小说阅读网免费小说,穿越小说完本,完美世界有声小说全集 http://dadafen.cn 生化試劑、耗材專業(yè)供應(yīng)商 Fri, 12 Jul 2024 02:11:04 +0000 zh-CN hourly 1 https://wordpress.org/?v=6.2.6 Rat CRP ELISA Kit http://dadafen.cn/62794.html Fri, 12 Jul 2024 02:11:04 +0000 http://dadafen.cn/62794.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

PC188
Rat CRP ELISA Kit
96次

3198

的Rat CRP ELISA Kit (Rat C-Reactive Protein Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠C反應(yīng)蛋白酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的CRP的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為112pg/ml,與大鼠Pentraxin 2、Leptin,人CRP,小鼠CRP 等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
C反應(yīng)蛋白(C-Reactive Protein, CRP),又叫正五聚蛋白1 (Pentraxin?1),是一種非糖基化蛋白,屬于正五聚蛋白家族,該家族中還包括正五聚蛋白2 (Pentraxin 2/SAP)和正五聚蛋白3 (Pentraxin 3/TSG-14)。CRP的主要功能是作為先天性免疫反應(yīng)的傳感器和活化劑。在人體內(nèi),CRP是一種主要的急性時相蛋白,其循環(huán)濃度在炎癥初始時會顯著升高。然而在小鼠體內(nèi),血漿CRP水平在炎癥發(fā)生期間僅出現(xiàn)輕微上升,正五聚蛋白2則具有與CRP在人體內(nèi)相類似的濃度變化。CRP蛋白通過非共價鍵自組裝形成分子量在110-120kDa之間的五聚體,成熟的大鼠CRP與小鼠CRP和人CRP分別具有71%和64%的氨基酸同源性。
CRP能夠與凋亡的細(xì)胞及細(xì)菌結(jié)合并促進(jìn)其被吞噬細(xì)胞吞噬,CRP還能與補(bǔ)體級聯(lián)系統(tǒng)中的一些蛋白如C1q、C4BP和Factor H結(jié)合,增強(qiáng)經(jīng)典補(bǔ)體激活途徑的活化,并增加C3b蛋白的沉積,在之后的應(yīng)答過程中,CRP能夠通過與C4BP和Factor?H結(jié)合抑制補(bǔ)體調(diào)節(jié)細(xì)胞的溶解。這些作用能夠誘導(dǎo)補(bǔ)體抑制蛋白CD46、CD59和CD55/DAF的表達(dá),抑制膜攻擊復(fù)合物(Membrane?Attack?Complex,?MAC)的合成。
CRP與巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞表面的Fcγ?RIA和Fcγ?RIIB結(jié)合使得CRP連接的靶細(xì)胞被細(xì)胞吞噬清除,F(xiàn)c受體也是這一過程的必不可少的受體之一。CRP與Fcγ?R?I結(jié)合,誘導(dǎo)Src活化,并抑制炎癥反應(yīng)。另外CRP還能夠促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟,增強(qiáng)體液免疫。但在心血管疾病當(dāng)中,CRP能夠與被氧化的低密度脂蛋白結(jié)合,加劇冠狀動脈梗塞部位的組織損傷,抑制受損血管內(nèi)皮的修復(fù)。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中大鼠CRP的濃度,其原理見圖1。大鼠CRP特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠CRP會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠CRP抗體后,生物素化抗大鼠CRP抗體與大鼠CRP結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠CRP濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中大鼠CRP濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PC188-1

大鼠CRP抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC188-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

20ml

PC188-3

大鼠CRP標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC188-4

大鼠CRP生物素化抗體

10ml

PC188-5

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC188-6

洗滌液(20X)

30ml

PC188-7

TMB溶液

10ml

PC188-8

終止液

5ml

PC188-9

封板膜(透明)

2張

PC188-10

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其他組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Mouse/Rat Clusterin ELISA Kit http://dadafen.cn/62793.html Fri, 12 Jul 2024 02:11:02 +0000 http://dadafen.cn/62793.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

