4×SDS-PAGE單色蛋白Loading buffer(含巰基還原劑）-100ml品牌：JinPan | 貨號(hào)：JP-8156-100ml

SDS-PAGE Loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)

【保存條件】 

建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融，-20℃，有效期 1 年 

【概述】 

4×SDS-PAGE 單色蛋白上樣緩沖液可保護(hù)蛋白質(zhì)在樣品制備步驟中免受熱降解，并在 SDS-PAGE 運(yùn)行期間防止 pH 值變化。一些蛋白質(zhì)對(duì)在 Tris 緩沖液中電泳期間溫度波動(dòng)引起 的 pH 變化敏感，優(yōu)化后的上樣緩沖液組分可防止在 SDS-PAGE 電泳之前的樣品加熱過(guò)程中 以及電泳過(guò)程中蛋白質(zhì)降解。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS 還 可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。β-巰基乙醇可以斷開(kāi) 半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。 

溴酚藍(lán)作為指示劑，用于追蹤電泳進(jìn)度。 

【使用建議】 

1. 室溫解凍 4×SDS-PAGE 單色蛋白上樣緩沖液。 

2. 請(qǐng)按每 30μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(4 倍稀釋)來(lái)使用。如果蛋白樣品濃度 過(guò)高，可用雙蒸水稀釋。 

3. 混勻后，100℃水浴加熱 5-10 分鐘，使蛋白變性。 

4. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘，取上清直接上樣電泳即可。

【注意事項(xiàng)】 

1. β-巰基乙醇對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)。 

2. 為了您的安全與健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 

3. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時(shí)溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在 30kd 左右， 膠濃度為 12時(shí)，約在 20kd 左右，膠濃度為 15%時(shí)，大概在 10kd。請(qǐng)根據(jù)自己目標(biāo)條帶來(lái)判斷結(jié)果電泳時(shí)間。 

4. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑，PH 值受保存溫度影響，在低溫凍存狀態(tài)下，溶液 可能會(huì)呈現(xiàn)深棕色，不影響產(chǎn)品使用。

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