屬性
包裝
pkg of (Kit contains reagents for 5 conjugations.)

熒光
λex 495 nm; λem 525 nm

儲存溫度

2-8°C

說明
應用
Flourotag FITC 偶聯(lián)試劑盒可以用于流式細胞儀免疫組織化學和免疫細胞化學。它還可以用于FITC和多肽激素，細胞活素，生長因子和蛋白質偶聯(lián)。
特點和優(yōu)勢
適于少量(1 mg)和大量(5 mg)偶聯(lián)物。
完整水相法 – 不需要DMF
從過量的FITC快速凝膠過濾分離偶聯(lián)物
偶聯(lián)物和F/P比測定完整實驗方案
試劑足夠至少進行5次5mg蛋白質的偶聯(lián)反應，可供在擴大化前確定最佳F/P比。
應用和實驗方案參考
原理
Sigma提供方便的試劑盒用于制備FITC-標記抗體。異硫氰基熒光素（FITC），異構體1，是一種廣泛使用的熒光團，因為在共軛反應時它有高量子效率和穩(wěn)定性。FITC具有黃橘色的顏色以及在495 nm處的最大吸光值。通過激發(fā)，它可以散發(fā)出在525 nm具有最大發(fā)射的黃綠色。通過蛋白質或多肽鏈的自由氨基基團發(fā)生共軛反應，形成穩(wěn)定的硫脲鍵（看反應）。FITC和抗體，凝集素，激素和生長因子共軛，用于各種免疫組織化學和流式細胞儀實驗中。該實驗方案對于抗體是最優(yōu)方案，但用于其他蛋白質時需要用戶自行修改。
分析說明
過程
1.在碳酸鹽-重碳酸鹽緩沖液中溶解蛋白質和FITC。
2.邊攪拌邊緩慢將FITC加入蛋白質。蓋上箔片，在室溫下攪拌2小時。
3.在G-25柱上將自由FITC和偶聯(lián)物分開。收集組分。
4.收集含有偶聯(lián)物的組分。
5.分光光度法確定F/P偶聯(lián)物比例。
6.用1%牛血清白蛋白和0.1%疊氮鈉穩(wěn)定，0-5℃儲存。