JJP70
Human Leptin ELISA Kit
96次

3198

的Human Leptin ELISA Kit (Human Leptin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Leptin的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為26.6pg/ml，與小鼠Leptin和大鼠Leptin等均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人瘦素蛋白(Leptin)是一種分子量在16kDa，長度為146個氨基酸的非糖基化多肽，主要參與調(diào)節(jié)脂肪組織體積和能量平衡。在人和小鼠體內(nèi)，瘦素基因(OB)的失活突變會導(dǎo)致肥胖的發(fā)生。成熟的人Leptin與小鼠及大鼠Leptin分別具有87%和84%的氨基酸同源性。體內(nèi)唯一能夠產(chǎn)生Leptin的細(xì)胞是脂肪細(xì)胞，Leptin的產(chǎn)生受到激素、細(xì)胞因子和營養(yǎng)物質(zhì)的影響。例如胰島素和糖皮質(zhì)激素會增強(qiáng)Leptin的表達(dá)，然而兒茶酚胺會抑制Leptin的表達(dá)。Leptin通常以游離形式存在于血漿中，能夠穿過血腦屏障，也能夠隨乳汁分泌出來。
人Leptin受體(ObR或LEPR)是一種分子量在150kDa，長度為1144個氨基酸的I型跨膜糖蛋白，屬于I類細(xì)胞因子受體家族中IL-6受體家族。ObR經(jīng)過酶切作用后會產(chǎn)生多種變體(ObRa、b、c、d)，每種變體具有不同長度的胞內(nèi)段，同時還包括游離形式的受體ObRe。ObRb，具有完成胞內(nèi)段，主要表達(dá)在下丘腦弓狀細(xì)胞核，是信號傳遞的必需分子。ObRa表達(dá)較為廣泛，其與ObRc、ObRd一起被認(rèn)為是具有調(diào)節(jié)Leptin結(jié)合和內(nèi)吞作用的受體，卻并不參與信號傳遞，它們的胞內(nèi)段與ObRb相比較短。當(dāng)與Leptin二聚體結(jié)合后，ObRb二聚體會與ObRa、ObRc或ObRd之一形成四聚體復(fù)合物，從而傳遞信號。ObRb的突變會產(chǎn)生肥胖表型的大鼠或小鼠，小鼠的受體基因突變發(fā)生在胞質(zhì)區(qū)，而大鼠的基因突變則發(fā)生在受體的胞外域。Leptin會產(chǎn)生多種相反的濃度依賴性作用，例如Leptin能誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)POMC、從而減少食物攝取；反之通過誘導(dǎo)NpY和AgRP的表達(dá)則會增加食物的攝取。
Leptin本質(zhì)上來說是一種“饑餓信號”，Leptin濃度較低就會增強(qiáng)食欲減少能量消耗。在脂肪細(xì)胞體積增大時就會增加Leptin的分泌，從而導(dǎo)致食欲降低，能量消耗增多。然而，肥胖人群通常會有“瘦素抵抗”現(xiàn)象出現(xiàn)，這一部分是由于高濃度的甘油三酯造成的Leptin血-腦轉(zhuǎn)運(yùn)體的飽和，另一部分是由于細(xì)胞對Leptin的響應(yīng)降低所造成。還有很少一部分肥胖人群是由于遺傳性的Leptin缺陷導(dǎo)致。Leptin缺陷同樣會影響到免疫系統(tǒng)，會降低Th1細(xì)胞的應(yīng)答，增加感染的發(fā)生幾率。因節(jié)食等多種原因而過度消瘦所造成的Leptin缺陷同樣也會對青春期發(fā)育產(chǎn)生影響。
瘦素受體與Leptin結(jié)合后通過招募JAK2使瘦素受體上的三個關(guān)鍵酪氨酸位點(diǎn)發(fā)生磷酸化，磷酸化的Tyr位點(diǎn)能夠招募STAT3并使之磷酸化激活，隨后發(fā)生二聚化進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮功能，啟動SOCS3和NpY等靶基因的表達(dá)；另外，SOCS3蛋白又能抑制激活的JAK2-STAT3通路，從而實(shí)現(xiàn)負(fù)反饋調(diào)節(jié)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人Leptin的濃度，其原理見圖1。人Leptin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時，其中的人Leptin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人Leptin抗體后，生物素化抗人Leptin抗體與人Leptin結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。人Leptin濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中人Leptin濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP70-1

人Leptin抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP70-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP70-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJP70-4

人Leptin標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP70-5

人Leptin生物素化抗體

10ml

JJP70-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP70-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP70-8

TMB溶液

10ml

JJP70-9

終止液

5ml

JJP70-10

封板膜(透明)

