JP07045S
HA&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)
各1μg
1776
JP07045M
HA&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)
各100μg
2338
自行研發(fā)生產(chǎn)的HA&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(Positive Control Plasmids Pair for HA&Myc Co-IP)包含pCMV-HA-JP5和pCMV-Myc-LTA兩種質(zhì)粒,可以用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)N端帶有HA標(biāo)簽的人源JP5和Myc標(biāo)簽的LTA (large T antigen)融合蛋白。因?yàn)镴P5和LTA蛋白間具有較強(qiáng)的相互作用,本質(zhì)粒對(duì)可作為共轉(zhuǎn)染細(xì)胞免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)的陽性對(duì)照使用,也可以單獨(dú)轉(zhuǎn)染細(xì)胞作為免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)的陽性對(duì)照使用。
免疫沉淀或免疫共沉淀是研究蛋白或蛋白與蛋白相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)的常用實(shí)驗(yàn)技術(shù),通過使用特異性抗體和可結(jié)合抗體的介質(zhì)(如Protein A/G Agarose或Protein A/G磁珠),或直接使用偶聯(lián)特異性抗體的介質(zhì)(如瓊脂糖凝膠或磁珠),然后通過離心或磁力從溶液中分離出抗原和抗體復(fù)合物,從而將目標(biāo)蛋白質(zhì)從復(fù)雜樣品中分離出來,隨后可以用于Western印跡檢測或質(zhì)譜分析等[1-2]。
pCMV-HA-JP5質(zhì)粒表達(dá)JP5。JP5中文名為細(xì)胞腫瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5),全長393氨基酸,理論分子量為43.7kDa,實(shí)際分子量約為53kDa,是調(diào)控細(xì)胞周期的重要轉(zhuǎn)錄因子,主要功能包括調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、維持基因組穩(wěn)定性和抑制腫瘤血管生成等,野生型的JP5是一個(gè)重要的抑癌基因[3]。
pCMV-Myc-LTA質(zhì)粒表達(dá)LTA。LTA即SV40大T抗原(SV40 large T antigen),也稱SV40gp6 large T antigen (Macaca mulatta polyomavirus 1),全長708氨基酸,分子量為81.6kDa,是一種六聚體蛋白。當(dāng)LTA單獨(dú)表達(dá)時(shí)能誘導(dǎo)靜止細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)化,可以誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤的形成,為研究DNA復(fù)制和細(xì)胞轉(zhuǎn)化提供了非常有用的模型[4]。
本質(zhì)粒對(duì)均含有CMV啟動(dòng)子,可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá),均帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性。
本質(zhì)粒對(duì)用于磁珠法免疫共沉淀的效果參考圖1A,用于瓊脂糖凝膠法免疫共沉淀的效果參考圖1B。
圖1. 的HA&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(JP07045)用于免疫共沉淀的效果圖。圖A使用了HA標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(磁珠法) (JP2085)和Myc標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(磁珠法) (JP2083),圖B使用了HA標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(瓊脂糖凝膠法) (JP2006)和Myc標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(瓊脂糖凝膠法) (JP2004)。293T細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)單獨(dú)或共轉(zhuǎn)染pCMV-HA-JP5和pCMV-Myc-LTA質(zhì)粒36小時(shí)后,使用Western及IP細(xì)胞裂解液(JP010013)裂解。泳道1為小鼠IgG磁珠或瓊脂糖凝膠免疫沉淀后洗脫的樣品,為免疫共沉淀的陰性對(duì)照;泳道2、3和4為磁珠或瓊脂糖凝膠免疫沉淀后洗脫的樣品,其中圖A是經(jīng)HA Peptide或c-Myc Peptide洗脫后的樣品,圖B是經(jīng)SDS-PAGE Sample Loading Buffer洗脫后的樣品,從泳道4可觀察到共轉(zhuǎn)染的HA-JP5與Myc-LTA可以相互作用。Input即全細(xì)胞裂解液(Total cell lysate)。Western印跡成像由BeyoImager? 600化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)完成(EI600)。實(shí)際結(jié)果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
推薦使用的測序引物序列如下:
CMV-F primer: 5′ -CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3′
BGH-R primer: 5′-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′
pCMV-HA-JP5和pCMV-Myc-LTA的全序列信息:JP07045-1 pCMV-HA-JP5-全序列.txt;JP07045-2 pCMV-Myc-LTA-全序列.txt。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP07045S-1
pCMV-HA-JP5
1μg
JP07045S-2
pCMV-Myc-LTA
1μg
—
說明書
1份
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP07045M-1
pCMV-HA-JP5
100μg
JP07045M-2
pCMV-Myc-LTA
100μg
—
說明書
1份
保存條件:
-20℃保存。
