實(shí)現(xiàn)生物體內(nèi)部深處成像

AkaLumine-HCl（TokeOni）

　　AkaLumine-HCl 是一種發(fā)光峰值在 670-680 nm處的熒光素類似物。它適用于活體深部的體內(nèi)成像，因?yàn)樗姆逯捣秶诮t外（NIR）窗內(nèi)，不易受水和血紅蛋白吸收峰影響。

　　進(jìn)行成像實(shí)驗(yàn)時(shí)敬請(qǐng)使用 AkaLumine-HCl。

數(shù)據(jù)提供：

東京工業(yè)大學(xué) 生命理工學(xué)院 生命理工學(xué)系 生命工程專業(yè) 口丸高弘助教·近藤科江教授

電力通信大學(xué)研究生院 信息科學(xué)與工程 基礎(chǔ)科學(xué)與工程專業(yè) 牧昌次郎助教

◆特點(diǎn)

●　近紅外發(fā)光底物：λmax 675 nm。

●　不易受水和血紅蛋白光吸收的影響，非常適合用于活體成像實(shí)驗(yàn)。

●　比傳統(tǒng)產(chǎn)品 AkaLumine 的溶解度高 50 倍以上。

◆結(jié)構(gòu)及光譜

圖1.　AkaLumine-HCL 結(jié)構(gòu)式

圖2.　D-luci（D-熒光素）及 AkaLumine-HCl 在含有 LLC/luc 皮下腫瘤的小鼠體內(nèi)各基質(zhì)中的發(fā)光光譜圖

◆實(shí)驗(yàn)方案示例

●　制備AkaLumine-HCl溶液

●　?在水或生理鹽水中溶解

●　(例）制備100 mM Akalumine-HCl（用水稀釋）。使用時(shí)再次稀釋³⁾
●　?請(qǐng)現(xiàn)配現(xiàn)用

●　移植了Akaluc（熒光素酶）表達(dá)細(xì)胞的小鼠肺部生物發(fā)光成像 ³⁾

●　在PBS中以10,000 cells/mL的密度懸浮Akaluc表達(dá)HeLa細(xì)胞
● 　↓
● 　將100 μL（1,000 cells）的懸浮液注射到小鼠的尾靜脈中

●　↓ 10 min后

●　麻醉小鼠，給藥30 mM AkaLumine-HCl

●　↓

●　獲取活體發(fā)光圖像

●　Akaluc表達(dá)小鼠的神經(jīng)元響應(yīng)監(jiān)測(cè)³⁾
●　用腺相關(guān)病毒使Akaluc在小鼠紋狀體中表達(dá)

●　↓
●　以小鼠體重750 nmol/g 向小鼠靜脈給藥AkaLumin-HCl。

●　↓
●　獲取生物發(fā)光圖像

◆使用了小鼠的活體成像實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖3.　在含有 LLC/luc 皮下腫瘤的小鼠腹腔內(nèi)使用 100 μL 底物 D-luci 及 AkaLumine-HCl，15 分鐘后對(duì)所得的發(fā)光圖像及腫瘤發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行定

           量分析（n=4，*P＜0.05）。對(duì)小鼠使用 D-luci 并獲得發(fā)光圖像后４小時(shí)，對(duì)同一實(shí)驗(yàn)對(duì)象使用 AkaLumine HCl，得到如圖所示的發(fā)光

           圖像。

◆細(xì)胞的體外成像實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖4.　將各種底物濃度的 D-luci 及 AkaLumine-HCl 添加至表達(dá)螢火蟲熒光素酶（luc，firefly luciferase）的小鼠鼠肺癌細(xì)胞（LLC/luc）內(nèi)，

           得到的發(fā)光圖像及發(fā)光強(qiáng)度定量分析結(jié)果。（n=3，*P＜0.05）

◆使用人工發(fā)光成像系統(tǒng)AkaBLI的應(yīng)用實(shí)例

圖6.　小鼠（左）和狨猴（右）的自由行動(dòng)觀察

數(shù)據(jù)來源：

國立研究開發(fā)法人理化學(xué)研究所

腦神經(jīng)科學(xué)研究中心細(xì)胞功能探索技術(shù)研究小組 巖野智教授、宮脇敦史教授

◆產(chǎn)品列表

◆相關(guān)產(chǎn)品

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參考文獻(xiàn)