PC179
Mouse/Rat Clusterin ELISA Kit
96次

3198

的Mouse/Rat Clusterin ELISA Kit (Mouse/Rat Clusterin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠/大鼠聚集素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠/大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Clusterin的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為0.44ng/ml,與小鼠的Leptin、TGF-β RI/Fc Chimera、TGF-β RII沒有交叉反應(yīng),與人的Clusterin有4.9%的交叉反應(yīng)性,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
聚集素(Clusterin),又稱載脂蛋白J (Apolipoprotein J)、SGP-2、TRPM-2或SP-40,是一種多功能性分泌蛋白。因其能夠誘導(dǎo)細(xì)胞聚集所以被稱為聚集素。Clusterin能夠與多種分子結(jié)合,并且還能作為胞外錯誤折疊蛋白的分子伴侶。其同樣參與對細(xì)胞的增殖、凋亡和癌變過程的調(diào)控。Clusterin在多種組織中都有表達(dá),包括成熟的睪丸、卵巢、腎上腺、肝臟、心臟、大腦和胚胎發(fā)育過程時的上皮組織中。小鼠Clusterin以前體蛋白的形式合成,包括兩個螺旋卷曲域、兩個核定位信號區(qū)域(NLS)和一個肝素結(jié)合域。經(jīng)過細(xì)胞內(nèi)剪切后,信號肽被切除,得到分子量相當(dāng)?shù)摩伶満挺骆?,二者通過二硫鍵連接形成分子量為80kDa的異質(zhì)二聚體被分泌至胞外。成熟的小鼠Clusterin與人Clusterin和大鼠Clusterin分別具有77%和93%的序列相似性。
體內(nèi)高濃度的Clusterin主要作為高密度脂蛋白的組成之一,通過與LRP-2/Megalin相互作用從而被細(xì)胞內(nèi)化并分解。Clusterin能夠與未被氧化修飾的LDL結(jié)合并抵消,因此能夠減少LDL對動脈粥樣硬化患者的損害。Clusterin具有的分子伴侶的功能還可以幫助減少β-淀粉樣蛋白的累積,減緩阿爾茨海默癥患者淀粉樣蛋白斑的形成。在阿爾茨海默癥患者、帕金森患者和多發(fā)性硬化患者的腦脊液以及腎損傷患者或膀胱癌患者尿液中,Clusterin濃度會出現(xiàn)顯著升高。Clusterin循環(huán)水平的升高會通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡和促進(jìn)EMT過程增強(qiáng)腫瘤侵襲性。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中Clusterin的濃度,其原理見圖1。Clusterin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的Clusterin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗Clusterin抗體后,生物素化抗Clusterin抗體與Clusterin結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。Clusterin濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1.雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝

PC179-1
Clusterin抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PC179-2
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)
60ml

PC179-3
Clusterin標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

PC179-4
Clusterin生物素化抗體
10ml

PC179-5
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

PC179-6
洗滌液(20X)
30ml

PC179-7
TMB溶液
10ml

PC179-8
終止液
5ml

PC179-9
封板膜(透明)
2張

PC179-10
封板膜(白色)
2張


說明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat TIMP-1 ELISA Kit http://dadafen.cn/62702.html Fri, 12 Jul 2024 02:07:48 +0000 http://dadafen.cn/62702.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP85
Rat TIMP-1 ELISA Kit
96次

3398

的Rat TIMP-1 ELISA Kit (Rat Tissue Inhibitors of Metalloproteinases 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠金屬蛋白酶組織抑制劑1酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TIMP-1的ELISA試劑盒。

本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為24pg/ml,與人TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4, 小鼠TIMP-1等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)是一種具有鋅指結(jié)構(gòu)的肽鏈內(nèi)切酶,能夠催化細(xì)胞外基質(zhì)蛋白發(fā)生降解,從而調(diào)控發(fā)育、組織重構(gòu)、傷口愈合和腫瘤轉(zhuǎn)移等過程。MMPs以酶原形式分泌,酶原經(jīng)過蛋白水解后變成有活性的MMPs。金屬蛋白酶組織抑制劑(Tissue Inhibitors of Metalloproteinases, TIMP)通過與MMPs形成1:1的復(fù)合物抑制MMPs活性。TIMPs與MMPs以非共價鍵相連,能夠阻止MMP與底物連接。TIMP-1屬于誘導(dǎo)型蛋白而TIMP-2屬于組成型蛋白,二者都屬于游離蛋白且分布廣泛;TIMP-3主要分布在細(xì)胞外基質(zhì),TIMP-4則只存在于心肌組織。
TIMP-1是一種氨基酸長度為184的糖基化蛋白,但糖基化并非維持其活性所必須。TIMP-1具有12個半胱氨酸殘基,參與形成結(jié)構(gòu)中的二硫鍵,分子N端具有與MMP底物結(jié)合位點相結(jié)合的基團(tuán),C端則能夠與MMP外部結(jié)合,增強(qiáng)整體的親和力。TIMP-1與無活性的pro-MMP-9具有很強(qiáng)的結(jié)合能力,在與pro-MMP-9形成復(fù)合物后,TIMP-1憑借N端的結(jié)合位點依舊保持著抑制其他活化MMP的能力。
許多細(xì)胞和組織都能夠合成TIMP-1。TIMP-1基因的轉(zhuǎn)錄受到IL-1、IL-6、OSM、LIF和TNF-α等許多細(xì)胞因子和佛波酯的調(diào)控。TIMP-1的許多生理功能都與MMPs密切相關(guān),MMP/TIMP-1濃度失衡會導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎、腫瘤生長和轉(zhuǎn)移等病理改變。另一方面,TIMP-1也具有一些獨立的功能,例如TIMP-1能夠抑制B細(xì)胞的凋亡,說明TIMP-1除了抑制MMPs外,還能夠與一些特定細(xì)胞結(jié)合并進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),促進(jìn)特定細(xì)胞的存活和生長。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中大鼠TIMP-1的濃度,其原理見圖1。大鼠TIMP-1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠TIMP-1會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠TIMP-1抗體后,生物素化抗大鼠TIMP-1抗體與大鼠TIMP-1結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠TIMP-1濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中大鼠TIMP-1濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP85-1

