xiàn)牛皮癬損傷時,角質(zhì)細(xì)胞和滑液成纖維細(xì)胞所表達(dá)的IL-36β會出現(xiàn)上調(diào)。IL-36β能夠通過活化樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞增強(qiáng)機(jī)體炎癥應(yīng)答。還能夠促進(jìn)多種細(xì)胞因子、趨化因子和抗菌肽的產(chǎn)生。IL-36β通過與受體復(fù)合物結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)功能,該受體復(fù)合物包含兩部分:IL-1 Rrp2和IL-1 RAcP。IL-36 Ra同樣也能與IL-1 Rrp2結(jié)合,從而發(fā)揮拮抗作用。當(dāng)N端的四個氨基酸分子被酶切除去后,IL-36β活性會有所增強(qiáng)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人IL-36β的濃度,其原理見圖1。人IL-36β特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-36β會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-36β抗體后,生物素化抗人IL-36β抗體與人IL-36β結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-36β濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中人IL-36β濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

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人IL-36β標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

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人IL-36β生物素化抗體

10ml

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辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

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洗滌液(20X)

30ml

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10ml

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封板膜(白色)

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保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
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JJP61
Human IL-33 ELISA Kit
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的Human IL-33 ELISA Kit (Human Interleukin-33 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白細(xì)胞介素33酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-33的ELISA試劑盒。

本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為28pg/ml,與人的pro-IL-33, IL-1α,IL-1β,IL-18及小鼠IL-33沒有交叉反應(yīng)性,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素-33 (Interleukin-33, IL-33),是一種分子量為30kDa的促炎性蛋白。IL-33主要表達(dá)在平滑肌細(xì)胞和氣道上皮細(xì)胞中,當(dāng)細(xì)胞受到炎性刺激時,IL-33的表達(dá)會出現(xiàn)上調(diào)。小鼠IL-33首先編碼合成具有266個氨基酸的前體分子,其N端具有細(xì)胞核定位信號區(qū)域和helix-turn-helix結(jié)構(gòu),C端在結(jié)構(gòu)上與IL-1家族具有一定的相似性。全長IL-33能夠與核染色質(zhì)相互作用,并發(fā)揮轉(zhuǎn)錄阻遏蛋白的作用。利用Caspase-1樣蛋白酶對全長IL-33分子進(jìn)行酶切,會得到分子量為18kDa的分泌型成熟IL-33分子。成熟的人IL-33與小鼠和大鼠IL-33分別具有57%和59%的氨基酸同源性。
成熟的IL-33能夠與跨膜受體JJP20L/IL-1 R4結(jié)合,在IL-1 R3的協(xié)助下,完成IL-33依賴的NF-κB激活。對受體JJP20L的選擇性剪切會得到游離的誘騙受體JJP20,JJP20與IL-33的結(jié)合會封閉JJP20L信號通路,抑制IL-33對免疫及心臟方面的作用效果。在哮喘和心力衰竭的患者中,JJP20水平會顯著升高。
分泌型IL-33分子能夠促進(jìn)Th2型免疫應(yīng)答,導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞增多癥和過敏反應(yīng)。在Th2細(xì)胞中,IL-33能夠上調(diào)IL-4、IL-5、IL-13以及JJP20L的表達(dá)。在肥大細(xì)胞中,IL-33能夠增強(qiáng)部分細(xì)胞因子和趨化因子的產(chǎn)生,但是并不會引發(fā)細(xì)胞脫粒。IL-33/JJP20L系統(tǒng)對于心臟具有一定的積極作用,IL-33能夠減輕由血管緊張素II或苯腎上腺素造成的心肌細(xì)胞肥大,機(jī)械壓力會誘導(dǎo)心臟成纖維細(xì)胞和心肌細(xì)胞各自產(chǎn)生IL-33和JJP20。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-33的濃度,其原理見圖1。人IL-33特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-33會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-33抗體后,生物素化抗人IL-33抗體與人IL-33結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-33濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
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8孔×12條

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5ml

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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

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2-4瓶

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人IL-33生物素化抗體

10ml

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辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

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洗滌液(20X)

30ml

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10ml

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終止液

5ml

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封板膜(白色)

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說明書

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保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
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Human IL-5 ELISA Kit
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2198

