BES特異性熒光探針 ? ◆特點(diǎn)

● ?比氫化乙啡啶(hydroethidine) 有更高的特異性

● ?與超氧化物特異性反應(yīng)，用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)超氧化物水平

● ?BES-So-AM 可穿透細(xì)胞膜，無需打孔

● ?極易溶于水，可制成水溶液使用

● ?可用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀

◆使用舉例

圖1）是Jurkat T 細(xì)胞在含33 μM BESSo-AM 的培養(yǎng)基中37° C 培養(yǎng)1 小時(shí)，使探針進(jìn)入細(xì)胞，然后添加4 mM 丁酸（O2?- 誘導(dǎo)劑），37° C 培養(yǎng)1 小時(shí)；

圖2）是Jurkat T 細(xì)胞在含33 μM BESSo-AM 的培養(yǎng)基中37° C 培養(yǎng)1 小時(shí)，使探針進(jìn)入細(xì)胞， 然后不添加丁酸，37° C 再培養(yǎng)1 小時(shí)；

圖3）是Jurkat T 細(xì)胞在含33 μM BESSo-AM 和Tiron（O2?- 清除劑）的培養(yǎng)基中37° C 培養(yǎng)1 小時(shí)，然后添加5 mM的丁酸，繼續(xù)培養(yǎng)一個(gè)小時(shí)。

（數(shù)據(jù)提供：日本兵庫醫(yī)療大學(xué)藥學(xué)院前田初男）

過氧化氫特異性熒光探針BES-H2O2-Ac / BES-H2O2

◆特點(diǎn)

● ?比二氯熒光黃 (DCFH) 有更高的特異性

● ?可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)的過氧化氫

● ?BES-H2O2-Ac 可穿透細(xì)胞膜，無需打孔

● ?極易溶于水，可制成水溶液使用

● ?可用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀

◆使用舉例

熒光圖像

1）H2O2誘導(dǎo)刺激??? ????????2）無H2O2誘導(dǎo)刺激

相位差圖像

圖1）和2）是Jurkat T 細(xì)胞用含50 μM BES-H2O2-Ac的培養(yǎng)基37° C 培養(yǎng)1 小時(shí)，使探針進(jìn)入細(xì)胞。分別在添加5 mM 丁酸（H2O2 誘導(dǎo)劑）和不添加丁酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)1 小時(shí)。

（數(shù)據(jù)提供：日本兵庫醫(yī)療大學(xué)藥學(xué)院 前田初男）

R-SH/R-SeH 選擇性熒光探針BES-Thio

◆特點(diǎn)

●??與R-SH 選擇性反應(yīng)（pH7.4）

● ?與R-SeH 選擇性反應(yīng)（pH5.8）

● ?極易溶于水，酶反應(yīng)與檢測(cè)反應(yīng)能同時(shí)進(jìn)行

● ?可用于膽堿酯酶活性測(cè)定等實(shí)驗(yàn)中-SH 的檢測(cè)

◆使用舉例

左圖為乙酰膽堿酯酶抑制劑（donepezil）對(duì)乙酰膽堿酯酶（AChE）及丁酰膽堿酯酶（BChE）的抑制曲線。

通過Donepezil 的抑制作用， 用本品可確認(rèn)AChE 在Donepezil 濃度較低范圍內(nèi)比BChE 更易被選擇性抑制。

檢測(cè)原理：通過在含乙酰膽堿酯酶（AChE）的基質(zhì)中使用乙酰膽堿、在含丁酰膽堿酯酶（BChE）的基質(zhì)中使用丁酰膽堿，酶反應(yīng)產(chǎn)生的硫代膽堿可用本品檢測(cè)。

（數(shù)據(jù)提供：日本兵庫醫(yī)療大學(xué)藥學(xué)院 前田初男）