供應(yīng)TdB品牌DSS –小鼠結(jié)腸炎造模

供應(yīng)TdB品牌DSS –小鼠結(jié)腸炎造模

硫酸葡聚糖鈉鹽(DSS)結(jié)腸炎造模經(jīng)常遇到,但確切機(jī)制不是很清楚,一般認(rèn)為腸上皮單層細(xì)胞受DSS損傷后,免疫系統(tǒng)受到腸道微生物其代謝物不斷刺激,產(chǎn)生炎癥。在此簡單介紹一下造模步驟(小鼠)。

1. 選擇8-10周齡的實驗小鼠,稱重(理想重量 在20g左右),打孔標(biāo)記。將DSS充分溶解在高溫滅菌水中,濃度按實驗需求配制。
2. 如果是損傷/治療恢復(fù)造模,可將 DSS 配制為2%,如果是急性結(jié)腸炎造模,可以選擇3%。喂飼量為 100ml/籠(4-5只小鼠),無論有無剩余,每隔2天必須換新配的DSS。
3. 損傷/恢復(fù)造模一般是連續(xù)喂飼2%DSS 7天,然后再換為清水飼養(yǎng)7天。實驗人員也可以根據(jù)自己的實驗內(nèi)容進(jìn)行調(diào)整(如不涉及到恢復(fù),可以7天后就處理小鼠,如需要觀察長期炎癥可以多喂養(yǎng)幾天)急性結(jié)腸炎造模,小鼠可能堅持不到7

天。無論哪種造模,實驗人員應(yīng)從第一天起,記錄小鼠的體重、糞便出血情況、外觀、行為等。

4. 小鼠的體重一般是從飼養(yǎng)DSS第6天開始下降,恢復(fù)喂養(yǎng)清水3天左右體重開始增加。當(dāng)然這不是絕對的,小鼠的基因型,飼養(yǎng)條件也會影響。在處理小鼠前,千萬不要違背實驗動物倫理規(guī)定,如體重過低,便血非常嚴(yán)重等,要不然文章中不好交待。
小鼠處理后,測量記錄結(jié)腸尺寸(會變短,膨脹),一部分儲存到液氮中用于后續(xù)的基因分析,一部份保存在福爾馬林中用于組織學(xué)分析。
DSS 可以選瑞典TDBcons的產(chǎn)品,Mw: 35-55KDa
◆硫酸葡聚糖>DSS>誘導(dǎo)腸炎模式動物的優(yōu)點
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潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種病因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚的慢性腸道炎癥性疾病,建立適當(dāng)?shù)慕Y(jié)腸炎動物模型對于研究UC的病因、發(fā)病機(jī)制以及新的治療方法具有重要意義。人們制作了多種動物模型對其進(jìn)行研究,日本學(xué)者于1985年首次應(yīng)用硫酸葡聚糖制備了鼠UC模型,此后,該方法廣泛用于篩選治療炎癥性腸病(IBD)的新方法和臨床前新藥物的開發(fā),也用于研究IBD的發(fā)病機(jī)制。其具備以下優(yōu)點:
◆參考方法
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方法一:
小鼠給予含50g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸鈉)5000或40000的蒸餾水自由飲用7d,出現(xiàn)體重減輕、腹瀉、血便等急性腸炎的表現(xiàn).病理學(xué)切片HE染色發(fā)現(xiàn)小鼠病變結(jié)腸腺體結(jié)構(gòu)紊亂,黏膜和黏膜下單核細(xì)胞和多核細(xì)胞浸潤.DSS組病變腸段組織GSH表達(dá)較對照組明顯減少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病變結(jié)腸分泌的IL-4明顯升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),IFN-g輕度降低(P>0.05).
資料來源:《GSH在DSS誘導(dǎo)的小鼠實驗性腸炎中的作用》
方法二:
將分子量為50 00或40000的DSS溶于飲用水,配成3% DSS溶液,讓BALB/C小鼠自由飲用7d,建立小鼠急性結(jié)腸炎模型;②讓BALB/C小鼠自由飲用3% DSS溶液7d,然后飲用不含DSS蒸餾水14d,建立小鼠慢性結(jié)腸炎模型;模型建立成功的標(biāo)志為飲用3% DSS 7 d后出現(xiàn)半稀便、腹瀉、大便隱血(+)和肉眼血便中的任一癥狀。
資料來源:《葡聚糖硫酸鈉致小鼠結(jié)腸炎模型的建立與評價》。
已有研究表明,不同分子量的DSS所誘導(dǎo)的病變特征不同,如用5000, 40,000和500,000的DSS喂養(yǎng)小鼠,結(jié)果典型病變只出現(xiàn)于5,000組和40,000組,50,000組的病變主要見于盲腸和上段結(jié)腸,此外,DSS結(jié)腸炎的嚴(yán)重度并不依賴于DSS攝入量,而是由DSS濃度決定,小鼠飲用的DSS量差別較小時不影響誘導(dǎo)出的結(jié)腸炎嚴(yán)重度。再次,不同種屬對于不同分子量的DSS的敏感度不一。