凱杰Qiagen 總RNA小提試劑盒 RNeasy Mini Kit (50) 74104

數(shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA

即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好

少量起始樣本，RNA產(chǎn)量穩(wěn)定

無需酚/ 氯仿抽提，無需氯化銫梯度離心，無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織?？稍赒IAcube全自動(dòng)核酸純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動(dòng)化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結(jié)合能力為45 μg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA）。

Performance

RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動(dòng)物或人類組織樣本，或從100–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA（參見”RT-PCR of RNA from as few as 100 cells”和”High-quality RNA from a variety of samples”）。

RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產(chǎn)量

樣本來源	起始材料	平均產(chǎn)量（μg）
動(dòng)物細(xì)胞
LMH	1?x 106	12
HeLa	1?x 106	15
COS-7	1?x 106	35
淋巴細(xì)胞（未受激）	1?x 106	0.5
小鼠組織
肝	10 mg	40
肺	10 mg	10
脾	10 mg	35
真菌細(xì)胞
S. cerevisiae	1?x 107	25

Principle

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度，簡化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA，并且DNA殘留水平達(dá)到最低。

Procedure

RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類組織中或小于5 x 107個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜（參見”RNeasy Mini spin column”）。RNA結(jié)合到膜上（最多可結(jié)合100 μg），污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用，可在RNeasy操作過程中進(jìn)行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 μl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA（參見”RNeasy Mini procedure”）。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。

Applications

使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應(yīng)用，包括：

Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡

終點(diǎn)式RT-PCR

定量real-time RT-PCR

芯片分析

Poly A+ RNA篩選

Features	Specifications
應(yīng)用	PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
洗脫體積	30–100 μl
規(guī)格	Spin column
主要樣本類型	Tissue, cells
處理	Manual (centrifugation)
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白	Total RNA
樣本量	0.5–30 mg
技術(shù)	Silica technology
每次運(yùn)行或制備時(shí)間	20 minutes
產(chǎn)量	Varies