16％組織/細(xì)胞固定液品牌：JinPan | 貨號：JP-8103-500ml
16% Tissue Fixer 16%PFA
【保存條件】
-20℃避光保存，有效期 1 年；4℃避光儲存，有效期 3 個月。
【概述】
固定液可使細(xì)胞或組織的蛋白質(zhì)凝固，終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng)，防止組織自溶或 異溶，以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活 或彌散。固定液種類很多，常見的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。
多聚甲醛固定液是一種廣泛用于免疫組化(IHC)、免疫熒光( IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(IC)、 流式分析(FACS)等檢測時組織、組織切片、細(xì)胞等生物樣品固定的溶液。
本產(chǎn)品為 16% 多聚甲醛 PBS 溶液(16% PFA)，主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組 成，該固定液適合于絕大多數(shù)組織和細(xì)胞的固定，是免疫組織化學(xué)和培養(yǎng)細(xì)胞的固定液之 一，它能較好的保護(hù)組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及核酸。其固定效果好、應(yīng)用廣，適用于各 種常見細(xì)胞或組織的固定，對皮膚、肌肉、內(nèi)臟等均有良好的固定效果，但主要作用于蛋 白質(zhì)，無法固定尿酸和糖類等。 若需使用低濃度多聚甲醛，可使用 PBS 按比例稀釋。
【使用建議】
4%多聚甲醛固定液為常用組織細(xì)胞固定液，該操作步驟以 4%多聚甲醛固定液為例。如需使用濃度為 16%的多聚甲醛固定液，該操作步驟僅供參考。
對于細(xì)胞樣品，去除培養(yǎng)液后，按照每六孔板一個孔加入 1 毫升固定液的比例，加入 4% 多聚甲醛固定液。
對于細(xì)胞涂片等其它細(xì)胞樣品，加入固定液的量以充分蓋住樣品為準(zhǔn)。 通常室溫固定 10-20 分鐘即可，但固定較長時間，例如 1-2 小時也是可以的。后續(xù)需使用 適當(dāng)?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?nbsp;
對于組織切片，加入 4% 多聚甲醛固定液量以充分覆蓋切片為準(zhǔn)，或使用染色架進(jìn)行固 定。通常室溫固定 10-20 分鐘即可完成固定，但切片較厚時可以固定較長時間，例如 1-2小時。后續(xù)需使用適當(dāng)?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?nbsp;
對于組織塊樣品，浸泡入 4% 多聚甲醛固定液中，室溫或 4℃浸泡固定 2 到 24 小時。建議 不超過 8 小時，除非組織塊特別大，難以滲透。固定完成后，放入裝有蒸餾水的離心管中 清洗，每 15-30 分鐘換一次水，共 6-8 次，建議在搖床進(jìn)行，或用流水沖洗 1-2 小時。隨后梯度脫水，進(jìn)行包埋。如果暫時不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。
如將組織樣品置于 16% 多聚甲醛固定液中浸泡儲存，請避光放置。
【注意事項(xiàng)】
1. 僅限于科研使用，不可用于各種食品藥品或臨床治療中。
2. 為了您的安全與健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液 pH 降低，從而影響染色。
4. 不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織 塊的大小來調(diào)整固定時間。
5. 多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易 碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
6. 多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中，固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩? 沖洗數(shù)小時仍會有殘留，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚 甲醛。
7. 多聚甲醛固定液固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn) 行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
8. 醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分 子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露， 可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在 進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
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