的Human IL-5 ELISA Kit (Human Interleukin-5 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白細(xì)胞介素5酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-5的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為12.8pg/ml,與人的GM-CSF、IL-3,小鼠IL-5等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素5 (Interleukin-5, IL-5)是一種分泌型糖蛋白,屬于α-螺旋細(xì)胞因子家族,該家族成員還包括IL-3和GM-CSF。與家族其它成員不同,IL-5以反向平行二聚體形式存在,單體間由兩個鏈內(nèi)二硫鍵所形成的共價鍵相連。IL-5主要由CD4+Th2細(xì)胞產(chǎn)生,嗜酸性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞也能分泌少量IL-5。IL-5能夠增加嗜酸性粒細(xì)胞和CD34+祖細(xì)胞的產(chǎn)生和調(diào)動,Th2細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生的IL-5還能夠促進(jìn)骨髓外嗜酸性粒細(xì)胞祖細(xì)胞的成熟。人IL-5與小鼠IL-5具有70%的氨基酸同源性。
人IL-5受體由兩部分組成,一部分是特有的配體結(jié)合亞基IL-5?Rα,另一部是通用的信號傳導(dǎo)亞基βc,該亞基同時也是IL-13和GM-CSF的受體組成部分。兩種亞基都屬于細(xì)胞因子受體亞族成員。IL-5?Rα首先以低親和力與IL-5結(jié)合,隨后與βc二聚體結(jié)合形成高親和力受體。IL-5同樣能與蛋白聚糖結(jié)合,結(jié)合后能夠增加IL-5的生物活性。除了膜綁定的IL-5 Rα亞基外,還存在游離型的IL-5?Rα。游離IL-5?Rα亞基的mRNA主要存在于人CD34+臍帶細(xì)胞中,但是當(dāng)受到IL-5刺激以及在嗜酸性粒細(xì)胞分化時,跨膜形式的IL-5?Rα表型會增多。當(dāng)出現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多癥時,兩種亞型的IL-5?Rα表達(dá)都會上調(diào)。用IL-5處理成熟的嗜酸性粒細(xì)胞會造成細(xì)胞表面IL-5 Rα表達(dá)下調(diào),降低細(xì)胞對IL-5的響應(yīng)能力。在體外,游離IL-5?Rα表現(xiàn)出IL-5的拮抗作用。IL-5?Rα主要表達(dá)在嗜酸性粒細(xì)胞上,但在嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞表面也有少量表達(dá)。
在人體內(nèi),IL-5主要作用于嗜酸性粒細(xì)胞,促進(jìn)其分化、成熟、活化、遷移和存活。但當(dāng)小鼠出現(xiàn)IL-5基因缺失時,體內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量及活性僅表現(xiàn)為減少和降低,而并非完全消失,這可能是由于IL-3、GM-CSF和Eotaxin同樣能夠促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞的擴(kuò)增和遷移。在過敏性氣喘中,IL-5能夠促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞在肺部的浸潤,加重病情,但當(dāng)給予IL-5抗體時,并未取得明顯的臨床療效。然而在嗜酸性粒細(xì)胞增多癥中,給予IL-5抗體后,體內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)減少了50%。另外,IL-5還能夠作為嗜堿性粒細(xì)胞的分化因子,協(xié)助組胺和白三烯分泌。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-5的濃度,其原理見圖1。人IL-5特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-5會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-5抗體后,生物素化抗人IL-5抗體與人IL-5結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-5濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中人IL-5濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP6-1

人IL-5抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP6-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJJP6-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJJP6-4

人IL-5標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP6-5

人IL-5生物素化抗體

10ml

JJJP6-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJJP6-7

洗滌液(20X)

30ml

JJJP6-8

TMB溶液

10ml

JJJP6-9

終止液

5ml

JJJP6-10

封板膜(透明)

2張

JJJP6-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Mouse IL-5 ELISA Kit http://dadafen.cn/62664.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:29 +0000 http://dadafen.cn/62664.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP60
Mouse IL-5 ELISA Kit
96次

