日本生研RDE受體破壞酶340122（流感研究用）說明書

【用法?用量(操作方法)】*

１．準備する器具，機材

1）マイクロプレート(Ｕ型)

2）マイクロピペット及びチップ(25μL用，50μL用)

3）ドロッパー(25μL用，50μL用)

4）ダイリューター(25μL用，50μL用)

5）マイクロプレート用ミキサー

6）小試験管(容量5～7 mL)

7）メスピペット

8）遠心機(900×g)

9） 恒溫水槽(37℃，56℃)

【用法用量(操作方法)】*
1。準備的器具，器材
1)微板(U型)
2)微移動器及芯片(25μL用，50μL用)
3)滴管(25μL用，50μL用)
4)分離器(25μL用，50μL用)
5)微板攪拌機
6)小試管(容量5 ~ 7ml)
7)手術刀
8)離心機(900×g)
9)恒溫水槽(37℃，56℃)

２．試薬の調製方法

1）Ａ型又はＢ型インフルエンザウイルスＨＡ抗原

後記のＨＡ試験によりＨＡ価を確認してから希釈液で

4ＨＡ価のＨＡ抗原液になるように希釈し，當日中に使用

してください。

2）希釈液，ＲＤＥ(Ⅱ)，ニワトリの赤血球浮遊液は以下の

ように調製します。

(1) 希釈液

1/200mol/L りん酸塩緩衝塩化ナトリウム液

調製例

ＮａＣｌ　　　　　　　　　 8.5 g

Ｎａ２ＨＰＯ４?１２Ｈ２Ｏ 　　 1.425 g

ＫＨ２ＰＯ４　　　　　 　　　0.135 g

精製水に溶解し，1L(pH約7.2)に調製します。

(2) ＲＤＥ(Ⅱ)(RDE：Receptor Destroying Enzyme)

ＲＤＥ(Ⅱ)1本に滅菌生理食塩液20 mLを加えて溶解

し，當日中に使用してください。

(3) 赤血球浮遊液

ニワトリ赤血球を希釈液で3回(900×gで5分間遠心

分離)洗浄したものを用いて，0.5vol％反応用赤血球

浮遊液及び50vol％吸収用赤血球浮遊液を調製します。

2。試劑的配制方法
A型或B型流感病毒HA抗原
通過后記的HA試驗，確認了HA的價格，然后用稀釋液
稀釋成4公頃的公頃抗原液，當天使用
請做。
2)稀釋液,rde (ii),雞的紅細胞浮游液是以下的
像這樣配制。
(1)稀釋液
1/200mol/L磷酸鹽緩沖氯化鈉液
配制例
NaCl 8.5 g
Na2HPO4·12h2o 1.425 g
KH2PO4 0.135 g
溶于純凈水，配制成1l (pH約7.2)。
(2) rde (ii) (rde: receptor destroying enzyme)
rde (ii) 1部加上20 ml滅菌生理鹽水溶解
請當日內使用。
(3)紅細胞懸浮液
用稀釋液將雞紅血球隔空3次(900×g，隔5分鐘)
分離)洗凈后，0.5vol %反應用紅血球
制備懸浮液和50vol %吸收用紅細胞懸浮液。

３．操作法

1）検體の前処理

(1) 非特異的インヒビターの除去

①被検血清，ＨＩ抗血清，各0.1 mLを小試験管に採取し，

ＲＤＥ(Ⅱ)を0.3 mL加えて十分に混和後，37℃に

一夜靜置します。

②56℃で60分間加溫してＲＤＥ(Ⅱ)の作用を止め，

その後，希釈液を0.6 mL加えます。

(2) 赤血球自然凝集素の除去

①非特異的インヒビター除去処理血清に，振り混ぜて

均等にした50vol％吸収用赤血球浮遊液をそれぞれ

50μL加えて十分に混和後，常溫(15～25℃)に

60分間靜置します。この間，2～3回振り混ぜます。

②次いで，900×gで5分間遠心分離後，上清を別の

小試験管にそれぞれ採取します。以上の処理が

終わった各血清の希釈度を1:10とします。

2）ＨＡ試験

ＨＩ試験に用いる抗原のＨＡ価をマイクロタイター法に

より確認するために行います。

3。操作方法
1)檢材的前處理
(1)去除非特異性隱化因子
①在小試管中提取被檢血清和HI抗血清各0.1 mL，
加上rde (ii) 0.3 ml充分混和后,37℃
靜置一夜。
②56℃溫泉加溫到60分鐘rde (ii)的作用停止,
然后加入0.6毫升稀釋液。
(2)清除紅血球自然凝聚素
①混合在非特異性消隱劑血清中
均勻的50vol %吸收用紅血球懸浮液
加入50μL充分混和后，常溫(15 ~ 25℃)
靜置60分鐘。其間攪拌2 ~ 3次。
②接著用900×g離心5分鐘后，換一個上清
分別在小試管中提取。以上的處理
將完成的血清稀釋度設為1:10。
2) HA試驗
HI測試用的抗原的HA價
為了進一步確認而進行。