大鼠TIMP-1抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP85-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP85-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJP85-4

大鼠TIMP-1標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP85-5

大鼠TIMP-1生物素化抗體

10ml

JJP85-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP85-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP85-8

TMB溶液

10ml

JJP85-9

終止液

5ml

JJP85-10

封板膜(透明)

2張

JJP85-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Mouse/Rat TGF-β1 ELISA Kit http://dadafen.cn/62701.html Fri, 12 Jul 2024 02:07:46 +0000 http://dadafen.cn/62701.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP8
Mouse/Rat TGF-β1 ELISA Kit
96次

2798

的Mouse/Rat TGF-β1 ELISA Kit (Mouse/Rat Transforming Growth Factor-β1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠/大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠或大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TGF-β1的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為24.5pg/ml,與小鼠TGF-β2、TGF-β3和大鼠TGF-β2、TGF-β3等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。由于成熟的大鼠TGF-β1與小鼠TGF-β1具有100%的氨基酸同源性,因此兩種蛋白均能用本試劑盒進(jìn)行檢測。
轉(zhuǎn)化生長因子(Transforming Growth Factor, TGF)是一種多效性細(xì)胞因子,主要有TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3三種類型,其具有調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生、傷口愈合、免疫應(yīng)答、細(xì)胞增殖和分化多種功能。TGF-β家族還包括骨形成蛋白(Bone?Morphogenetic?Protein,?BMP)、生長分化因子(Growth Differentiation Factors, GDFs)和神經(jīng)元營養(yǎng)因子等其他蛋白因子,該家族成員在結(jié)構(gòu)上均能夠形成多個鏈內(nèi)二硫鍵。
小鼠及大鼠TGF-β1的cDNA編碼產(chǎn)生長度為390個氨基酸的前體肽,其中包括29個氨基酸的信號肽和361個氨基酸的前體蛋白。在弗林蛋白酶的作用下,前體蛋白形成249個氨基酸的相關(guān)肽(Latency-associated Peptide, LAP)和112個氨基酸的成熟TGF-β1,二者都以同源二聚體的形式存在。經(jīng)過酶切作用并被分泌出來后,這兩個二聚體通過非共價鍵連接形成了小的無活性復(fù)合物。在多細(xì)胞中,小的無活性復(fù)合物通過LAP與前體TGF-β結(jié)合蛋白(Latent TGF-β Binding Protein, LTBP)結(jié)合,形成大的無活性復(fù)合物,但這兩種復(fù)合物都無法與TGF-β受體結(jié)合,發(fā)揮生物學(xué)活性,復(fù)合物的激活對TGF-β在體內(nèi)發(fā)揮作用十分重要。成熟的大鼠TGF-β1與小鼠TGF-β1具有100%的氨基酸同源性,與豬、人及犬TGF-β1也具有99%的氨基酸同源性。
TGF-β1的高親和受體是由TGF-β RI和TGF-β RII組成的受體復(fù)合物,TGF-β RI和TGF-β RII都屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶受體家族。TGF-β RII與TGF-β結(jié)合后,就能夠激活并磷酸化TGF-β RI。活化的TGF-β RI又能激活Smad蛋白,從而調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程。TGF-β RI又稱為活化素受體樣激酶(Activin Recptor-like Kinase, ALK-5),幾乎表達(dá)于所有細(xì)胞表面,其他兩種I型受體,ALK-1和ALK-2也能夠與TGF-βRII搭檔組成TGF-β信號傳遞受體復(fù)合物參與TGF-β信號傳遞。除了TGF-β RI和TGF-β RII,還有第三種TGF-β1受體,TGF-βRIII (β蛋白聚糖或內(nèi)皮糖蛋白)同樣能夠調(diào)控TGF-β功能。TGF-β首先與TβRII結(jié)合,然后募集并磷酸化TβRI,活化的受體隨后磷酸化受體激活型Smads蛋白(R-Smads),磷酸化后的R-Smads再與輔助型Smads (Co-Smads)結(jié)合,形成異源寡聚體復(fù)合物,隨后進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),調(diào)節(jié)目標(biāo)基因。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中小鼠/大鼠TGF-β1的濃度,其原理見圖1。小鼠/大鼠TGF-β1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的小鼠/大鼠TGF-β1會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠/大鼠TGF-β1抗體后,生物素化抗小鼠/大鼠TGF-β1抗體與小鼠/大鼠TGF-β1結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠/大鼠TGF-β1濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中小鼠/大鼠TGF-β1濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP8-1