2198

的Mouse IL-5 ELISA Kit (Mouse Interleukin-5 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠白細(xì)胞介素5酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-5的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為14.8pg/ml,與小鼠GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-1Rα、 IL-2、IL-3、IL-4,人IL-5等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素5 (Interleukin 5, IL-5),又稱T細(xì)胞替換因子、B細(xì)胞生長因子II、嗜酸性粒細(xì)胞分化因子或嗜酸性粒細(xì)胞集落刺激因子,是一種主要由T細(xì)胞產(chǎn)生的多效性細(xì)胞因子。IL-5能夠促進(jìn)小鼠B細(xì)胞增殖和分化,并促進(jìn)IgM、IgG1、IgA和IgE分泌。IL-5對成熟的嗜酸性粒細(xì)胞具有趨化作用,并且能夠增強(qiáng)嗜酸性粒細(xì)胞的存活能力及功能。另外,IL-5還能與多種集落刺激因子協(xié)同作用,增強(qiáng)嗜酸性粒細(xì)胞祖細(xì)胞的產(chǎn)生和嗜酸性粒細(xì)胞擴(kuò)增。由于IL-5對嗜酸性粒細(xì)胞的多種作用效果,IL-5對哮喘和其他嗜酸性粒細(xì)胞增多型炎癥反應(yīng)都具有一定影響。
天然的小鼠IL-5是一種分子量在40-45kDa之間的糖蛋白,以二硫鍵相連的同型二聚體形式存在。小鼠IL-5的cDNA編碼產(chǎn)生133個氨基酸的前體蛋白,其中包括一個疏水信號肽和113個氨基酸的成熟IL-5肽段。成熟的人IL-5與小鼠IL-5具有70%的氨基酸同源性,小鼠IL-5和人IL-5對人源細(xì)胞系具有等同的生物活性。
小鼠IL-5的受體是由α亞基和β亞基組成的異質(zhì)二聚體。兩種亞基都是I型跨膜蛋白,屬于細(xì)胞因子受體亞族。α亞基能夠與IL-5特異性結(jié)合,β亞基又稱AIC2B,即βc亞基,同時也是IL-3、IL-5和GM-CSF高親和受體復(fù)合物的組成部分。β亞基并不能直接與IL-5結(jié)合,而是要與α亞基一起形成IL-5的高親和力受體。除了膜表面的α亞基外,還存在一種游離的IL-5 Rα亞基,純化后的游離IL-5 Rα亞基在功能上具體表現(xiàn)為IL-5的拮抗劑。小鼠IL-5 Rα亞基僅在嗜酸性粒細(xì)胞、B細(xì)胞和肥大細(xì)胞表面表達(dá),而βc亞基則在多種造血細(xì)胞系中都有表達(dá)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中小鼠IL-5的濃度,其原理見圖1。小鼠IL-5特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的小鼠IL-5會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠IL-5抗體后,生物素化抗小鼠IL-5抗體與小鼠IL-5結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠IL-5濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中小鼠IL-5濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP60-1

小鼠IL-5抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP60-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP60-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJP60-4

小鼠IL-5標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP60-5

小鼠IL-5生物素化抗體

10ml

JJP60-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP60-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP60-8

TMB溶液

10ml

JJP60-9

終止液

5ml

JJP60-10

封板膜(透明)

2張

JJP60-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時測試時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Human IL-4 ELISA Kit (High-sensitive) http://dadafen.cn/62663.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:27 +0000 http://dadafen.cn/62663.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP6
Human IL-4 ELISA Kit (High-sensitive)
96次

3198

生產(chǎn)的Human IL-4ELISA Kit(Human Interleukin-4Enzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit, High-sensitive),即高敏型人白細(xì)胞介素4酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-4的ELISA試劑盒,最小檢出量為4.3pg/ml。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為4.3pg/ml,與人IL-4sR、小鼠IL-4等沒有交叉反應(yīng)。板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
IL-4即白細(xì)胞介素-4 (簡稱白介素4),是一種多功能細(xì)胞因子,主要由活化的T淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生。 IL-4因為糖基化的不同,分子量從15-19kDa不等。在不同類型的細(xì)胞中,IL-4參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的免疫應(yīng)答功能。IL-4參與B細(xì)胞的激活過程,它能誘導(dǎo)處于靜息期的B細(xì)胞上II型MHC(主要組織相容復(fù)合體)分子的表達(dá),增強(qiáng)IgE與IgG的表達(dá)和分泌,還能調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞上對IgE低親和FC受體的表達(dá)。IL-4也是前體輔助T細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化的重要調(diào)節(jié)因子。此外,IL-4在體內(nèi)外均表現(xiàn)出了一定的抗腫瘤活性,IL-4在機(jī)體中的遺傳變異可導(dǎo)致缺血性中風(fēng),腦血管意外或腦梗塞等疾病。
人IL-4前體蛋白(包含153個氨基酸)剪切掉24個氨基酸的信號肽后得到成熟的人IL-4。成熟的人IL-4與小鼠IL-4具有50%的氨基酸同源性,兩個物種的IL-4不存在交叉反應(yīng)性。同時人IL-4與人IL-13具有大約30%的氨基酸同源性,并且具有部分重疊的生物學(xué)活性。
特定細(xì)胞表面的受體復(fù)合物參與調(diào)節(jié)IL-4生物學(xué)功能。IL-4的受體主要有兩種類型,第一種類型的IL-4功能受體復(fù)合物由IL-4結(jié)合亞基(IL-4 R)和特定的γc鏈組成,該γc鏈同時也是IL-2、IL-7、IL-9和IL-15受體復(fù)合物的組成部分。第二種類型的IL-4功能受體復(fù)合物是由IL-4 R和IL-13 Rα組成,盡管IL-4 R并不直接與IL-13結(jié)合,但當(dāng)其與IL-13 Rα形成復(fù)合物后,該復(fù)合物同時也對IL-13具有很高的親和力。此外,除了細(xì)胞膜表面的IL-4受體,在人及小鼠的體液和小鼠細(xì)胞培養(yǎng)上清液中均檢測到了游離IL-4受體的存在。
IL-4先與IL-4 Rα結(jié)合形成IL-4/IL-4 Rα復(fù)合物,該復(fù)合物隨后再與輔助受體鏈γc或IL-13 R結(jié)合。當(dāng)IL-4與受體結(jié)合后,依靠胰島素受體底物IRS2和Shc蛋白激活Ras/MEK/Erk通路,實現(xiàn)促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂的作用。此外,IL-4與IL-4 Rα的結(jié)合還能夠誘導(dǎo)JAK及STAT的磷酸化,磷酸化后的STAT形成二聚體進(jìn)入細(xì)胞核,對靶基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控,同時磷酸化后的JAK還能夠?qū)崿F(xiàn)對PL3K/AKT通路的激活。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-4的濃度,其原理見圖1。人IL-4特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的人IL-4會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-4抗體后,生物素化抗人IL-4抗體與人IL-4結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-4濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP6-1
人IL-4抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJJP6-2
樣本分析緩沖液
5ml