3）ＨＩ試験

ＨＩ試験には，4ＨＡ価/25μLを保持するように希釈した

ＨＡ抗原液を用います。

上記ＨＡ試験でＨＡ価1:80となったものを4ＨＡ価/25μL

に合わせるためには，ＨＡ価は50μL相當で得られた値

ですので，8ＨＡ価/50μLとなるように希釈し(80÷8＝10，

すなわちＨＡ抗原を10倍希釈する)，その25μLを使用

すれば4ＨＡ価となります。

各1mL分（凍結乾燥）　1本

インフルエンザウイルスＨＩ試薬「生研」Ａ型 ＨＩ抗血清＊４

インフルエンザウイルスＨＩ試薬「生研」Ｂ型 ＨＩ抗血清＊４

＊4：商品番號は，インフルエンザウイルスの株によって変わりますので，別途お問い合わせください。

3) HI考試
在HI測試中，經過稀釋以保持4ha /25μL
使用HA抗原液。
在上述HA試驗中，以1:80的HA為基準，4ha /25μL
為了達到這一標準，HA價應相當于50μL。
因此，稀釋為8公頃/50μL (80÷8 = 10，
將HA抗原稀釋10倍)，使用25μL
那么就是4公頃的價格。

【測定結果の判定法】

１．赤血球凝集を完全に阻止した検體の最終希釈倍數を

ＨＩ抗體価とします。

ＨＩ抗體価が1:10以上を陽性，1:10未満を陰性と判定

します。

２．ＨＩ抗血清についても，瓶ラベルに表示のＨＩ抗體価と

1管差以內であることを確認します。

「判定上の注意」

以下のことを確認し，異常があれば再試験してください。

1）ＨＩ試験時に，ＨＡ抗原液が4ＨＡ価であることを確認

するＨＡ試験を同時に行います。

2）各検體の血清対照及び血球対照が凝集陰性であることを

確認します。血清対照が凝集している場合は，再度，

赤血球自然凝集

【測定結果的判定法】
1。完全阻止紅血球凝集的樣本的稀釋倍數
作為HI抗體價。
HI抗體值1:10以上為陽性，1:10以下為陰性
我會的。
2 .關于HI抗血清，瓶標上也標示HI抗體價
確認是否在1管以內。
“判定上的注意”
請確認以下事項，如有異常，請重新考試。
HI試驗時，確認HA抗原液為4 HA價。
HA試驗同時進行。
2)各樣本的血清對照和血球對照均為凝集陰性
確認一下。如果血清對照有凝集，可以再次檢查。
紅血球自然凝聚

【性　能】

１．感度

自家參照抗Ａ型又は抗Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ

抗血清を用いて，ＨＩ試験を行ったとき，対応する型に

対してそれぞれ80～160倍のＨＩ抗體価を示しました。

２．正確性

自家參照抗Ａ型及びＢ型インフルエンザウイルスＨＩ

抗血清を用いて，ＨＩ試験を行ったとき，Ａ型ＨＡ抗原

はＡ型インフルエンザウイルスＨＩ抗血清に対しては80倍

以上であり，Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ抗血清に

対しては10倍未満のＨＩ抗體価を示しました。同様にＢ型

ＨＡ抗原はＡ型ＨＩ抗血清に対しては10倍未満，Ｂ型

ＨＩ抗血清に対しては80倍以上のＨＩ抗體価を示しました。

３．同時再現性

自家參照抗Ａ型又は抗Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ

抗血清を用いて3回，同時にＨＩ試験を行ったとき，対応

する型に対していずれも80～160倍のＨＩ抗體価を示し

ました。

【性功能】
1。靈敏度
抗A型或抗B型流感病毒HI
當使用抗血清進行HI試驗時，對應的類型
分別顯示了80 ~ 160倍的HI抗體值。
2。正確性
抗A型和B型流感病毒HI
用抗血清進行HI試驗時，A型HA抗原
是A型流感病毒HI抗血清的80倍
B型流感病毒HI抗血清
與之相對的，顯示了不到10倍的HI抗體價值。同樣B型
HA抗原對A型HI抗血清不足10倍，B型
對HI抗血清顯示了80倍以上的HI抗體價值。
3。同時再現性
抗A型或抗B型流感病毒HI
使用抗血清同時進行3次HI試驗時，對應
每一種類型的HI抗體值都是80 ~ 160倍
是的。