小鼠/大鼠TGF-β1抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP8-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJJP8-3

小鼠/大鼠TGF-β1標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP8-4

小鼠/大鼠TGF-β1生物素化抗體

10ml

JJJP8-5

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJJP8-6

洗滌液(20X)

30ml

JJJP8-7

TMB溶液

10ml

JJJP8-8

1N HCl

3ml

JJJP8-9

1.2N NaOH

3ml

JJJP8-10

終止液

5ml

JJJP8-11

封板膜(透明)

2張

JJJP8-12

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
同種試劑盒不同批號的試劑盒組分不能混用,每批次試劑盒均經(jīng)過獨立測試。不同試劑盒相同名稱的組分嚴(yán)禁混用,多個試劑盒同時檢測時,注意避免混淆相同名稱不同試劑盒的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Human/Rat PDGF-BB ELISA Kit http://dadafen.cn/62687.html Fri, 12 Jul 2024 02:07:17 +0000 http://dadafen.cn/62687.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP75
Human/Rat PDGF-BB ELISA Kit
96次

3198

的Human/Rat PDGF-BB ELISA Kit (Human/Rat Platelet-Derived Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人/大鼠血小板源性生長因子酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人或大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的PDGF-BB的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為18pg/ml,與人FGF acidic、FGF basic、FGF-4、G-CSF、GM-CSF、HGF、IFN-γ、IGF-I、IGF-II等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
血小板源性細(xì)胞因子(Platelet-Derived?Growth?Factor,?PDGF)家族成員包括4個同源二聚體PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-CC、PDGF-DD和一個異源二聚體PDGF-AB。這些蛋白和相關(guān)的VEGF家族蛋白具有共同的保守PDGF/VEGF同源區(qū)域,該區(qū)域中包含高度保守的半胱氨酸殘基。PDGF-B以前體蛋白原的形式合成,包含有信號肽,成熟區(qū)域,N端前體肽和C端的延伸區(qū)域。大多數(shù)細(xì)胞都能產(chǎn)生PDGF-A和PDGF-B鏈,兩種肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中通過二硫鍵連接形成無活性的同源或異源二聚體前體。隨后在反面高爾基體網(wǎng)中,經(jīng)過酶切作用形成有活性的成熟蛋白。能夠產(chǎn)生PDGF-B的細(xì)胞主要有巨核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞、施萬細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。成熟的人PDGF-BB與犬PDGF-BB和小鼠PDGF-BB分別具有96%和89%的氨基酸同源性。
PDGF家族蛋白通過與受體結(jié)合參與調(diào)控多種細(xì)胞功能,PDGF受體包含兩個亞基,PDGF?Rα和PDGF?Rβ,PDGF-BB與受體?結(jié)合后能夠誘導(dǎo)兩種亞基發(fā)生同源或異源二聚化,主要參與調(diào)控發(fā)育和再生過程。血液中的PDGF主要來自于血小板,當(dāng)血小板激活后,便會分泌產(chǎn)生大量的PDGF。。
PDGF-BB與受體結(jié)合后,首先發(fā)生受體自身酪氨酸殘基的磷酸化,隨后在細(xì)胞質(zhì)酪氨酸激酶、磷脂酶C-γ和SHp-2的參與下,激活包括MAPK、PKB/Akt在內(nèi)的一系列酶聯(lián)反應(yīng)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中PDGF-BB的濃度,其原理見圖1。PDGF-BB特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的PDGF-BB會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗PDGF-BB抗體后,生物素化抗PDGF-BB抗體與PDGF-BB結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。PDGF-BB濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中PDGF-BB濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP75-1

PDGF-BB抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJP75-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJP75-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJP75-4

PDGF-BB標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP75-5

PDGF-BB生物素化抗體

10ml

JJP75-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP75-7

洗滌液(20X)

30ml

JJP75-8

TMB溶液

10ml

JJP75-9

終止液

5ml

JJP75-10

封板膜(透明)

2張

JJP75-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat NGAL ELISA Kit http://dadafen.cn/62684.html Fri, 12 Jul 2024 02:07:11 +0000 http://dadafen.cn/62684.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP7
Rat NGAL ELISA Kit
96次

