Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–腸癌模型動物誘導(dǎo)劑

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Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–腸癌模型動物誘導(dǎo)劑

背景描述：

對于生命醫(yī)學(xué)研究中，為了研究疾病的發(fā)病機(jī)理、環(huán)境刺激下疾病的發(fā)展過程，藥物治療追蹤，或術(shù)后復(fù)發(fā)可能性示蹤?；?yàn)榱藦凝嫶蟮幕衔锘騿慰寺】贵w庫中篩選到有潛力的治療藥物；或者對新療法的療效和風(fēng)險(xiǎn)評估。都離不開相應(yīng)疾病動物模型的建立，所有研究都必須有動物模擬病癥下大量可行數(shù)據(jù)的支撐，才能往下進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)。

讓我們開啟動物造模的篇章，尋找適合你的”點(diǎn)“。

結(jié)腸癌造模誘導(dǎo)劑（Wako/Sigma）

偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

基本描述：

偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，縮寫AOM，可有效誘導(dǎo)大小鼠結(jié)腸癌，廣泛用作一種基質(zhì)引起實(shí)驗(yàn)動物發(fā)生結(jié)腸腫瘤，從而研究癌癥預(yù)防物和癌癥形成機(jī)制。另外，越來越多結(jié)腸癌病例的發(fā)生，使得癌癥預(yù)防物的研究也越來越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg體重）進(jìn)入大鼠體內(nèi)，連續(xù)3周給藥。數(shù)周后能觀察到癌前期病變。

作用機(jī)制：偶氮甲烷（AOM）能誘導(dǎo)DNA產(chǎn)生O6-甲基鳥嘌加合物，導(dǎo)致G→A轉(zhuǎn)化。

主要應(yīng)用：偶氮甲烷（AOM）常聯(lián)合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射動物，建立結(jié)腸癌模型，用來研究癌癥發(fā)展機(jī)制和化學(xué)預(yù)防。

基本特征：

1）??CAS NO. 25843-45-2

2）??線性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3）??分子量：74.08

4）??純度：≥98%

5）??結(jié)構(gòu)式：

誘發(fā)性腫瘤動物模型制作方法簡便，重復(fù)性好，可以在較短時(shí)間內(nèi)大量復(fù)制，而且基本模擬了癌變的過程，因此在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較廣。誘發(fā)性大腸癌模型有較長的歷史，目前建立大腸癌誘發(fā)模型用的最多的試劑是二甲基肼(DMH)和氧化偶氮甲烷(AOM)，甲基硝基亞硝基胍(MNNG)也是得到廣泛應(yīng)用的一種致癌物。
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）是一種對大鼠和小鼠具有強(qiáng)力誘發(fā)大腸癌作用的物質(zhì)，用于氧化偶氮甲烷誘導(dǎo)致畸預(yù)防性治療的有效性評估研究。氧化偶氮甲烷也用于確認(rèn)某些嚙齒動物模型所使用的特殊食物，例如難消化糖，紅肉和綠茶的化學(xué)預(yù)防性能。這些嚙齒動物模型可以幫助鑒別可預(yù)防人類大腸癌可能的手段。
性能
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane）
細(xì)胞生物學(xué)用?100mg
C2H6N2O=74.08
[CAS No.] 25843-45-2
含量（cGC）：98.2%
1,2-二甲基肼二鹽酸鹽
C2H10Cl2N2 = 133.02
[CAS No.] 306-37-6
CAS： 306-37-6
1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍
C2H5N5O3 = 147.09
[CAS No.] 70-25-7

相關(guān)產(chǎn)品

廠商貨號 品牌 品名(中文) CAS 純度及級別
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011-20171 WAKO 氧化偶氮甲烷 AZOXYMETHANE 25843-45-2 細(xì)胞生物學(xué)用
100mg
0520606401 MP 二甲基肼二鹽酸鹽 N,N’-DIMETHYLHYDRAZINE di HCl (SYM) 306-37-6
1g
D161802-10g Sigma 1,2-二甲基肼二鹽酸鹽 N,N’-Dimethylhydrazine dihydrochloride 306-37-6 98%
10g
138-14901 WAKO 1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍 1-METHYL-3-NITRO-1-NITROSUGUANIDINE 70-25-7
5g

參考文獻(xiàn)

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  • Orii, S., et al., Chemoprevention for colorectal tumorigenesis associated with chronic colitis in mice via apoptosis. J. Exp. Clin. Cancer Res., 22: 41-6 (2003).
  • Pool-Zobel, B., et al., Experimental evidences on the potential of prebiotic fructans to reduce the risk of colon cancer. Br. J. Nutr., Suppl 2: S273-81 (2002).
  • Nakanishi, S., et al., Effects of high amylose maize starch and Clostridium butyricum on metabolism in colonic microbiota and formation of azoxymethane-induced aberrant crypt foci in the rat colon. Microbiol Immunol., 47: 951-8 (2003).
  • Pierre, F., et al., Meat and cancer: haemoglobin and haemin in a low-calcium diet promote colorectal carcinogenesis at the aberrant crypt stage in rats. Carcinogenesis, 24: 1683-90 (2003).
  • Metz, N., et al., Suppression of azoxymethane-induced preneoplastic lesions and inhibition of cyclooxygenase-2 activity in the colonic mucosa of rats drinking a crude green tea extract. Nutr Cancer., 38: 60-4 (2000).
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  • Guda, K., et al., Defective processing of the transforming growth factor-beta1 in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol. Carcinog., 37: 51-9 (2003).
  • Guda, K., et al., Aberrant transforming growth factor-beta signaling in azoxymethane-induced mouse colon tumors. Mol Carcinog., 31: 204-13 (2001).
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  • Kishimoto, Y., et al., Effects of cyclooxygenase-2 inhibitor NS-398 on APC and c-myc expression in rat colon carcinogenesis induced by azoxymethane. J. Gastroenterol., 37: 186-93 (2002).

