4×SDS-PAGE單色蛋白Loading buffer(含巰基還原劑),常用生化試劑

4×SDS-PAGE單色蛋白Loading buffer(含巰基還原劑)品牌:JinPan | 貨號:JP-8156-10ml

SDS-PAGE Loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)

【保存條件】 

建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融,-20℃,有效期 1 年 

【概述】 

4×SDS-PAGE 單色蛋白上樣緩沖液可保護(hù)蛋白質(zhì)在樣品制備步驟中免受熱降解,并在 SDS-PAGE 運(yùn)行期間防止 pH 值變化。一些蛋白質(zhì)對在 Tris 緩沖液中電泳期間溫度波動引起 的 pH 變化敏感,優(yōu)化后的上樣緩沖液組分可防止在 SDS-PAGE 電泳之前的樣品加熱過程中 以及電泳過程中蛋白質(zhì)降解。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS 還 可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)。β-巰基乙醇可以斷開 半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。 

溴酚藍(lán)作為指示劑,用于追蹤電泳進(jìn)度。 

【使用建議】 

1. 室溫解凍 4×SDS-PAGE 單色蛋白上樣緩沖液。 

2. 請按每 30μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(4 倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度 過高,可用雙蒸水稀釋。 

3. 混勻后,100℃水浴加熱 5-10 分鐘,使蛋白變性。 

4. 冷卻至室溫后,10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘,取上清直接上樣電泳即可。

【注意事項(xiàng)】 

1. β-巰基乙醇對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)。 

2. 為了您的安全與健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 

3. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在 30kd 左右, 膠濃度為 12時,約在 20kd 左右,膠濃度為 15%時,大概在 10kd。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時間。 

4. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑,PH 值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態(tài)下,溶液 可能會呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用。

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