3198

的Rat NGAL ELISA Kit (Rat Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的NGAL的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為74pg/ml,與人Lipocalin-2、Lipocalin-1
,小鼠Lipocalin-2、Lipocalin-1,大鼠MMP-9等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin, MGAL),又稱脂質(zhì)運載蛋白2 (Lipocalin 2),是一種分子量為25kDa的糖蛋白,屬于Lipocalin家族,同時也是嗜中性粒細(xì)胞顆粒的組成部分。在炎癥期間,NGAL主要由巨噬細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞合成。NGAL能夠參與固有免疫應(yīng)答、細(xì)胞分化、腫瘤生成和細(xì)胞存活等多種過程。NGAL能以單體形式、同源二聚體形式存在,也能夠與MMP-9組成異質(zhì)二聚體。成熟的大鼠NGAL與小鼠NGAL具有81%的氨基酸同源性。
NGAL能夠與細(xì)菌分泌出的兒茶酚胺鐵載體結(jié)合,抑制細(xì)菌鐵離子吸收,因此在固有免疫中NGAL能夠作為抑菌劑發(fā)揮作用。TLR4激活會誘導(dǎo)免疫細(xì)胞和上皮細(xì)胞產(chǎn)生NGAL。部分細(xì)菌通過產(chǎn)生修飾后的鐵載體使得NGAL無法與之結(jié)合,從而逃避免疫清除。哺乳動物細(xì)胞經(jīng)由NGAL介導(dǎo)的鐵離子的吸收對于一些鐵離子敏感基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控具有重要影響。在腎臟中,NGAL介導(dǎo)的鐵離子運輸對于保護(hù)腎臟免受損傷十分必要。
在一些非細(xì)菌性炎癥中,NGAL的表達(dá)也會有所增加,例如牛皮癬、潰瘍性結(jié)腸炎和肥胖脂肪組織中。NGAL還能夠促進(jìn)肝細(xì)胞的胰島素抵抗。此外,在貧血和缺氧條件下,NGAL表達(dá)也會上調(diào),其能夠抑制紅細(xì)胞的分化過程。在一些腫瘤病灶或腫瘤相關(guān)基質(zhì)中,NGAL表達(dá)也會上調(diào),但是其對腫瘤的具體作用取決于具體的腫瘤類型和所處的微環(huán)境狀態(tài)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中大鼠NGAL的濃度,其原理見圖1。大鼠NGAL特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠NGAL會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠NGAL抗體后,生物素化抗大鼠NGAL抗體與大鼠NGAL結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠NGAL濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中大鼠NGAL濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP7-1

大鼠NGAL抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP7-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

20ml

JJJP7-3

大鼠NGAL標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP7-4

大鼠NGAL生物素化抗體

10ml

JJJP7-5

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJJP7-6

洗滌液(20X)

30ml

JJJP7-7

TMB溶液

10ml

JJJP7-8

終止液

5ml

JJJP7-9

封板膜(透明)

2張

JJJP7-10

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組份4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat MMP-9 ELISA Kit http://dadafen.cn/62679.html Fri, 12 Jul 2024 02:07:00 +0000 http://dadafen.cn/62679.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP7
Rat MMP-9 ELISA Kit
96次

3519

的Rat MMP-9 ELISA Kit (Rat Matrix Metalloproteinase 9 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MMP-9的ELISA試劑盒。

本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為46pg/ml,與大鼠MMP-8、Lipocalin-2、TIMP-1、人MMP-9等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)是一類Zn2+和Ca2+依賴性的肽鏈內(nèi)切酶,主要參與細(xì)胞外基質(zhì)降解和不同亞細(xì)胞環(huán)境下多種分子的表達(dá)過程。MMPs在胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、繁殖和組織重構(gòu)等許多生理過程中發(fā)揮重要作用,也同樣參與炎癥和自身免疫紊亂等病理過程。MMPs的內(nèi)源性抑制劑主要有α2巨球蛋白和金屬蛋白酶組織抑制劑(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase, TIMPs)。
基質(zhì)金屬蛋白酶9 (Matrix Metalloproteinases 9, MMP-9),又被稱作明膠酶B、92kDa IV型膠原蛋白酶、92kDa明膠酶和V型膠原蛋白酶,以糖基化酶原的形式分泌,經(jīng)過蛋白水解去除N端的前導(dǎo)肽后得到分子量為82kDa的活性MMP-9。活化的人MMP-9與小鼠MMP-9和大鼠MMP-9分別具有72%和74%的氨基酸同源性。MMP-9結(jié)構(gòu)上除了具有鋅指結(jié)構(gòu)外,在催化區(qū)域還具有三個連續(xù)的能夠與明膠結(jié)合的同源II型纖連蛋白。催化區(qū)域與C端的hemopexin-like區(qū)域通過一個脯氨酸富集的鉸鏈相連。MMP-9能夠特異性的降解細(xì)胞外基質(zhì)中的明膠成分,還能作用于III、IV、V、XI型膠原蛋白、彈性蛋白、巢蛋白和玻璃體結(jié)合蛋白。MMP-9還能夠作用于許多細(xì)胞因子、生長因子、β淀粉樣蛋白、神經(jīng)肽P物質(zhì)和髓鞘堿性蛋白,這會影響到這些可溶性因子的生物活性,并且能將它們從相關(guān)的細(xì)胞基質(zhì)中釋放出來。MMP-9還能夠觸發(fā)多種跨膜蛋白的信號傳遞或通過誘導(dǎo)這些跨膜蛋白脫落實現(xiàn)抑制其信號的效果,這些跨膜蛋白主要包括鈣粘蛋白、整合素、ICAM-1和CD44等。
能夠產(chǎn)生MMP-9的細(xì)胞主要包括中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、破骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞等。中性粒細(xì)胞分泌的MMP-9在一定程度上通過產(chǎn)生膠原蛋白來源多肽誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞分泌更多的MMP-9,從而加劇炎癥反應(yīng)。在骨形成及重構(gòu)、神經(jīng)元突觸重構(gòu)、移植過程的滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤及絲氨酸蛋白酶抑制劑失活等過程中MMP-9也發(fā)揮了重要作用。
MMP-9水平在一些炎癥性疾病中會出現(xiàn)升高,例如管腔內(nèi)血栓形成、動脈粥樣硬化、克羅恩病、丙肝病毒感染、結(jié)直腸癌和Duchenne肌肉萎縮等。MMP-9/TIMP-1的比率在多種硬化病人血清和囊性纖維化病人痰液中都有所升高,但是在巨細(xì)胞病毒感染時,該比率會出現(xiàn)下降。在卵巢癌和子宮感染患者的尿液中,游離MMP-9和MMP-9/Lipocalin-2/NGAL復(fù)合物濃度都分別有所上升。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中大鼠MMP-9的濃度,其原理見圖1。大鼠MMP-9特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠MMP-9會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠MMP-9抗體后,生物素化抗大鼠MMP-9抗體與大鼠MMP-9結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠MMP-9濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中大鼠MMP-9濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP7-1

