日本生研RDE受體破壞酶340122（流感研究用）說明書
【用法?用量(操作方法)】*
１．準(zhǔn)備する器具，機材
1）マイクロプレート(Ｕ型)
2）マイクロピペット及びチップ(25μL用，50μL用)
3）ドロッパー(25μL用，50μL用)
4）ダイリューター(25μL用，50μL用)
5）マイクロプレート用ミキサー
6）小試験管(容量5～7 mL)
7）メスピペット
8）遠心機(900×g)
9） 恒溫水槽(37℃，56℃)
【用法用量(操作方法)】*
1。準(zhǔn)備的器具，器材
1)微板(U型)
2)微移動器及芯片(25μL用，50μL用)
3)滴管(25μL用，50μL用)
4)分離器(25μL用，50μL用)
5)微板攪拌機
6)小試管(容量5 ~ 7ml)
7)手術(shù)刀
8)離心機(900×g)
9)恒溫水槽(37℃，56℃)
２．試薬の調(diào)製方法
1）Ａ型又はＢ型インフルエンザウイルスＨＡ抗原
後記のＨＡ試験によりＨＡ価を確認(rèn)してから希釈液で
4ＨＡ価のＨＡ抗原液になるように希釈し，當(dāng)日中に使用
してください。
2）希釈液，ＲＤＥ(Ⅱ)，ニワトリの赤血球浮遊液は以下の
ように調(diào)製します。
(1) 希釈液
1/200mol/L りん酸塩緩衝塩化ナトリウム液
調(diào)製例
ＮａＣｌ 8.5 g
Ｎａ２ＨＰＯ４?１２Ｈ２Ｏ 1.425 g
ＫＨ２ＰＯ４ 0.135 g
精製水に溶解し，1L(pH約7.2)に調(diào)製します。
(2) ＲＤＥ(Ⅱ)(RDE：Receptor Destroying Enzyme)
ＲＤＥ(Ⅱ)1本に滅菌生理食塩液20 mLを加えて溶解
し，當(dāng)日中に使用してください。
(3) 赤血球浮遊液
ニワトリ赤血球を希釈液で3回(900×gで5分間遠心
分離)洗浄したものを用いて，0.5vol％反応用赤血球
浮遊液及び50vol％吸収用赤血球浮遊液を調(diào)製します。
2。試劑的配制方法
A型或B型流感病毒HA抗原
通過后記的HA試驗，確認(rèn)了HA的價格，然后用稀釋液
稀釋成4公頃的公頃抗原液，當(dāng)天使用
請做。
2)稀釋液,rde (ii),雞的紅細胞浮游液是以下的
像這樣配制。
(1)稀釋液
1/200mol/L磷酸鹽緩沖氯化鈉液
配制例
NaCl 8.5 g
Na2HPO4·12h2o 1.425 g
KH2PO4 0.135 g
溶于純凈水，配制成1l (pH約7.2)。
(2) rde (ii) (rde: receptor destroying enzyme)
rde (ii) 1部加上20 ml滅菌生理鹽水溶解
請當(dāng)日內(nèi)使用。
(3)紅細胞懸浮液
用稀釋液將雞紅血球隔空3次(900×g，隔5分鐘)
分離)洗凈后，0.5vol %反應(yīng)用紅血球
制備懸浮液和50vol %吸收用紅細胞懸浮液。
３．操作法
1）検體の前処理
(1) 非特異的インヒビターの除去
①被検血清，ＨＩ抗血清，各0.1 mLを小試験管に採取し，
ＲＤＥ(Ⅱ)を0.3 mL加えて十分に混和後，37℃に
一夜靜置します。
②56℃で60分間加溫してＲＤＥ(Ⅱ)の作用を止め，
その後，希釈液を0.6 mL加えます。
(2) 赤血球自然凝集素の除去
①非特異的インヒビター除去処理血清に，振り混ぜて
均等にした50vol％吸収用赤血球浮遊液をそれぞれ
50μL加えて十分に混和後，常溫(15～25℃)に
60分間靜置します。この間，2～3回振り混ぜます。
②次いで，900×gで5分間遠心分離後，上清を別の
小試験管にそれぞれ採取します。以上の処理が
終わった各血清の希釈度を1:10とします。
2）ＨＡ試験
ＨＩ試験に用いる抗原のＨＡ価をマイクロタイター法に
より確認(rèn)するために行います。
3。操作方法
1)檢材的前處理
(1)去除非特異性隱化因子
①在小試管中提取被檢血清和HI抗血清各0.1 mL，
加上rde (ii) 0.3 ml充分混和后,37℃
靜置一夜。
②56℃溫泉加溫到60分鐘rde (ii)的作用停止,
然后加入0.6毫升稀釋液。
(2)清除紅血球自然凝聚素
①混合在非特異性消隱劑血清中
均勻的50vol %吸收用紅血球懸浮液
加入50μL充分混和后，常溫(15 ~ 25℃)
靜置60分鐘。其間攪拌2 ~ 3次。
