透析袋產(chǎn)品使用方法
透析通過在半透膜兩側(cè),從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)的擴(kuò)散過程,去除小分子。只有小于膜孔徑的分子可以通過膜,在全部料液中達(dá)到平衡。一旦達(dá)到平衡后,底物不再有“凈”移動,因為分子將以相同的速率,通過膜孔,進(jìn)入透析單元或出來。相反,不能通過膜孔的大分子,將被截留在其所處的膜的原有一側(cè)。
為去除不需要的底物,需要更換透析緩沖液,以形成新的濃度梯度。更換緩沖液后,顆粒會繼續(xù)從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)移動,直到再次達(dá)到平衡。每次更換透析緩沖液,膜內(nèi)部的底物按兩個部分的體積差,被進(jìn)一步純化。例如,在100mL的透析緩沖液中透析1ml的樣品,平衡時,可透析底物的濃度將被稀釋100倍。每更換100mL新的緩沖液,將使樣品再稀釋100倍。如更換3次100mL的透析緩沖液,且假定每次更換透析緩沖液前,均達(dá)到完全平衡,樣品種底物的稀釋倍數(shù)將為100x100x100,即1,000,000倍。
影響透析速率的因素有很多,包括:1)透析緩沖液體積;2)緩沖液組成;3)緩沖液更換次數(shù);4)透析時間;5)溫度以及6)顆粒粒徑與膜孔徑的比值。相比僅稍小于膜孔的底物,遠(yuǎn)小于膜孔的底物會更快地達(dá)到平衡,即需要透過的分子的分子量與膜孔的截留分子量(MWCO)差別越大,透析速率越快。
從透析的影響因素可見,特定樣品所需的透析時間很難預(yù)測。為徹底更換緩沖鹽,一般實驗時,多使用樣品體積200-500倍的透析緩沖液,在室溫條件下透析6-8h,并至少更換3次透析緩沖液。最后一次更換后,再4℃透析一日。這種方法也適合用于去除生物素標(biāo)記或交聯(lián)實驗中過量的標(biāo)記試劑和反應(yīng)副產(chǎn)物。
此外,由于在透析過程中,分子是雙向透過半透膜的,且每種底物達(dá)到其自身平衡的過程與其它底物無關(guān),所以,較易發(fā)生樣品稀釋。如果某一底物的濃度在膜外側(cè)較高,且粒徑足夠小,可以自由通過膜孔,其會有從透析緩沖液進(jìn)入膜內(nèi)部樣品的“凈”移動。
而水是非常小的分子,可以通過幾乎所有規(guī)格透析膜的膜孔。當(dāng)以較稀釋的緩沖液透析高溶質(zhì)濃度的樣品時,會有通過膜進(jìn)入透析膜的水的“凈”移動。當(dāng)樣品中含有甘油和某些糖時,因其具有較強(qiáng)的吸濕性,擴(kuò)散通過膜達(dá)到平衡后,會顯著影響水的滲透性,導(dǎo)致樣品體積變化。
為降低水的移動及其所導(dǎo)致的樣品體積的變化,透析時可使用“步進(jìn)式”方法,即需要使用低溶質(zhì)濃度緩沖液透析高溶質(zhì)濃度的樣品時,可先用稍高濃度的透析緩沖液進(jìn)行透析,之后每次更換緩沖液時,再逐步降低緩沖液濃度,并最終達(dá)到所需的緩沖液濃度,從而降低在透析過程每個階段,樣品和透析緩沖液的水“濃度”的影響。
樣品溶液的緩沖液置換和PH值的調(diào)節(jié)
去除鹽類,表面活性劑和溶劑
DNA電洗脫
濃縮蛋白質(zhì),多肽和抗體
小分子污染物清除
電泳前稀釋蛋白的制備
組織培養(yǎng)的提取純化
結(jié)合研究
纖維素透析袋 | 再生纖維素透析袋 | 普通型透析袋 | |
分子量 | 100-500.500-1000?5k?10k,20k,50k,100k,300k | 1k,2k.3.5k,8k,10k,25k,50k | 3.5k,7k,8-14k |
化學(xué)兼容性 | 適用于:甲醇,乙醇和異 不適用于:強(qiáng)極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷) |
適用于:烴,鹵代烴,醇酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于鹽酸(濃度>25%),硝酸(濃度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鈉和10%苯酚水溶液 | 與很多鹽兼容,比 如CaCl2、(NH4)2SO4,還可以有分子生物學(xué)和酶學(xué)常用的水溶液和有機(jī)溶液兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。 |
有機(jī)抗性 | 中等 | 好 | 好 |
污染物水平 | 不含重金屬和硫化物 | 不含重金屬和硫化物 | 破化物<0.3%,重金屬<50ppm |
包裝 | 溫型,0.05%疊氮化鈉 | 溫型,0.05%疊氮化鈉 | 干型 |
扁平寬度 | 10,16,24,31mm | 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm | 25,34,44,77mm |
PH范圍 | 2-9 | 2-12 | 5-9 |
溫度限度 | 37℃ | 60℃ | 可煮沸,可高壓滅菌 |
化學(xué)兼容性 | 無需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 無需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 | 在沸水或1mmol/l EDTA(pH?8.0)中將透析袋煮沸10分鐘 |
五、透析袋的選擇:
線留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分端,分一的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25。選擇做留分子量的經(jīng)驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留家。
正確選擇扁平寬度
透析袋的化學(xué)相容性
化學(xué)相容性主要用作使用指導(dǎo),不作為化學(xué)相容的保證。溫度,濃度,長時間哪光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用。建議您自設(shè)條件進(jìn)行測試。
兩種材質(zhì)的透析膜——纖維素酯和再生纖維素,同時提供兩種不同處理規(guī)模,標(biāo)準(zhǔn)級和生物技術(shù)級,后者更適于對純度較為敏感的生物學(xué)實驗,如涉及親和研究和核酸的實驗。此外,仕必純提供預(yù)組裝的即用型透析裝置,用于小量樣品的透析處理,這種裝置操作簡便,且可保證較高的樣品收率,可用于HPLC樣品制備、載體藥物的體外溶出等實驗。
纖維素透析袋和再生纖維素透析鏡。
韌性膜材料,不易破損
雜質(zhì)含量極少,可無需預(yù)處理,只需用去高子水清洗即可使用?的
孔徑標(biāo)準(zhǔn)均一
可選分子量范圍廣100-300000
技術(shù)參數(shù):
△.PH穩(wěn)定范圍5-9
△污染物水平·硫化物<0.3%,重金屬<50ppm
△化學(xué)兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2.NHH4)2SO4;還可與分子生物學(xué)及酶學(xué)中常用的水落劑、有機(jī)溶劑兼容,比如異丙醇、乙醇和丙酮。
△蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1?ng
透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
使用前處理:(試驗要求不高的可以使用簡易處理方法:在沸水中煮沸10分鐘左右即可使用)
1. 把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。
5. 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。
貨號 | 品名 | 產(chǎn)品簡介 | 截留分子量 | 產(chǎn)地品牌 |
131060 | 透析袋31-100D | CE膜,寬度31mm,直徑20mm | 100D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
