EDTA脫鈣液 pH7.2-500ml,常用生化試劑

EDTA脫鈣液 pH7.2-500ml品牌:JinPan | 貨號(hào):JP-8082-500ml

EDTA decalcifying solution, pH

【保存條件】 

室溫保存,有效期 1 年 

【概述】 

一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和 石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對(duì)含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者 同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn),如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多, 脫鈣劑包括有機(jī)酸、無(wú)機(jī)酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。 

EDTA 是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某 些酶類(lèi),經(jīng) EDTA 脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太 慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。 

【使用建議】 

1. 骨組織脫鈣時(shí),取材不易過(guò)厚,一般大約 5mm。 

2. 組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。 

3. 組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min。 

4. 組織轉(zhuǎn)移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長(zhǎng)時(shí)間。如果想加快 脫鈣速度,可以置于 37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組 織脫鈣 2 周~3 個(gè)月即可,每周更換一次,直至終點(diǎn)。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè) 在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù) 3~5min,中間間隔 3~5min。 

5. 用蒸餾水沖洗數(shù)次。 

6. 常規(guī)脫水、包埋。 

【注意事項(xiàng)】 

1. 厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣 10~30 天即可。

2. 適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過(guò) 37~40℃,溫度過(guò)高容易使骨組織造成松散 解體,尤其不可大于 60℃。 

3. 脫鈣應(yīng)徹底,防止脫鈣不足或過(guò)度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短 脫鈣時(shí)間,以免脫鈣過(guò)長(zhǎng)引起組織損害。 

4. 脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。 

5. 骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的 損傷程度。 

6. 每隔一段時(shí)間檢測(cè)一次脫鈣程度,避免脫鈣過(guò)度,脫鈣過(guò)度會(huì)增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。 

7. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 

8. 脫鈣終點(diǎn)的測(cè)定(物理法):采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當(dāng)骨組織變軟或針刺時(shí)沒(méi) 有阻力感即可終止脫鈣。物理檢測(cè)法會(huì)對(duì)組織結(jié)構(gòu)有一定的損害,盡量避免用力過(guò)大或反復(fù)檢測(cè)。

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