大鼠MMP-9抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP7-2

樣品分析緩沖液

5ml

JJJP7-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

JJJP7-4

大鼠MMP-9標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP7-5

大鼠MMP-9生物素化抗體

10ml

JJJP7-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJJP7-7

洗滌液(20X)

30ml

JJJP7-8

TMB溶液

10ml

JJJP7-9

終止液

5ml

JJJP7-10

封板膜(透明)

2張

JJJP7-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat Leptin ELISA Kit http://dadafen.cn/62673.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:48 +0000 http://dadafen.cn/62673.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP68
Rat Leptin ELISA Kit
96次

3198

的Rat Leptin ELISA Kit (Rat Leptin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Leptin的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為74pg/ml,與大鼠的βIG-H3及人的Leptin均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
瘦素的高親和受體OB-R與糖蛋白130和粒細(xì)胞集落刺激因子受體具有一定的同源性,根據(jù)胞外域長度的不同分為OB-RL和OB-RS。OB-RL具有完整的胞外域,具有信號傳導(dǎo)的能力;OB-RS胞外域較短,只能與瘦素結(jié)合,但不能傳遞信號。OB-RL主要表達(dá)在下丘腦,被認(rèn)為是體重調(diào)節(jié)的重要分子;OB-RS則在肺、腎和造血細(xì)胞等多處都有表達(dá)。在小鼠、大鼠和人血漿中都檢測到了較高濃度的瘦素,在進(jìn)食或受到胰島素、胰高血糖素、細(xì)胞因子刺激后的機(jī)體應(yīng)答中,瘦素被認(rèn)為發(fā)揮了重要的作用。血漿中,瘦素主要以與瘦素結(jié)合蛋白結(jié)合的形式存在。
瘦素受體與瘦素結(jié)合后通過招募JAK2使瘦素受體上的三個關(guān)鍵酪氨酸位點發(fā)生磷酸化,磷酸化的Tyr位點能夠招募STAT3并使之磷酸化激活,隨后發(fā)生二聚化進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮功能,啟動SOCS3和NpY等靶基因的表達(dá);另外,SOCS3蛋白又能抑制激活的JAK2-STAT3通路,從而實現(xiàn)負(fù)反饋調(diào)節(jié)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中大鼠Leptin的濃度,其原理見圖1。大鼠Leptin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠Leptin會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠Leptin抗體后,生物素化抗大鼠Leptin抗體與大鼠Leptin結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠Leptin濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJP68-1
大鼠Leptin抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJP68-2
樣本分析緩沖液
5ml

JJP68-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

JJP68-4
大鼠Leptin標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJP68-5
大鼠Leptin生物素化抗體
10ml

JJP68-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJP68-7
洗滌液(20X)
30ml

JJP68-8
TMB溶液
10ml

JJP68-9
終止液
5ml

JJP68-10
封板膜(透明)
2張

JJP68-11
封板膜(白色)
2張


說明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat TIM-1/KIM-1/HAVCR ELISA Kit http://dadafen.cn/62671.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:44 +0000 http://dadafen.cn/62671.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJP63
Rat TIM-1/KIM-1/HAVCR ELISA Kit
96次