②接著用900×g離心5分鐘后，換一個上清
分別在小試管中提取。以上的處理
將完成的血清稀釋度設(shè)為1:10。
2) HA試驗
HI測試用的抗原的HA價
為了進一步確認(rèn)而進行。
3）ＨＩ試験
ＨＩ試験には，4ＨＡ価/25μLを保持するように希釈した
ＨＡ抗原液を用います。
上記ＨＡ試験でＨＡ価1:80となったものを4ＨＡ価/25μL
に合わせるためには，ＨＡ価は50μL相當(dāng)で得られた値
ですので，8ＨＡ価/50μLとなるように希釈し(80÷8＝10，
すなわちＨＡ抗原を10倍希釈する)，その25μLを使用
すれば4ＨＡ価となります。
各1mL分（凍結(jié)乾燥） 1本
インフルエンザウイルスＨＩ試薬「生研」Ａ型 ＨＩ抗血清＊４
インフルエンザウイルスＨＩ試薬「生研」Ｂ型 ＨＩ抗血清＊４
＊4：商品番號は，インフルエンザウイルスの株によって変わりますので，別途お問い合わせください。
3) HI考試
在HI測試中，經(jīng)過稀釋以保持4ha /25μL
使用HA抗原液。
在上述HA試驗中，以1:80的HA為基準(zhǔn)，4ha /25μL
為了達到這一標(biāo)準(zhǔn)，HA價應(yīng)相當(dāng)于50μL。
因此，稀釋為8公頃/50μL (80÷8 = 10，
將HA抗原稀釋10倍)，使用25μL
那么就是4公頃的價格。
【測定結(jié)果の判定法】
１．赤血球凝集を完全に阻止した検體の最終希釈倍數(shù)を
ＨＩ抗體価とします。
ＨＩ抗體価が1:10以上を陽性，1:10未満を陰性と判定
します。
２．ＨＩ抗血清についても，瓶ラベルに表示のＨＩ抗體価と
1管差以內(nèi)であることを確認(rèn)します。
「判定上の注意」
以下のことを確認(rèn)し，異常があれば再試験してください。
1）ＨＩ試験時に，ＨＡ抗原液が4ＨＡ価であることを確認(rèn)
するＨＡ試験を同時に行います。
2）各検體の血清対照及び血球?qū)澱栅幮预扦ⅳ毪长趣?/p>
確認(rèn)します。血清対照が凝集している場合は，再度，
赤血球自然凝集
【測定結(jié)果的判定法】
1。完全阻止紅血球凝集的樣本的稀釋倍數(shù)
作為HI抗體價。
HI抗體值1:10以上為陽性，1:10以下為陰性
我會的。
2 .關(guān)于HI抗血清，瓶標(biāo)上也標(biāo)示HI抗體價
確認(rèn)是否在1管以內(nèi)。
“判定上的注意”
請確認(rèn)以下事項，如有異常，請重新考試。
HI試驗時，確認(rèn)HA抗原液為4 HA價。
HA試驗同時進行。
2)各樣本的血清對照和血球?qū)φ站鶠槟幮?br />
確認(rèn)一下。如果血清對照有凝集，可以再次檢查。
紅血球自然凝聚
【性 能】
１．感度
自家參照抗Ａ型又は抗Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ
抗血清を用いて，ＨＩ試験を行ったとき，対応する型に
対してそれぞれ80～160倍のＨＩ抗體価を示しました。
２．正確性
自家參照抗Ａ型及びＢ型インフルエンザウイルスＨＩ
抗血清を用いて，ＨＩ試験を行ったとき，Ａ型ＨＡ抗原
はＡ型インフルエンザウイルスＨＩ抗血清に対しては80倍
以上であり，Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ抗血清に
対しては10倍未満のＨＩ抗體価を示しました。同様にＢ型
ＨＡ抗原はＡ型ＨＩ抗血清に対しては10倍未満，Ｂ型
ＨＩ抗血清に対しては80倍以上のＨＩ抗體価を示しました。
３．同時再現(xiàn)性
自家參照抗Ａ型又は抗Ｂ型インフルエンザウイルスＨＩ
抗血清を用いて3回，同時にＨＩ試験を行ったとき，対応
する型に対していずれも80～160倍のＨＩ抗體価を示し
ました。
【性功能】
1。靈敏度
抗A型或抗B型流感病毒HI
當(dāng)使用抗血清進行HI試驗時，對應(yīng)的類型
分別顯示了80 ~ 160倍的HI抗體值。
2。正確性
抗A型和B型流感病毒HI
用抗血清進行HI試驗時，A型HA抗原
是A型流感病毒HI抗血清的80倍
B型流感病毒HI抗血清
與之相對的，顯示了不到10倍的HI抗體價值。同樣B型
HA抗原對A型HI抗血清不足10倍，B型
對HI抗血清顯示了80倍以上的HI抗體價值。
