細胞培養(yǎng)基上清外泌體提取試劑-100ml品牌：JinPan | 貨號：EK-5201-100ml
Total Exosome Isolation Reagent(from cell culture media)
【保存條件】
4oC 保存，有效期一年
【概述】
外泌體是含有復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小囊泡（30-120 nm），所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。外泌體被認為是細胞間的信使，在特定細胞之間傳遞其效應(yīng)物或向大分子發(fā)出信號，然而它們的形成、組成以及涉及它們的生物學(xué)途徑仍未完全了解。
外泌體功能和運輸?shù)纳飳W(xué)研究要求完整的外泌體的分離，但是目前使用的方法繁瑣，非特異性且困難。JinPan 細胞培養(yǎng)基上清外泌體提取試劑為從細胞培養(yǎng)基樣品中濃縮完整外泌體提供了一種簡單而可靠的方法。通過束縛水分子，從細胞培養(yǎng)基中分離總外泌體試劑可將溶解度較低的組分（即外泌體）從溶液中擠出，從而允許它們在短暫，低速離心后收集。
JinPan 細胞培養(yǎng)基上清外泌體提取試劑可以從細胞培養(yǎng)基樣品中快速高效地富集完整的外泌體。
?為任何類型的下游應(yīng)用最大限度地大大提高完整外泌體的回收率
? 使用簡單可靠的實驗方案輕松分離外泌體
? 避免耗時的超速離心
? 靈活性極佳—可以根據(jù)樣品量按比例增加或減少
【操作方法】
樣品處理：
1. 收集細胞培養(yǎng)基。
2. 以 2000×g 離心細胞培養(yǎng)基 30 分鐘使細胞和碎屑沉淀。
3. 將不含細胞的上清液轉(zhuǎn)移至新管中，注意不要吸到管底的細胞及碎屑。
外泌體分離：
1. 從上一步分離的不含細胞的上清液中取所需體積至新管中，并加入 0.5 倍體積的JinPan 細胞培養(yǎng)基上清外泌體提取試劑。如 1ml 上清液加入 0.5ml 提取試劑，或10ml 上清液加入 5ml 提取試劑。
2. 將上清液與提取試劑吹打混勻或渦旋混勻。
3. 將混勻好的樣品 2-8℃過夜孵育。
4. 孵育完成后，在 2-8℃條件下 10000×g 離心 1 小時。
5. 完成離心后，吸走并丟棄上清液，外泌體即包含在試管底部的沉淀中（大多數(shù)情況
下是不可見的）。
6. 加入合適體積的 1×PBS 或其他類似緩沖液重懸沉淀。具體見下表：
7. 當(dāng)沉淀重新懸浮之后，所得的外泌體即可進行下游分析或通過親和層析進一步純化。提純后的外泌體可在 2-8℃中保存 1 周或在小于-20℃中長期保存。
【注意事項】
1. 本試劑可室溫保存，4℃保存也可。
2. 取上清注意避免吸入細胞或細胞碎片（重要?。?，合并相同的細胞培養(yǎng)液上清樣品，裝入無菌的玻璃瓶，可在 4℃短期保存（1-2 天），長期保存可凍存于-80℃。
3. 細胞上清分離后盡快進行外泌體分離，保存在 4℃和-80℃，都會對產(chǎn)量有一定的影響。
4. 做少量 WB 實驗一般 1ml 細胞培養(yǎng)上清液或尿液樣本基本足夠，但為了足量分離 外泌體做 RNA 或蛋白質(zhì)分析，我們推薦使用大于 10ml 樣本量來分離 外泌體。
5. 分離外泌體可用于細胞功能研究或根據(jù)后續(xù)研究加入相應(yīng) Trizol 或蛋白裂解液抽提RNA 或蛋白質(zhì)或 1:100 PBS 稀釋行粒徑檢測；
6. 本品僅限用于科研實驗。
本網(wǎng)站可提供的所有產(chǎn)品和服務(wù)均不得用于人體或動物的臨床診斷或治療，僅可用于科研等非醫(yī)療目的。