3198

的Rat TIM-1/KIM-1/HAVCR ELISA Kit (Rat T cell Immunoglobulin and Mucin domain-1Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠T細(xì)胞免疫球蛋白酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的TIM-1/KIM-1/HAVCR的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明,最小檢出量為13.6pg/ml,與人TIM-1、TIM-4、小鼠TIM-1、TIM-4等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
T細(xì)胞免疫球蛋白(T?cell?Immunoglobulin?and?Mucin?Domain-1,TIM-1),又稱腎臟損傷分子(Kidney?Injury?Molecule?1, KIM-1)或甲肝病毒細(xì)胞受體(Hepatitis?A?Virus?Cellular?Receptor?1,?HAVcr1),屬于TIM家族成員,主要參與調(diào)控固有免疫和獲得性免疫應(yīng)答。TIM-1屬于I型跨膜糖蛋白,結(jié)構(gòu)中包括一個N端免疫球蛋白樣區(qū)域、一個具有O連接和N連接糖基化的粘蛋白區(qū)域、一個跨膜片段和一個胞質(zhì)內(nèi)信號域。由于基因多態(tài)性或選擇性剪切,TIM-1存在多種粘蛋白區(qū)域缺失的變體。大鼠TIM-1的胞外域與小鼠和人TIM-1的相應(yīng)區(qū)域分別具有82%和41%的氨基酸序列相似性。
在體內(nèi),TIM-1在脾臟B細(xì)胞上有所表達(dá),并且是識別IL-10+調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的標(biāo)志物之一。TIM-1同時也在CD4+T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞和多種粘膜上皮細(xì)胞中表達(dá)。在樹突狀細(xì)胞成熟或腎臟受損后,活化的Th2細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞分別會出現(xiàn)TIM-1表達(dá)的上調(diào)。在基質(zhì)金屬蛋白酶的作用下會得到游離形式的TIM-1,當(dāng)腎臟發(fā)生病變時尿液中的TIM-1水平會顯著升高,因此TIM-1可以作為腎損傷的標(biāo)志物之一。
TIM-1作為受體能夠與多種配體結(jié)合,例如磷酯酰絲氨酸、白血球單一免疫球蛋白樣受體5?(LMIR5/CJP0700b)、TIM-1、TIM-4和多種包膜病毒糖蛋白。TIM-1與磷酯酰絲氨酸結(jié)合從而對凋亡細(xì)胞的吞噬過程進(jìn)行調(diào)控。LMIR5與游離型TIM-1或膜表面的TIM-1相互作用會誘導(dǎo)LIMR5介導(dǎo)的多種骨髓來源細(xì)胞的激活,包括巨噬細(xì)胞/單核細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。配體誘導(dǎo)的TIM-1信號傳遞能夠刺激T細(xì)胞的活化,增加Th2型細(xì)胞因子的產(chǎn)生。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中大鼠TIM-1的濃度,其原理見圖1。大鼠TIM-1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的大鼠TIM-1會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠TIM-1抗體后,生物素化抗大鼠TIM-1抗體與大鼠TIM-1結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。大鼠TIM-1濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中大鼠TIM-1濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

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大鼠TIM-1/KIM-1/HAVCR抗體預(yù)包被板

8孔×12條

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樣品分析緩沖液

5ml

JJP63-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJP63-4

大鼠TIM-1/KIM-1/HAVCR標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJP63-5

大鼠TIM-1/KIM-1/HAVCR生物素化抗體

10ml

JJP63-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

JJP63-7

洗滌液(20X)

30ml

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TMB溶液

10ml

JJP63-9

終止液

5ml

JJP63-10

封板膜(透明)

2張

JJP63-11

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效;試劑盒其它組份4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項:
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試,所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時,請獨立使用各個試劑盒中的試劑,請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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Rat Insulin ELISA Kit (Ultrasensitive) http://dadafen.cn/62661.html Fri, 12 Jul 2024 02:06:23 +0000 http://dadafen.cn/62661.html 繼續(xù)閱讀 ]]> 產(chǎn)品編號

