細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒50T品牌：JinPan | 貨號(hào)：EK-1208-50T 操作步驟：
1. 取200μl細(xì)菌菌液（最多不超過(guò)1×109cells）于無(wú)酶1.5ml離心管中。
2. 10000×g離心1min或3000×g離心5min收集細(xì)菌沉淀。
3. 加入200μl無(wú)菌PBS將細(xì)菌重懸。
注意：為盡可能減少LB等細(xì)菌培養(yǎng)基對(duì)提取過(guò)程中的影響，可重復(fù)步驟2-3一次。
4. 加入30μlLysozyme Solution至溶液中，充分渦旋混勻15-20s后37℃孵育15-30min。
5. （可選）加入5μl RNaseASolution(20mg/ml，自備）至消化液中，顛倒混勻，室溫或37℃放置5-10min。
6. 將所得溶液加入200μl Buffer BB并充分混勻，加入20μl ProteinaseK Solution后立即混勻，徹底混勻后置于70℃水浴中孵育10min。
7. 將溶液從水浴中取出，并加入100μl異丙醇充分混勻。
8. 于13000×g離心5min，離心結(jié)束后取上清溶液加入核酸吸附柱（提前套在2ml收集管中）。
9. 以8000×g離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
10. 向吸附柱中加入500μl Buffer IRB，8000×g離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
11. 向吸附柱中加入500μl Buffer WB（已加入無(wú)水乙醇），8000×g離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
12. 重復(fù)操作步驟11一次。
13. 倒掉收集管中的廢液后將吸附柱再次套入收集管中，最大轉(zhuǎn)速 (~13,400×g)離心2min以除盡Buffer WB。將吸附柱套入新的1.5ml無(wú)酶離心管中并置于室溫放置5-10min徹底晾干乙醇。
注意：Buffer WB中的乙醇?xì)埩魰?huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。
14. 向吸附柱膜中間位置懸空滴加50-100μl BufferEB，室溫靜置2min后，最大轉(zhuǎn)速(~13,400×g)離心2min收集核酸溶液。丟棄柱子，蓋上EP管蓋子置于-20℃保存。
注意：洗脫體積不應(yīng)小于30μl，體積過(guò)少會(huì)影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。為了提高DNA的回收量，可將BufferEB加熱（約60℃）并洗脫兩次，可增加約15-20%得率。

本網(wǎng)站可提供的所有產(chǎn)品和服務(wù)均不得用于人體或動(dòng)物的臨床診斷或治療，僅可用于科研等非醫(yī)療目的。