2×Bis-Tris 蛋白電泳上樣緩沖液(含DTT),常用生化試劑

2×Bis-Tris 蛋白電泳上樣緩沖液(含DTT)品牌:JinPan | 貨號:JP-8698-1ml

Bis-Tris Sample buffer,2×(with DTT)

【保存條件】 

-20℃避光保存,有效期 1 年。建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融。 

【概述】 

2×NeoPAGE 蛋白電泳上樣緩沖液可保護(hù)蛋白質(zhì)在樣品制備步驟中免受熱降解,并在 NeoPAGE 凝膠電泳運(yùn)行期間防止 pH 值變化。一些蛋白質(zhì)對在電泳期間溫度波動引起的 pH 變化敏感,優(yōu)化后的上樣緩沖液組分可防止在電泳之前的樣品加熱過程中以及電泳過程中蛋 白質(zhì)降解。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時蛋白質(zhì)本 身的電荷完全被 SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS 還可以斷開分子內(nèi)和 分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)。DTT 可以斷開半胱氨酸殘基之間的二 硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞 單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。上樣緩沖液的跟蹤染料為考馬斯亮藍(lán) G-250(藍(lán) 色),用于跟蹤電泳的進(jìn)度。 

【使用建議】 

1. 使用前請室溫完全解凍上樣緩沖液并搖勻。 

2. 請按每 10μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(兩倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度 過高,可用雙蒸水稀釋。 

3. 混勻后,90-100℃水浴加熱 5-10 分鐘,使蛋白變性。 

4. 冷卻至室溫后,10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘,取上清直接上樣電泳即可。 

【注意事項】 

1. 為了您的安全與健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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