注意事項(xiàng):
本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本質(zhì)粒對(duì)僅經(jīng)過測序、免疫沉淀和免疫共沉淀驗(yàn)證,未經(jīng)過功能性驗(yàn)證。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
JP07041S
Flag&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)
各1μg
1776
JP07041M
Flag&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)
各100μg
2338
自行研發(fā)生產(chǎn)的Flag&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(Positive Control Plasmids Pair for Flag&Myc Co-IP)包含pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA兩種質(zhì)粒,可以用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)N端帶有3X Flag標(biāo)簽的人源JP5和Myc標(biāo)簽的LTA (large T antigen)融合蛋白。因?yàn)镴P5和LTA蛋白間具有較強(qiáng)的相互作用,本質(zhì)粒對(duì)可作為共轉(zhuǎn)染細(xì)胞免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)的陽性對(duì)照使用,也可以單獨(dú)轉(zhuǎn)染細(xì)胞作為免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)的陽性對(duì)照使用。
免疫沉淀或免疫共沉淀是研究蛋白或蛋白與蛋白相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)的常用實(shí)驗(yàn)技術(shù),通過使用特異性抗體和可結(jié)合抗體的介質(zhì)(如Protein A/G Agarose或Protein A/G磁珠),或直接使用偶聯(lián)特異性抗體的介質(zhì)(如瓊脂糖凝膠或磁珠),然后通過離心或磁力從溶液中分離出抗原和抗體復(fù)合物,從而將目標(biāo)蛋白質(zhì)從復(fù)雜樣品中分離出來,隨后可以用于Western印跡檢測或質(zhì)譜分析等[1-2]。
pCMV-3X Flag-JP5質(zhì)粒表達(dá)JP5。JP5中文名為細(xì)胞腫瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5),全長393氨基酸,理論分子量為43.7kDa,實(shí)際分子量約為53kDa,是調(diào)控細(xì)胞周期的重要轉(zhuǎn)錄因子,主要功能包括調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、維持基因組穩(wěn)定性和抑制腫瘤血管生成等,野生型的JP5是一個(gè)重要的抑癌基因[3]。
pCMV-Myc-LTA質(zhì)粒表達(dá)LTA。LTA即SV40大T抗原(SV40 large T antigen),也稱SV40gp6 large T antigen (Macaca mulatta polyomavirus 1),全長708氨基酸,分子量為81.6kDa,是一種六聚體蛋白。當(dāng)LTA單獨(dú)表達(dá)時(shí)能誘導(dǎo)靜止細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)化,可以誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤的形成,為研究DNA復(fù)制和細(xì)胞轉(zhuǎn)化提供了非常有用的模型[4]。
本質(zhì)粒對(duì)均含有CMV啟動(dòng)子,可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá),均帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性。
本質(zhì)粒對(duì)用于磁珠法免疫共沉淀的效果參考圖1A,用于瓊脂糖凝膠法免疫共沉淀的效果參考圖1B。
圖1. 的Flag&Myc Co-IP陽性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(JP07041)用于免疫共沉淀的效果圖。圖A使用了Flag標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(磁珠法) (JP2081)和Myc標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(磁珠法) (JP2083),圖B使用了Flag標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(瓊脂糖凝膠法) (JP2002)和Myc標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒(瓊脂糖凝膠法) (JP2004)。293T細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)單獨(dú)或共轉(zhuǎn)染pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA質(zhì)粒36小時(shí)后,使用Western及IP細(xì)胞裂解液(JP010013)裂解,并使用相應(yīng)的標(biāo)簽蛋白免疫沉淀試劑盒進(jìn)行免疫沉淀。泳道1為小鼠IgG磁珠或瓊脂糖凝膠免疫沉淀后洗脫的樣品,為免疫共沉淀的陰性對(duì)照;泳道2、3和4為磁珠或瓊脂糖凝膠免疫沉淀后洗脫的樣品,其中圖A是經(jīng)3X Flag Peptide或c-Myc Peptide洗脫后的樣品,圖B是經(jīng)SDS-PAGE Sample Loading Buffer洗脫后的樣品,從泳道4可觀察到共轉(zhuǎn)染的Flag-JP5與Myc-LTA可以相互作用。Input即全細(xì)胞裂解液(Total cell lysate)。Western印跡成像由BeyoImager? 600化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)完成(EI600)。實(shí)際結(jié)果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
推薦使用的測序引物序列如下:
CMV-F primer: 5′ -CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3′
BGH-R primer: 5′-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′
pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA的全序列信息:JP07041-1 pCMV-3X Flag-JP5-全長序列.txt;JP07041-2 pCMV-Myc-LTA-全序列.txt。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP07041S-1
pCMV-3X Flag-JP5
1μg
JP07041S-2
pCMV-Myc-LTA
1μg
—
說明書
1份
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP07041M-1
pCMV-3X Flag-JP5
100μg
JP07041M-2
pCMV-Myc-LTA
100μg
—
說明書
1份
保存條件:
-20℃保存。
注意事項(xiàng):
本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本質(zhì)粒對(duì)僅經(jīng)過測序、免疫沉淀和免疫共沉淀驗(yàn)證,未經(jīng)過功能性驗(yàn)證。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Mouse Anti-Myc Monoclonal Antibody(9E10)
貨號(hào):NBK1501
規(guī)格:30ul / 100ul / 1ml
品牌:JinPan
Product Data | |
Product Name | Mouse Anti-Myc Monoclonal Antibody(9E10) |
Clone Name | 9E10 |
Applications | FC, IF, IP, WB |
Target | Myc tag |
Host | Mouse |
Clonality | Monoclonal |
Immunogen | AEEQKLISEEDLLRKRREQLKHKLE conjugated to KLH, corresponding to C terminal amino acids 408-432 of human c-Myc |
Formulation | 0.64 mg/ml in PBS (PH 7.3) containing 1% BSA, 50% glycerol and 0.02% sodium azide |
Concentration | Lot dependent |
Conjugation | Unconjugated |
Storage Condition | Stable for 1 year at -20°C from date of shipment. For maximum recovery of product, centrifuge the original vial after thawing and prior to opening the cap. Aliquot to avoid repeated freezing and thawing. Aliquot will be stable at 4°C for 3 months. |
Synonyms | 9E10 antibody; 9E10 anti myc; 9E10 myc; anti-Myc; anti-myc antibodies; Anti-myc Antibody; anti c-myc; anti cmyc; anti myc; c-myc antibody; cmyc antibody; myc antibody; tag antibody |
Product Data | |
Product Name | 9E10, Anti-Myc Monoclonal Antibody |
Clone Name | 9E10 |
Applications | FC, IF, IP, WB |
Target | Myc tag |
Host | Mouse |
Clonality | Monoclonal |
Immunogen | AEEQKLISEEDLLRKRREQLKHKLE conjugated to KLH, corresponding to C terminal amino acids 408-432 of human c-Myc |
Isotype | IgG1 |
Formulation | 0.64 mg/ml in PBS (PH 7.3) containing 1% BSA, 50% glycerol and 0.02% sodium azide |
Concentration | Lot dependent |
Conjugation | Unconjugated |
Storage Condition | Store at -20°C. |
*Delivery time may vary from web posted schedule. Occasional delays may occur due to unforeseen complexities in the preparation of your product. International customers may expect an additional 1-2 weeks in shipping.
]]>產(chǎn)品介紹:
c-Myc 蛋白含有 bHLH 結(jié)構(gòu)域,該蛋白在正常機(jī)體發(fā)育和腫瘤發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc 是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子,其異常表達(dá)能促進(jìn)多種癌癥的的發(fā)生和發(fā)展。將人 p62 c-Myc蛋白的 410-419 這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的 N 端或者是 C 端,可以對(duì)目的蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測、定位和純化。
抗體來源:小鼠
交叉反應(yīng):c-Myc 標(biāo)簽融合蛋白
克隆類型:單克隆抗體
亞型:IgG2A
來源:293 細(xì)胞表達(dá)的重組抗體
純化方式:rProtein A 親和純化
產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE 檢測
儲(chǔ)存緩沖液:1×PBS (pH7.4) ,0.02%疊氮鈉,50%甘油
儲(chǔ)存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃可保存二年,避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品應(yīng)用:
濃度:1 mg/mL
WB=1/2000-1/30000
ELISA=1/5000-1/15000
IP=0.5μg-4μg
IF=1/200
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
AB001-01 | Anti-c-Myc Antibody | 100μg |
AB001-03 | Anti-c-Myc Antibody | 1000μg |