131096 | 透析袋31-500D | CE膜,寬度31mm,直徑20mm | 500D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132636 | 透析袋18-1000D | RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm | 1000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132640 | 透析袋45-1000D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 1000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
1-0150-45 | 透析袋45-1000D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 1000D | 美國MFPI |
132620 | 透析袋18-2000D | RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm | 2000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132633 | 透析袋45-2000D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 2000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132590 | 透析袋18-3500D | RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm | 3500D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132592 | 透析袋45-3500D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 3500D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
1-0550-18 | 透析袋18-5000D | RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm | 5000D | 美國MFPI |
1-0550-30 | 透析袋30-5000D | RC膜,寬度30mm,直徑19.1mm | 5000D | 美國MFPI |
1-0550-40 | 透析袋40-5000D | RC膜,寬度40mm,直徑25.5mm | 5000D | 美國MFPI |
132579 | 透析袋12-8000D | RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm | 8000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132586 | 透析袋50-8000D | RC膜,寬度50mm,直徑32mm | 8000D | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132570 | 透析袋12-10000D | RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm | 10KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132576 | 透析袋45-10000D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 10KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132560 | 透析袋12-15000D | RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm | 15KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132566 | 透析袋45-15000D | RC膜,寬度45mm,直徑29mm | 15KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
131348 | 透析袋31-20000D | CE膜,寬度31mm,直徑20mm | 20KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132550 | 透析袋12-25000D | RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm | 25KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132554 | 透析袋34-25000D | RC膜,寬度34mm,直徑22mm | 25KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
132544 | 透析袋34-50000D | RC膜,寬度34mm,直徑22mm | 50KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
131420 | 透析袋31-100000D | CE膜,寬度31mm,直徑20mm | 100KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
131450 | 透析袋16-300000D | CE膜,寬度16mm,直徑10mm | 300KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
131486 | 透析袋16-1000000D | CE膜,寬度16mm,直徑10mm | 1000KD | 美國光譜醫(yī)學(xué) |
下述透析程序是一個普遍的基礎(chǔ)透析過程。在開始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù)。透析樣品溶劑、膜的化學(xué)相容性、
順的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率,因此,一些應(yīng)用中下述透析過程可能需要適
當(dāng)?shù)淖兓?br /> 1.把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品)。
2.裁剪適當(dāng)長度的透析管。預(yù)留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間
3.把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。
4.由透析管開口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾。
5.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6.透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續(xù)透析的過程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8小時和10-14小時(第2天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時的透析。
注:對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。
7.透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)60℃。
在適當(dāng)?shù)膬Υ媲闂l件下,保質(zhì)期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中。未開封的透析袋4℃儲存。一旦變濕,透析袋應(yīng)浸泡在下列之一的溶液中:005%疊氮化鈉,1%的苯甲酸鈉或1%%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會造成孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌)。