屬性
生物來源
Clostridium histolyticum
質(zhì)量水平
200
形式
powder
specific activity
≥125CDU/mg solid
0.5-5.0FALGPA units/mg solid
適用性
suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes
application(s)
diagnostic assay manufacturing
運輸
wet ice
儲存溫度
20°C
說明
一般描述
溶組織梭菌是一種可產(chǎn)生膠原酶的致病性梭菌。這是一種含有膠原酶、非特異性蛋白酶和梭菌蛋白酶的酶混合物。[1]
應(yīng)用
膠原酶可用于:[2][1]
研究晚期糖基化終產(chǎn)物(AGE)的動脈組織的制備
與其他蛋白酶一起用于人類腫瘤、小鼠腎臟、人腦、肺上皮和許多其他組織的解聚。
肝臟和腎臟的灌注研究、胰腺的消化和非實質(zhì)肝細(xì)胞的分
從大鼠肝臟制備活的肝細(xì)胞以及從大鼠脂肪組織中分離脂肪細(xì)胞
生化/生理作用
每摩爾的膠原酶可被四克的鈣原子所激活。它可被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,N,N′,N′-四乙酸、β-巰基乙醇、谷胱甘肽,巰基乙酸和8-羥基喹啉所抑制。膠原酶和中性蛋白酶在從組織中進(jìn)行細(xì)胞的有效釋放中都可起到重要作用。[3]膠原酶可識別-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列,其中X大多數(shù)情況下是一種中性氨基酸。[4]
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意
根據(jù)所提供的信息,該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存一年。 在37℃、50℃和-20℃下FALGPA或蛋白酶的活性在30天內(nèi)不會有損失。如果進(jìn)行分裝(10mg / mL)并快速凍存在-20℃,則粗膠原酶的溶液是可以穩(wěn)定的。進(jìn)一步的反復(fù)凍融會損壞溶液。 該產(chǎn)品在置于冰上時可保持100%活性超過7小時。
單位定義
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明
溶液通常是在TESCA緩沖液(含有50mM TES、0.36mM氯化鈣,37℃時pH 7.4)中按1-2 mg/mL進(jìn)行制備。
該產(chǎn)品還含有梭菌蛋白酶、非特異性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。