JJJP6
Rat Insulin ELISA Kit (Ultrasensitive)
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的Rat Insulin ELISA Kit (Rat Insulin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠胰島素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種用于特異性地超高靈敏地定量檢測大鼠血清、血漿、細(xì)胞或組織裂解液、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的胰島素的ELISA試劑盒。最少5μl大鼠血清即可檢測,5μl普通大鼠血清可以導(dǎo)致吸光度比本底增加約0.1(不同大鼠略有不同),使用10μl大鼠血清檢測可以獲得非常理想的檢測數(shù)據(jù)。本試劑盒不僅適用于常規(guī)的大鼠血清胰島素水平檢測,還特別適合于糖耐量實驗(Glucose tolerance test, GTT)時測定每個時間點的血清胰島素水平。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。最小檢出量為0.1ng/ml,10μl 0.1ng/ml大鼠胰島素標(biāo)準(zhǔn)品可以導(dǎo)致吸光度比本底增加約0.07。與IGF-I、IGF-II、小鼠C肽、大鼠C肽均沒有交叉反應(yīng),與豬胰島素、綿羊胰島素、小鼠胰島素、牛胰島素及人胰島素分別有628%、256%、75%、110%和195%交叉反應(yīng)。板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
Insulin即胰島素,是由胰臟內(nèi)的胰島β細(xì)胞分泌產(chǎn)生的,分子量約5.8kDa。胰島β細(xì)胞首先合成含有信號肽(24個氨基酸殘基)的前胰島素原(preproinsulin),該信號肽將前胰島素原定位到粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。前胰島素原的信號肽被剪切后形成胰島素原(proinsulin),并被釋放到粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi),隨后在其中形成3個二硫鍵并正確折疊。隨后胰島素原進(jìn)入高爾基體,經(jīng)蛋白水解酶的作用,生成C肽(C-peptide)和由A鏈和B鏈通過兩個二硫鍵連接起來的胰島素。1923年和1958年,胰島素的發(fā)現(xiàn)和其氨基酸序列測定都獲得了諾貝爾獎。1965年,中國科學(xué)家實現(xiàn)人工全合成結(jié)晶牛胰島素,也是生命科學(xué)史上的重要成果。胰島素的分泌主要受血糖水平的調(diào)控,血液中葡萄糖水平升高時,更多的葡萄糖通過GLUT2進(jìn)入β細(xì)胞,并產(chǎn)生更多的ATP,ATP水平的升高導(dǎo)致ATP敏感的SUR1/Kir6.2鉀離子通道關(guān)閉,使細(xì)胞內(nèi)鉀離子集聚,從而引起細(xì)胞膜去極化,引發(fā)電壓門(voltage-gated)鈣離子通道打開,細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高,最終導(dǎo)致胰島素的分泌。胰島素的分泌分為兩個時段,第一個時段通常受血糖調(diào)控,持續(xù)時間約為10分鐘;第二個時段是一個比較持續(xù)和緩慢的過程,通常分泌的高峰出現(xiàn)在第一個時段后的2-3小時,并且不受血糖水平影響。胰島素的分泌不僅受葡萄糖調(diào)控,也受乳糖、核糖、精氨酸和亮氨酸等氨基酸、副交感神經(jīng)釋放的乙酰膽堿、腸道分泌的腸促胰島素(incretin)例如glucagon-like peptide-1 (GLP-1)和glucose-dependent insulinotropic peptide (GIP)、膽囊收縮素(cholecystokinin)、促胰島素分泌的磺脲(sulfonylruea)類藥物等的影響。胰島素的釋放可被緊張時釋放的去甲腎上腺素(norepinephrine)、交感神經(jīng)釋放的兒茶酚胺(catecholamine)、以及胰高血糖素等所抑制。

圖1. Insulin的信號通路示意圖

Insulin的信號通路是一個比較復(fù)雜的信號通路,主要是胰島素與屬于酪氨酸激酶的胰島素受體(Insulin receptor)結(jié)合,從而激活PI(3)K-Akt信號通路。Insulin的信號通路參見圖1。
胰島素的主要生物學(xué)功能是降低血糖,促進(jìn)合成代謝。胰島素可以促進(jìn)肝臟、肌肉、脂肪等器官和組織的葡萄糖攝入,抑制糖異生(gluconeogenesis),促進(jìn)糖原合成等。同時胰島素也可促進(jìn)脂質(zhì)合成和儲存,抑制脂質(zhì)分解,促進(jìn)蛋白合成并抑制蛋白降解,促進(jìn)DNA和RNA合成,抑制自噬(autophagy)。胰島素分泌不足或胰島素敏感性下降,導(dǎo)致不能有效降低血糖,是糖尿病發(fā)生的主要原因。胰島素分泌過量時,會導(dǎo)致低血糖,甚至出現(xiàn)驚厥、昏迷和休克。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中靶蛋白的的濃度,其原理見圖2。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時,其中的靶蛋白會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入辣根過氧化物酶標(biāo)記靶蛋白抗體后,辣根過氧化物酶標(biāo)記靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。靶蛋白濃度與A450值呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照樣品吸光度值,即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖2. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

JJJP6-1

大鼠Insulin抗體預(yù)包被板

8孔×12條

JJJP6-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

JJJP6-3

大鼠Insulin標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

JJJP6-4

辣根過氧化物酶標(biāo)記大鼠Insulin抗體

10ml

JJJP6-5

洗滌液(20X)

30ml

JJJP6-6

TMB溶液

10ml

JJJP6-7

終止液

5ml

JJJP6-8

封板膜(透明)

2張

JJJP6-9

封板膜(白色)

2張

說明書

1份

保存條件:
除標(biāo)準(zhǔn)品外,4℃保存6個月內(nèi)有效。標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個月內(nèi)有效。注意TMB溶液避光保存。
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請勿再次使用。
TMB對人體有刺激性,操作時請小心,并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
如果發(fā)現(xiàn)TMB辣根過氧化物酶顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成藍(lán)色,應(yīng)該停止使用。
加樣時,請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
不宜混用不同批號的試劑盒組份,每批次試劑盒均經(jīng)過獨立測試。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請輕輕晃動整個96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要,洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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