JJJP6-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

JJJP6-4
人IL-4標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJJP6-5
人IL-4生物素化抗體
10ml

JJJP6-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJJP6-7
洗滌液(20X)
30ml

JJJP6-8
TMB溶液
10ml

JJJP6-9
終止液
5ml

JJJP6-10
封板膜(透明)
2張

JJJP6-11
封板膜(白色)
2張


說明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Mouse IL-4 ELISA Kit http://dadafen.cn/62662.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:25 +0000 http://dadafen.cn/62662.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP6
Mouse IL-4 ELISA Kit
96次

2798

的Mouse IL-4 ELISA Kit (Mouse Interleukin-4 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠白細(xì)胞介素4酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-4的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為14.5pg/ml,與人IL-4、IL-4 sR等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
IL-4即白細(xì)胞介素-4(簡稱白介4),又名B細(xì)胞刺激因子-1,其分子量大約在18-20kDa,在免疫應(yīng)答中具有多種效應(yīng)功能。成熟的小鼠IL-4是由140個氨基酸減掉20個氨基酸的信號肽所剩余的120個氨基酸組成。該細(xì)胞因子N端包含3個潛在的糖基化位點(diǎn),能夠形成3個鏈內(nèi)二硫鍵,最終形成4-α螺旋結(jié)構(gòu)。成熟的小鼠IL-4分別與人IL-4和大鼠IL-4具有43%和63%的氨基酸同源性,三者之間并無交叉反應(yīng)性。Th2細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、NKT、γδT細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞均能夠分泌IL-4。
IL-4能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖和存活,促進(jìn)小鼠B細(xì)胞表面免疫球蛋白的轉(zhuǎn)化,引發(fā)肥大細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的趨藥性,誘導(dǎo)CD4+細(xì)胞向Th2表型分化,還能促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖和活化。在腫瘤免疫中,IL-4也發(fā)揮了重要作用。在早起實驗中研究者發(fā)現(xiàn)IL-4展現(xiàn)出了強(qiáng)大的抗腫瘤能力,這可能是由于IL-4具有抗血管生成能力和激活CD8+ T細(xì)胞的能力。然而,新的研究結(jié)果卻表明IL-4是一種腫瘤促進(jìn)分子,這一結(jié)果可能是因為在IL-4的作用下,腫瘤細(xì)胞內(nèi)抗凋亡分子表達(dá)上升,同時IL-4作用于腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞,誘導(dǎo)組織蛋白酶的分泌,促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生遷移。
IL-4首先與IL-4 Rα亞基結(jié)合,隨后該復(fù)合物與輔助受體鏈γc或IL-13 Rα結(jié)合。在JAK的作用下,受體C端發(fā)生磷酸化,隨后形成二聚體。這一過程導(dǎo)致STAT6被募集并發(fā)生磷酸化,磷酸化的STAT6發(fā)生構(gòu)象改變,形成二聚體,隨后轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi),對多種靶基因的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)控激活。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中小鼠IL-4的濃度,其原理見圖1。小鼠IL-4特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的小鼠IL-4會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠IL-4抗體后,生物素化抗小鼠IL-4抗體與小鼠IL-4結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠IL-4濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP6-1

小鼠IL-4抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP6-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJJP6-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJJP6-4

小鼠IL-4標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP6-5

小鼠IL-4生物素化抗體

10ml

JJJP6-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJJP6-7

洗滌液(20X)

30ml

JJJP6-8

TMB溶液

10ml

JJJP6-9

終止液

5ml

JJJP6-10

封板膜(透明)

2張

JJJP6-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
除標(biāo)準(zhǔn)品外,4℃保存6個月內(nèi)有效。標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB對人體有刺激性,操作時請小心,并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
不宜混用不同批號的試劑盒組份,每批次試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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