檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)-500ml品牌:JinPan | 貨號:JP-8327-500ml
Citrate Antigen Retrieval Solution,50×
【保存條件】
4℃保存,一年有效
【概述】
1. 檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一種最常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。
2. 細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link),從而遮蔽樣品的抗原位點,導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0),可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
【操作方法】
1. 對于石蠟切片:
2. a. 脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5分鐘,兩次。90%乙醇 5 分鐘,兩次,70%乙醇 5 分鐘,一次。蒸餾水 5 分鐘,兩次。
3. b. 抗原修復(fù):用重蒸水或 Milli-Q 水將本抗原修復(fù)液(50×)稀釋 50 倍,配制成抗原修復(fù)液(1×),例如 1ml 本抗原修復(fù)液(50X)加入 49ml 重蒸水或 Milli-Q 水,混合均勻,即得 50ml 抗原修復(fù)液(1×)。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi),最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
4. 對于冰凍切片:
5. 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi),最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)??乖迯?fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
6. 對于其它樣品的抗原修復(fù):可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
【注意事項】
1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普
通住宅內(nèi)。
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