結(jié)腸癌（Colon cancer）模型建立案例：

1、??文獻(xiàn)來源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1????DSS溶液制備（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml無菌的飲用水中，使用前溶液保存在4℃，好現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2????AOM溶液制備：用無菌水溶解AOM配制10 mg/ml的儲存液，分裝后放到-20℃保存，避免反復(fù)凍融。使用之前，融化分裝母液并用無菌生理鹽水1:10倍稀釋。

1.3????小鼠結(jié)腸炎相關(guān)的依賴性結(jié)直腸癌造模方法【詳見懋康官網(wǎng)：www.maokangbio.com】

2、文獻(xiàn)來源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制備（2.5% DSS溶液）：稱取2.5g DSS溶于100ml無菌水，本溶液置于4℃可穩(wěn)定保存1周。好現(xiàn)配現(xiàn)用。

2.2 AOM溶液制備：用無菌水溶解AOM配制10 mg/ml的儲存液，分裝后放到-20℃保存，避免反復(fù)凍融。AOM在水或生理鹽水中的穩(wěn)定性高于PBS緩沖液，且在玻璃管內(nèi)穩(wěn)定性好于塑料管。使用之前，融化分裝母液并用無菌生理鹽水1:10倍稀釋。

2.3 小鼠結(jié)腸癌造模方法

1）第1天稱重，等數(shù)分組并標(biāo)記小鼠；

2）按照10mg/kg體重的濃度計(jì)算所需的AOM量，取適量的AOM儲存液（10mg/ml）用無菌生理鹽水1:10倍稀釋。

3）腹腔注射AOM工作液（劑量10mg/kg體重，則10g體重小鼠注射100ul工作液）到實(shí)驗(yàn)組小鼠，同時(shí)注射等體積的無菌生理鹽水到對照組小鼠。

4）自此步之后，按照兩種方法繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。若建立自發(fā)性腫瘤進(jìn)展模型，見方案A；若建立慢性炎癥驅(qū)動的腫瘤進(jìn)展模型，見方案B。

方案A，自發(fā)性腫瘤進(jìn)展模型

A1，第8天重復(fù)步驟1）-3）；

A2，第15天重復(fù)步驟1）-3）；

A3，第22天重復(fù)步驟1）-3）；

A4，第29天重復(fù)步驟1）-3）；

A5，第36天重復(fù)步驟1）-3）；【到這步每只小鼠都腹腔注射給藥6次】

A6，第一次注射后的3個月評估癌前病變，此時(shí)不需處死動物。

A7，第一次注射后的6個月評估腫瘤發(fā)展。

方案B，慢性炎癥驅(qū)動的腫瘤進(jìn)展（Chronic inflammation-driven tumor progression）

B1，制備2.5%（wt/v）DSS溶液。此濃度的DSS能讓FVB/N小鼠和其他品系產(chǎn)生良好的造模效果。

B2，按3天的用量加DSS溶液灌滿小鼠籠內(nèi)的飲水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，對照小鼠加等體積不含DSS的飲用水；

B3，第4天清空飲水槽內(nèi)殘留DSS溶液，并且重新灌滿另2天所需量的新鮮DSS溶液。

B4，第6天清空飲水槽內(nèi)殘留DSS溶液，并且重新灌滿另2天所需量的新鮮DSS溶液。

B5，第8天清空飲水槽內(nèi)殘留DSS溶液，并且重新灌滿滅菌水。

B6，第22-29日重復(fù)步驟B1）-B5）。

B7，第40日評估癌前病變，此時(shí)不需處死動物。

B8，第53-60日重復(fù)步驟B1）-B5）。

B9，第80日評估腫瘤發(fā)展。

2.4?AOM誘導(dǎo)腫瘤圖示（圖1）

圖1.內(nèi)窺鏡腫瘤調(diào)研。通過迷你腔鏡監(jiān)測AOM誘導(dǎo)的腫瘤形成情況。a）還能用于縱向研究；b）對于腫瘤負(fù)荷分析，每只小鼠的腫瘤大小按照預(yù)設(shè)的時(shí)間點(diǎn)記錄并做總和。

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品牌 貨號 名稱 CAS NO. 規(guī)格
Sigma A5486-25MG Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 25mg
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Wako 011-20171 Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 100mg

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MPbio

 

 0216011010 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖鈉鹽 10g
MPbio 0216011050 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖鈉鹽 50g
MPbio 0216011080 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖鈉鹽 100g
MPbio 0216011090 DSS（Mw：36000-50000 Da）硫酸葡聚糖鈉鹽 500g

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造模疾病名稱 ??產(chǎn)品編號???????品名???????規(guī)格???????包裝

精神分裂癥模型??136-16303 Methylazoxymethanol Acetate? 20mg

大腸炎??194-14921 Sodium Dextran Sulfate 36,000?～?50,000 ??????? – ???? 10g

皮膚腫瘤???147-03421 ? 4-Nitroquinoline 1-Oxide?????? 1g

膀胱炎??160-05191 Protamine Sulfate, from Salmon 1g

Wako ??011-20171 Azoxymethane 25843-45-2 AOM大腸癌疾病造模試劑

帕金森病??136-16381 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Hydrochloride（MPTP）10mg

大腸腫瘤?011-20171 ?? Azoxymethane ??100mg

乳腺腫瘤??042-02801? 7,12-Dimethylbenz(α)anthracene ?1g

肺腫瘤???147-03421? 4-Nitroquinoline 1-Oxide? 1g

糖尿病??191-15151 Streptozotocin? 100mg

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