產(chǎn)品編號
JP147C-100ml
20%蔗糖-多聚甲醛固定液
100ml
63
JP147C-500ml
20%蔗糖-多聚甲醛固定液
500ml
216
生產(chǎn)的蔗糖-多聚甲醛固定液(Sucrose-Paraformaldehyde Fix Solution, Sucrose-PFA Fix Solution, or Sucrose-PFA Solution),是一種含5%、10%、20%或30%濃度的蔗糖及4%多聚甲醛(Paraformaldehyde, PFA)的固定液,pH為7.4。本產(chǎn)品適用于特殊要求的細胞或組織的固定,也可作為特殊樣本的脫水劑 (Dehydrating agent)和冷凍保護劑(Cryoprotectant)。使用蔗糖-多聚甲醛溶液進行梯度脫水 ,可以有效防止冰凍切片時樣本內產(chǎn)生冰晶而影響后續(xù)的切片和檢測。
組織樣品可以直接使用5%、10%、20%和30%蔗糖-多聚甲醛固定液依次進行固定和脫水,也可以在使用JP010098 免疫染色固定液或JP010099 4%多聚甲醛固定液等適當固定液進行固定后,依次使用5%、10%、20%和30%蔗糖-PBS溶液進行脫水。這兩種方法前者每個步驟都使用多聚甲醛,步驟略少,更節(jié)約時間,并且樣品一直在多聚甲醛溶液中,因此組織樣品也更穩(wěn)定;后者僅一個步驟涉及多聚甲醛,多一個步驟,所需時間更長,但因為涉及有毒有害溶液的步驟較少而更加安全和環(huán)保,并且對于多聚甲醛浸泡時間過長易損壞的一些比較特殊的組織樣品更適合。
固定液可使細胞或組織的蛋白質凝固,終止內源性或外源性酶反應,防止組織自溶或異溶,以保持原有結構和形態(tài)。對免疫組化或免疫熒光等檢測而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或彌散。固定液種類很多,常見的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。其固定原理不同,各有優(yōu)缺點。目前在科學研究中多聚甲醛應用最廣,通過形成分子間的交聯(lián)從而使細胞或組織的三維結構得以被固定。多聚甲醛中的甲醛可以與蛋白質的氨基端發(fā)生反應,使蛋白質相互交聯(lián)而促進抗原交聯(lián)網(wǎng)絡系統(tǒng)的搭建與形成,使抗原固定于原位。多聚甲醛固定的細胞或組織中蛋白質發(fā)生凝固,水溶性降低,從而能夠較好地保持細胞和抗原的完整性。多聚甲醛是甲醛的聚合物,性質比甲醛穩(wěn)定,且對抗原的破壞能力弱于甲醛,因此,科學研究中常用多聚甲醛作為固定劑 [1]。
組織學上,4%多聚甲醛穿透力強,固定均勻,能使組織硬化,有利于切片。造成的組織收縮少、損傷小,且較為溫和,可很好的保存固有物質,保持組織的抗原性和細微結構。此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂類物質[2,3]。蔗糖具有脫水作用,常用作脫水劑和冷凍保護劑[4]。
本產(chǎn)品經(jīng)反復測試,可以很好的用于免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)、免疫熒光(Immunofluorescence, IF)、免疫細胞化學(Immunocytochemistry, ICC)和流式分析(Fluorescence activated cell sorting, FACS)等組織、組織切片、細胞等生物樣品的固定和脫水。
本產(chǎn)品為即用型試劑,可直接用于組織或細胞的固定,無需稀釋。
包裝清單:
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JP147A-100ml
5%蔗糖-多聚甲醛固定液
100ml
JP147A-500ml
5%蔗糖-多聚甲醛固定液
500ml
JP147B-100ml
10%蔗糖-多聚甲醛固定液
100ml
JP147B-500ml
10%蔗糖-多聚甲醛固定液
500ml
JP147C-100ml
20%蔗糖-多聚甲醛固定液
100ml
JP147C-500ml
20%蔗糖-多聚甲醛固定液
500ml
JP147D-100ml
30%蔗糖-多聚甲醛固定液
100ml
JP147D-500ml
30%蔗糖-多聚甲醛固定液
500ml
-
說明書
1份
保存條件:
-20oC保存,一年有效;4oC保存,一個月有效。
注意事項:
本產(chǎn)品放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。
組織塊不宜過大,軟組織或較大塊組織可先經(jīng)2-3小時固定后,再修整成小塊重投入新鮮固定液內繼續(xù)固定。
固定液的量是組織塊大小的10-20倍為宜,必要時在固定組織的底部墊上脫脂棉、數(shù)層紗布或濾紙,防止組織貼壁。
固定時間的長短視固定劑的種類、溫度、組織塊的大小而定,避免長時間固定。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。
多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,因此后續(xù)實驗結果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。
醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙或結構變化。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,或改變抗原決定簇的空間結構,可造成假陰性的染色結果。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。