從植物和真菌中純化總RNA
上海金畔生物科技有限公司提供凱杰Qiagen 植物總RNA小提試劑盒 RNeasy Plant Mini Kit (50) 74904,品質(zhì)保證,價格優(yōu)惠,全國聯(lián)保,歡迎咨詢。
30分鐘即可獲得高品質(zhì)的總RNA
無需酚/氯仿抽提
無需CsCl梯度離心,無需LiCl或乙醇沉淀
出色的RNA回收率
即用型RNA適合多種下游應(yīng)用
RNeasy Plant Mini Kit含QIAshredder離心柱和RNeasy離心柱,前者用于勻質(zhì)化和過濾高粘度的植物或真菌的裂解物,后者使用硅膠膜技術(shù)純化至多100 μg高品質(zhì)RNA。純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行。該試劑盒也可配合TissueRuptor或TissueLyser體系使用,高效破碎并勻質(zhì)化植物樣本。
Performance
RNeasy Plant Mini Kit適用于從各種植物和真菌樣本中純化總RNA,樣本為10–100 mg的組織或100–1 x 107個細胞(參見”RNeasy Plant Mini Kit處理的樣本”)。離心柱的結(jié)合能力達100 μg RNA。100 mg植物組織的常規(guī)產(chǎn)量是25–65 μg RNA,但樣本不同的發(fā)育階段和生長條件可能導致不同的RNA產(chǎn)量(參見”100 mg組織的產(chǎn)量”)。
RNeasy Plant Mini Kit 處理的樣本
植物
Anemone sp.
Arabidopsis thaliana1
Begonia sp.
Beta vulgaris (甜菜)2
Chlamydomonas reinhardii (單細胞藻類)
Chrysanthemum
Clarkia spp.3
Daucus carota (胡蘿卜t)4
Diascia sp.
Dendranthema sp.
Euglena gracilis (單細胞藻類)
Funaria hygrometrica (苔)
Hordeum vulgare (大麥)
Lycopersicon esculentum (西紅柿)5
Malus sp. (蘋果)6
Nicotiana tabacum (煙草)
Oryza sativa (米)
Pelargonium sp. (天竺葵)
Petroselinum crispum (香菜)7
Pisum sativum (豌豆)
Prunus sp. (櫻桃)6
Ranunculus sp.
Ribes nigrum (紅醋栗)
Riccia fluitans (苔)
Sinapis arvensis (芥末)
Solanum tuberosum (土豆)8
Spinacia oleracea (菠菜)
Surfinia sp.
Triticum aestivum (小麥)
Vitis sp. (葡萄藤)6
Zea mays (玉米)
絲狀真菌
Acremonium crysogenum9
Fusarium avenaceum9
Young leaves or needles, except as indicated: 1 Flowers, buds, siliques, roots; 2 roots; 3 petals, stamen, stigma, sepals, style; 4 cultured cells; 5 mature flower, expanded leaves, shoot tip, stem, green fruit; 6 budwood; 7 seedlings; 8 dormant tuber; 9 mycelium
100 mg組織的產(chǎn)量
樣本類型 | 產(chǎn)量 |
擬南芥葉 | 35 μg |
玉米葉 | 25 μg |
番茄葉 | 65 μg |
煙草葉 | 60 μg |
純化的植物RNA,包含病毒RNA,洗脫體積30–100 μl(參見”Detection of viruses”)。多聚糖等污染物被除去,洗脫得到的RNA適用于多種下游應(yīng)用(參見”Tissue specificity of histone H4 expression”)。
Principle
RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder離心柱用于勻質(zhì)化和通過離心法過濾高粘度的植物或真菌裂解物,同時采用 RNeasy Mini離心柱對RNA進行純化。RNeasy純化技術(shù)整合了異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度,簡化了總RNA純化技術(shù)。RNeasy試劑盒提供高品質(zhì)的RNA,DNA污染達到最低水平。對微量DNA非常敏感的RNA應(yīng)用,可在RNeasy操作流程中進行方便的柱上DNase處理,去除殘留的DNA。
Procedure
樣本首先被裂解,并在QIAshredder離心柱中勻質(zhì)化。在裂解液中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。將裂解液上樣到RNeasy硅膠膜上,RNA與硅膠膜結(jié)合,各種污染物被高效洗去。濃縮的純RNA被水洗脫(參見”RNeasy Plant Mini procedure”)。
Applications
RNeasy技術(shù)純化得到的高品質(zhì)RNA適合各種下游應(yīng)用,包括:
Northern印跡、點印跡和狹縫印跡
終點式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA篩選
Features | Specifications |
應(yīng)用 | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
洗脫體積 | 30–100 μl |
規(guī)格 | Spin column |
主要樣本類型 | Plant samples |
處理 | Manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | RNA |
樣本量 | 10–100 mg |
技術(shù) | Silica technology |
每次運行或制備時間 | 30 minutes |
產(chǎn)量 | 25–60 μg |