3。同時再現(xiàn)性
抗A型或抗B型流感病毒HI
使用抗血清同時進行3次HI試驗時，對應(yīng)
每一種類型的HI抗體值都是80 ~ 160倍
是的。
【使用上又は取扱い上の注意】*
１．取扱い上(危険防止)の注意
1）検體はＨＩＶ，ＨＢＶ，ＨＣＶ等の感染の恐れがあるもの
として取扱ってください。検査にあたっては感染の危険
を避けるため使い捨て手袋，マスクなどを著用し，また
口によるピペッティングを行わないでください。
2）検體を取扱う際には，検體が手指?衣服等に付著しない
ように注意し，付著した場合は速やかに消毒してください。
3）本品が，誤って目や口に入ったり皮膚に付著した場合には
水で十分に洗い流す等の応急処置を行い，必要があれば
醫(yī)師の手當(dāng)て等を受けてください。
２．使用上の注意
1）マイクロタイター法の手技，特に，ドロッパーやダイ
リューターの操作及び赤血球液の濃度等は，試験精度の
基本となるため，正しい操作の習(xí)熟が必要です。
2）本品は，指定された條件で保管し，使用期限を過ぎた
ものは使用しないでください。
3）容器のゴム栓は取り違えないようにしてください。
4）製造番號の異なる試薬を組み合わせたり，混ぜ合わせて
使用しないでください。また，同一ロットの試薬であっても
試薬間の注ぎ足しは測定誤差を生じる原因となりますので
避けてください。
5）検體相互間の汚染を防ぐため，検體をサンプリングする際，
同一チップの使用は避けてください。
6）マイクロプレートは必ずキズ，汚れ等のないものを使用
してください。
３．廃棄上の注意
1）検體中には，感染性物質(zhì)が存在する可能性がありますので，
検體，廃液，使用済みの容器及び検査に使用したすべての
器具類は，次のいずれかの方法で滅菌処理を行ってくだ
さい。
①最終濃度3.5vol％グルタルアルデヒド溶液に，30分間
以上浸漬する。
②0.5w/v％次亜塩素酸ナトリウム溶液（有効塩素5 000ppm）
に，1時間以上浸漬する。
③121℃で，20分間以上高圧蒸気滅菌をする。
2）試薬及び器具等を廃棄する場合には，廃棄物の処理及び
清掃に関する法律，水質(zhì)汚濁防止法等の規(guī)定に従って処理
してください。
【貯蔵方法?有効期間】*
1）貯蔵方法 2～10℃に保存
2）有効期間 1年
(ラベルに表示の使用期限內(nèi)にご使用ください。)
【使用上或處理上的注意】*
1。處理上(防止危險)的注意
1)有感染HIV、HBV、HCV等可能性的樣本。
請作為處理。檢查時有感染的危險
為了避免戴一次性手套，口罩，
請不要用嘴進行粘貼。
取檢物時，檢物不要附著在手指、衣服等上
注意衛(wèi)生，沾上請及時消毒。
3)本品不小心進入眼睛、口腔或沾到皮膚時，應(yīng)注意
用水充分沖洗等應(yīng)急措施，必要時
請接受醫(yī)生的治療等。
2。使用上的注意事項
1)微型打字機的工藝，特別是滴管和模具
雷器的操作和紅血球液體濃度等，測試精度的
因為是基礎(chǔ)，正確的操作的熟練是必要的。
本品按指定條件保管，已超過使用期限。
請不要使用東西。
3)請不要拿錯容器的橡皮塞子。
4)組合或混合不同生產(chǎn)編號的試劑
請不要使用。即使是同一批次的試劑
試劑之間的添加會導(dǎo)致測量誤差。
請避開。
5)為了防止檢材相互間的污染，對檢材進行取樣時，
請避免使用同一芯片。
6)微板一定要使用無損傷、無污漬的。
請做。
3。廢棄上的注意事項
在檢體中，有可能存在感染性物質(zhì)，
檢體，廢液，使用過的容器，以及所有用于檢驗的物品
器具類用下列方法進行滅菌處理
賽。
①將最終濃度為3.5vol %的戊二醛溶液浸泡30分鐘
以上浸泡。
②0.5w/v %次氯酸鈉溶液(有效氯500ppm)
二，浸泡一個小時以上。
③在121℃下進行20分鐘以上的高壓蒸汽滅菌。
2)銷毀試劑和器具時，應(yīng)進行廢棄物的處理
依照有關(guān)清潔的法律，水質(zhì)污濁防止法等的規(guī)定處理
請做。
【儲存方法·有效期限】*
1)儲存方法2 ~ 10℃保存
2)有效期一年
(請在標(biāo)簽上標(biāo)明的使用期限內(nèi)使用。)
各20mL分（凍結(jié)乾燥） 5本
ＲＤＥ「生研」 ?。ㄉ唐贩?340016）
ＲＤＥ（II）「生研」 ?。ㄉ唐贩?340122）