RIPA裂解液 (低強度)品牌：JinPan | 貨號：JP-8150-100ml

RIPA Lysis Buffer weak

【保存條件】 

-20℃保存，有效期 1 年，頻繁使用可放置 4℃保存。 

【概述】 

RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得 到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的 Western、IP 和 ELISA 等。 

RIPA 的本意是 Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA 裂解液的配方有很多種，根據(jù)其裂解液的強度大致可以分為高強度、中強度、低強度三類。請根據(jù)不同需求選擇不同強度 RIPA 裂解液。 

【使用建議】 

如發(fā)現(xiàn) RIPA 有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量，取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。 

1. 樣品前處理： 

a) 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每 孔細胞量加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分 接觸。 

b) 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有 明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。 

c) 對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250μl 裂解液的 比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。 

2. 后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃 度測定、SDS-PAGE、Western blotting和免疫沉淀等操作。 

【注意事項】 

1. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

2. 本產(chǎn)品長時間低溫存放可能會出現(xiàn)沉淀，可在 37oC 水浴約 10 分鐘以充分溶解沉淀。沉 淀完全溶解后即可正常使用。 

3. 為保證最佳的使用效果，請盡量避免過多的反復(fù)凍融，可分裝后使用。 

4. 裂解樣品的所有步驟都需在冰上或 4℃進行。 

5. RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下， 可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗；如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如 NF-kappaB、p53 等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。 

6. 該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

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