【使用上又は取扱い上の注意】*

１．取扱い上(危険防止)の注意

1）検體はＨＩＶ，ＨＢＶ，ＨＣＶ等の感染の恐れがあるもの

として取扱ってください。検査にあたっては感染の危険

を避けるため使い捨て手袋，マスクなどを著用し，また

口によるピペッティングを行わないでください。

2）検體を取扱う際には，検體が手指?衣服等に付著しない

ように注意し，付著した場合は速やかに消毒してください。

3）本品が，誤って目や口に入ったり皮膚に付著した場合には

水で十分に洗い流す等の応急処置を行い，必要があれば

醫(yī)師の手當て等を受けてください。

２．使用上の注意

1）マイクロタイター法の手技，特に，ドロッパーやダイ

リューターの操作及び赤血球液の濃度等は，試験精度の

基本となるため，正しい操作の習熟が必要です。

2）本品は，指定された條件で保管し，使用期限を過ぎた

ものは使用しないでください。

3）容器のゴム栓は取り違えないようにしてください。

4）製造番號の異なる試薬を組み合わせたり，混ぜ合わせて

使用しないでください。また，同一ロットの試薬であっても

試薬間の注ぎ足しは測定誤差を生じる原因となりますので

避けてください。

5）検體相互間の汚染を防ぐため，検體をサンプリングする際，

同一チップの使用は避けてください。

6）マイクロプレートは必ずキズ，汚れ等のないものを使用

してください。

３．廃棄上の注意

1）検體中には，感染性物質が存在する可能性がありますので，

検體，廃液，使用済みの容器及び検査に使用したすべての

器具類は，次のいずれかの方法で滅菌処理を行ってくだ

さい。

①最終濃度3.5vol％グルタルアルデヒド溶液に，30分間

以上浸漬する。

②0.5w/v％次亜塩素酸ナトリウム溶液（有効塩素5 000ppm）

に，1時間以上浸漬する。

③121℃で，20分間以上高圧蒸気滅菌をする。

2）試薬及び器具等を廃棄する場合には，廃棄物の処理及び

清掃に関する法律，水質汚濁防止法等の規(guī)定に従って処理

してください。

【貯蔵方法?有効期間】*

1）貯蔵方法　2～10℃に保存

2）有効期間　1年

(ラベルに表示の使用期限內にご使用ください。)

【使用上或處理上的注意】*
1。處理上(防止危險)的注意
1)有感染HIV、HBV、HCV等可能性的樣本。
請作為處理。檢查時有感染的危險
為了避免戴一次性手套，口罩，
請不要用嘴進行粘貼。
取檢物時，檢物不要附著在手指、衣服等上
注意衛(wèi)生，沾上請及時消毒。
3)本品不小心進入眼睛、口腔或沾到皮膚時，應注意
用水充分沖洗等應急措施，必要時
請接受醫(yī)生的治療等。
2。使用上的注意事項
1)微型打字機的工藝，特別是滴管和模具
雷器的操作和紅血球液體濃度等，測試精度的
因為是基礎，正確的操作的熟練是必要的。
本品按指定條件保管，已超過使用期限。
請不要使用東西。
3)請不要拿錯容器的橡皮塞子。
4)組合或混合不同生產編號的試劑
請不要使用。即使是同一批次的試劑
試劑之間的添加會導致測量誤差。
請避開。
5)為了防止檢材相互間的污染，對檢材進行取樣時，
請避免使用同一芯片。
6)微板一定要使用無損傷、無污漬的。
請做。
3。廢棄上的注意事項
在檢體中，有可能存在感染性物質，
檢體，廢液，使用過的容器，以及所有用于檢驗的物品
器具類用下列方法進行滅菌處理
賽。
①將最終濃度為3.5vol %的戊二醛溶液浸泡30分鐘
以上浸泡。
②0.5w/v %次氯酸鈉溶液(有效氯500ppm)
二，浸泡一個小時以上。
③在121℃下進行20分鐘以上的高壓蒸汽滅菌。
2)銷毀試劑和器具時，應進行廢棄物的處理
依照有關清潔的法律，水質污濁防止法等的規(guī)定處理
請做。
【儲存方法·有效期限】*
1)儲存方法2 ~ 10℃保存
2)有效期一年
(請在標簽上標明的使用期限內使用。)

各20mL分（凍結乾燥）　5本
ＲＤＥ「生研」　　　　　　　　?。ㄉ唐贩?340016）
ＲＤＥ（II）「生研」　　　　　　（商品番號 340122）