2張

JJP70-11

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

JJP68
Rat Leptin ELISA Kit
96次

3198

的Rat Leptin ELISA Kit (Rat Leptin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即大鼠瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Leptin的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為74pg/ml，與大鼠的βIG-H3及人的Leptin均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
瘦素的高親和受體OB-R與糖蛋白130和粒細(xì)胞集落刺激因子受體具有一定的同源性，根據(jù)胞外域長度的不同分為OB-RL和OB-RS。OB-RL具有完整的胞外域，具有信號傳導(dǎo)的能力；OB-RS胞外域較短，只能與瘦素結(jié)合，但不能傳遞信號。OB-RL主要表達(dá)在下丘腦，被認(rèn)為是體重調(diào)節(jié)的重要分子；OB-RS則在肺、腎和造血細(xì)胞等多處都有表達(dá)。在小鼠、大鼠和人血漿中都檢測到了較高濃度的瘦素，在進(jìn)食或受到胰島素、胰高血糖素、細(xì)胞因子刺激后的機(jī)體應(yīng)答中，瘦素被認(rèn)為發(fā)揮了重要的作用。血漿中，瘦素主要以與瘦素結(jié)合蛋白結(jié)合的形式存在。
瘦素受體與瘦素結(jié)合后通過招募JAK2使瘦素受體上的三個關(guān)鍵酪氨酸位點(diǎn)發(fā)生磷酸化，磷酸化的Tyr位點(diǎn)能夠招募STAT3并使之磷酸化激活，隨后發(fā)生二聚化進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮功能，啟動SOCS3和NpY等靶基因的表達(dá)；另外，SOCS3蛋白又能抑制激活的JAK2-STAT3通路，從而實(shí)現(xiàn)負(fù)反饋調(diào)節(jié)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中大鼠Leptin的濃度，其原理見圖1。大鼠Leptin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時，其中的大鼠Leptin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠Leptin抗體后，生物素化抗大鼠Leptin抗體與大鼠Leptin結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。大鼠Leptin濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP68-1
大鼠Leptin抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJP68-2
樣本分析緩沖液
5ml

JJP68-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

JJP68-4
大鼠Leptin標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJP68-5
大鼠Leptin生物素化抗體
10ml

JJP68-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJP68-7
洗滌液(20X)
30ml

JJP68-8
TMB溶液
10ml

JJP68-9
終止液
5ml

JJP68-10
封板膜(透明)
2張

JJP68-11
封板膜(白色)
2張

—
說明書
1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

JJP66
Mouse Leptin ELISA Kit
96次

3198

??????的Mouse Leptin ELISA Kit (Mouse Leptin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Leptin的ELISA試劑盒。
??????本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為134.6pg/ml，與人G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6等均沒有交叉反應(yīng)，與大鼠Leptin有40%交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
??????小鼠瘦素(Leptin)是小鼠obese基因產(chǎn)物，該基因出現(xiàn)異常后，小鼠會出現(xiàn)肥胖、糖尿病、代謝緩慢和體溫降低的情況。成熟的小鼠瘦素與大鼠瘦素和人瘦素分別具有96%和84%的氨基酸同源性。小鼠瘦素cDNA編碼產(chǎn)生167個氨基酸長度的多肽，剪切掉21個氨基酸的信號肽后得到成熟的蛋白分子。瘦素mRNA被證實(shí)僅在胚胎和脂肪組織中表達(dá)。
??????瘦素的高親和受體OB-R與糖蛋白130和粒細(xì)胞集落刺激因子受體具有一定的同源性，根據(jù)胞外域長度的不同分為OB-RL和OB-RS。OB-RL具有完整的胞外域，具有信號傳導(dǎo)的能力；OB-RS胞外域較短，只能與瘦素結(jié)合，但不能傳遞信號。OB-RL主要表達(dá)在下丘腦，被認(rèn)為是體重調(diào)節(jié)的重要分子；OB-RS則在肺、腎和造血細(xì)胞等多處都有表達(dá)。在小鼠、大鼠和人血漿中都檢測到了較高濃度的瘦素，在進(jìn)食或受到胰島素、胰高血糖素、細(xì)胞因子刺激后的機(jī)體應(yīng)答中，瘦素被認(rèn)為發(fā)揮了重要的作用。血漿中，瘦素主要以與瘦素結(jié)合蛋白結(jié)合的形式存在。
??????瘦素受體與瘦素結(jié)合后通過招募JAK2使瘦素受體上的三個關(guān)鍵酪氨酸位點(diǎn)發(fā)生磷酸化，磷酸化的Tyr位點(diǎn)能夠招募STAT3并使之磷酸化激活，隨后發(fā)生二聚化進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮功能，啟動SOCS3和NpY等靶基因的表達(dá)；另外，SOCS3蛋白又能抑制激活的JAK2-STAT3通路，從而實(shí)現(xiàn)負(fù)反饋調(diào)節(jié)。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中小鼠Leptin的濃度，其原理見圖1。小鼠Leptin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時，其中的小鼠Leptin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠Leptin抗體后，生物素化抗小鼠Leptin抗體與小鼠Leptin結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。小鼠Leptin濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中小鼠Leptin濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

??????一個包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP66-1

小鼠Leptin抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP66-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP66-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJP66-4

小鼠Leptin標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP66-5

小鼠Leptin生物素化抗體

10ml

JJP66-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP66-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP66-8

TMB溶液

10ml

JJP66-9

終止液

5ml

JJP66-10

封板膜(透明)

2張

JJP66-11

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
??????標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
??????由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
??????洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
??????為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
??????TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
??????加樣時，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
??????由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
??????充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
??????本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
??????洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
??????檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
??????加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。