屬性
類型
Type VI
質(zhì)量水平
300
形式
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥250units/mg solid (using pyrogallol)
分子量
~44kDa
溶解性
0.1 M phosphate buffer: soluble 10mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
吸光度比值
RZ 2.5-4.0
application(s)
diagnostic assay manufacturing
儲存溫度
2-8°C
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI key
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
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form
essentially salt-free, lyophilized powder
form
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form
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form
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥250units/mg solid (using pyrogallol)
specific activity
≥250units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000units/mg solid (using ABTS)
specific activity
150-250units/mg solid (using pyrogallol)
specific activity
≥50units/mg solid (using pyrogallol)
mol wt
~44kDa
mol wt
~44kDa
mol wt
~44kDa
mol wt
~44kDa
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble 10mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble 10mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble
application(s)
diagnostic assay manufacturing
application(s)
diagnostic assay manufacturing
application(s)
diagnostic assay manufacturing
application(s)
–
storage temp.
2-8°C
storage temp.
2-8°C
storage temp.
2-8°C
storage temp.
2-8°C
說明
一般描述
辣根過氧化物酶是從辣根（Amoracia rusticana）中分離出來的，屬于過氧化物酶的鐵原卟啉基團。HRP是含有四個二硫鍵的單鏈多肽。它是一種含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺組成，具體取決于特定同工酶。其分子量（約44 kDa）包括多肽鏈（33,890道爾頓）、氯化血紅素加Ca2+（約700道爾頓）和碳水化合物（約9,400道爾頓）。至少存在7種HRP同工酶。辣根過氧化物酶同工酶的等電點范圍為3.0-9.0。
應(yīng)用
該酶已用于開發(fā)基于熱穩(wěn)定性大豆過氧化物酶的生物傳感器，通過氧化還原傳導(dǎo)水凝膠將酶交聯(lián)并“電連接”到玻璃碳電極上。[1]它還用于測定低密度脂蛋白的氧化。[2]
辣根過氧化物酶（HRP）分離自辣根（紫穗槐），屬于過氧化物酶的鐵原卟啉基團。 它被用作western blot、ELISA和免疫組化等生化應(yīng)用。 辣根過氧化物酶用于擴增弱信號并提高靶標(biāo)分子如蛋白的可檢測性。 產(chǎn)品P8375，VI型，是一種基本不含鹽的凍干粉。 它常用于測定溶液中葡萄糖和過氧化物的量。 它已用于研究頸脊髓神經(jīng)元的感覺輸入[3]。
生化/生理作用
HRP易與過氧化氫（H2O2）結(jié)合，而所得的[HRP-H2O2]絡(luò)合物可氧化各種氫供體。最適pH為6.0-6.5而酶在5.0-9.0的pH范圍內(nèi)最為穩(wěn)定。HRP可以通過幾種不同的方法與抗體結(jié)合，包括戊二醛，高碘酸鹽氧化，通過二硫鍵，以及通過氨基和巰基定向交聯(lián)劑。它比酶標(biāo)記β-半乳糖苷酶和堿性磷酸酶更小且更穩(wěn)定，因此是最理想的標(biāo)記。此外，它的糖基化會導(dǎo)致更低低的非特異性結(jié)合。[4]
當(dāng)與底物一起孵育時，辣根過氧化物酶可產(chǎn)生標(biāo)記分子的有色、熒光或發(fā)光衍生物，從而可實現(xiàn)定量。 辣根過氧化物酶已被證明可略微降低cydAB突變體中的抑制水平。 已知的抑制劑包括疊氮化鈉、氰化物、L-胱氨酸、重鉻酸鹽、亞乙基硫脲、羥胺、硫化物、釩酸鹽、對氨基苯甲酸以及Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+以及Pb2+離子。
單位定義
一個連苯三酚單元將在20℃、pH 6.0條件下，在20秒內(nèi)從連苯三酚形成1.0mg的紅棓酚。
分析說明
RZ(Reinheitszahl)是指溶于去離子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A(chǔ)403/A275。 它是血紅素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值較高的制劑也可能具有較低的酶活性。