Human IL-6 ELISA Kit (High-sensitive)

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產(chǎn)品編號(hào)

PI325
Human IL-6 ELISA Kit (High-sensitive)
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3198

生產(chǎn)的Human IL-6ELISA Kit(Human Interleukin-6Enzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit, High-sensitive)，即高敏型人白細(xì)胞介素6酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-6的ELISA試劑盒，最小檢出量為1.5pg/ml。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明，最小檢出量為1.5pg/ml，與人IL-1、IL-12、LIF、LIF R、OSM、CNTF、G-CSF、sgp130、IL-6 sR、小鼠IL-6、IL-11、IL-12和大鼠CNTF等沒有交叉反應(yīng)。板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
IL-6即白細(xì)胞介素-6 (簡(jiǎn)稱白介素6)，是一種多功能、呈α螺旋、易于磷酸化和糖基化的細(xì)胞因子，分子量為22-28KD。IL-6在免疫反應(yīng)、炎癥、血細(xì)胞生成、骨代謝、細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)、存活和分化、以及腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用。
IL-6的受體是細(xì)胞表面的IL-6Rα和gp130亞基組成的異二聚體。IL-6與IL-6Rα結(jié)合后引發(fā)IL-6Rα與gp130的二聚化，從而激活下游的信號(hào)通路，主要包括JAK/STAT信號(hào)通路、Ras信號(hào)通路以及PI3K信號(hào)通路。IL-6Rα和gp130組成了IL-6的受體復(fù)合物，而gp130也是CLC、CNTF、CT-1、IL-11、IL-27、LIF、OSM等的受體復(fù)合物的組分。IL-6的信號(hào)通路圖見圖1。

圖1. IL-6的信號(hào)通路示意圖。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè) 樣品中人IL-6的濃度，其原理見圖1。人IL-6特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IL-6會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-6抗體后，生物素化抗人IL-6抗體與人IL-6結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人IL-6濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖 。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PI325-1
人IL-6抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PI325-2
樣本分析緩沖液
5ml

PI325-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

PI325-4
人IL-6標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

PI325-5
人IL-6生物素化抗體
10ml

PI325-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

PI325-7
洗滌液(20X)
30ml

PI325-8
TMB溶液
10ml

PI325-9
終止液
5ml

PI325-10
封板膜(透明)
2張

PI325-11
封板膜(白色)
2張

—
說明書
1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測(cè)試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。