SIGMA MAB345 抗-O4抗體,克隆81

屬性

生物來(lái)源

mouse

質(zhì)量水平

100
300

抗體形式

purified immunoglobulin

antibody product type

primary antibodies

克隆

81 (mAB O4), monoclonal

species reactivity

rat, mouse, human, chicken

manufacturer/tradename

Chemicon

technique(s)

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable

同位素/亞型

IgM

適用性

not suitable for Western blot
not suitable for immunoprecipitation

運(yùn)輸

wet ice

說(shuō)明

特異性

識(shí)別少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物O4。也可與精子中的某些半乳糖脂反應(yīng)(列表請(qǐng)參見(jiàn)其他信息庫(kù))。

應(yīng)用

免疫組化:在未固定速凍切片上10-20μg/ml。

免疫細(xì)胞化學(xué):在用4%多聚甲醛固定的細(xì)胞上10-20 μg/mL。

注意:O4是一種硫化物,可被有機(jī)溶劑溶出薄膜;丙酮和甲醇不能用于固定。

最佳工作稀釋度必須由最終用戶進(jìn)行確定。

免疫組織化學(xué)方案

1.用未固定速凍組織制備切片。切片厚度應(yīng)為4-5 μm。將切片放在顯微鏡載玻片上。

2.室溫下在PBST中洗滌載玻片3次,每次5分鐘。

3.阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn),將切片置于含5% FCS的潮濕室內(nèi)室溫孵育30分鐘。

4.按第2步所述方法洗滌載玻片。

5.用足夠量的MAB345 (10-20 μg/mL,PBS)覆蓋切片,并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。

6.用PBS快速洗滌載玻片3次。仔細(xì)干燥要染色的區(qū)域。

7.用足夠量的抗小鼠IgM-熒光素*溶液覆蓋切片,并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。

8.按第6步所述方法洗滌載玻片。

9.用合適的包埋介質(zhì)覆蓋切片,蓋上蓋片,用熒光顯微鏡檢查。

*也可以使用HRP或ABC。

通過(guò)滴定一級(jí)和二級(jí)抗體可獲得最佳結(jié)果。

免疫細(xì)胞化學(xué)

1.用4%多聚甲醛(PBS中)在室溫下固定制劑10分鐘。O4是一種硫化物,可被有機(jī)溶劑溶出薄膜;丙酮和甲醇不能用于固定。

2.室溫下在PBST中洗滌載玻片3次,每次5分鐘。

3.阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn),將切片置于含5% FCS的潮濕室內(nèi)室溫孵育30分鐘。

4.按第2步所述方法洗滌載玻片。

5.用足夠量的MAB345 (10-20 μg/mL,PBS)覆蓋切片,并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。

6.用PBS快速洗滌載玻片3次。仔細(xì)干燥要染色的區(qū)域。

7.用足夠量的抗小鼠IgM-熒光素*溶液覆蓋切片,并在37°C的潮濕箱中孵育1小時(shí)。

8.按第6步所述方法洗滌載玻片。

9.用合適的包埋介質(zhì)覆蓋切片,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡檢查。

注意:在染色過(guò)程中,請(qǐng)勿使制劑干燥。

抗O4抗體,克隆81是一種抗O4的抗體,可用于IC、IH,已有超過(guò)50次產(chǎn)品引用。

外形

Ammonium Sulfate Precipitation

形式:純化

純化的免疫球蛋白置于0.05M磷酸鉀緩沖液中,pH 8.0,加入0.3M NaCl和0.05%疊氮化鈉。

分析說(shuō)明

對(duì)照
大鼠皮質(zhì)干細(xì)胞或小鼠胚胎腦3天細(xì)胞培養(yǎng)