JJP200-500ml 增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)

產(chǎn)品編號(hào)

JJP200-100ml
增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)
100ml

268

JJP200-500ml
增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)
500ml

988

增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用),英文名Enhanced TMB Chromogen Solution for ELISA或Enhanced TMB Substrate Solution for ELISA or Enhanced TMB Solution for ELISA)是一種采用了最新單一溶液TMB顯色技術(shù),通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化TMB顯色,用于ELISA等的增強(qiáng)型顯色液。本顯色液也可以用于檢測(cè)血液或血紅蛋白等樣品中的過(guò)氧化物酶含量。
通常的TMB顯色試劑由多個(gè)組份組成,必須在使用前進(jìn)行配制,并且容易產(chǎn)生沉淀,使用相對(duì)不太方便,并且也容易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不太穩(wěn)定。本TMB顯色液采用了最新的TMB顯色技術(shù),把所有的相關(guān)試劑全部配制在一個(gè)溶液中,僅由單一溶液組成,簡(jiǎn)化了操作步驟,并且使檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。
TMB,即3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。在辣根過(guò)氧化物酶或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶的催化下,TMB會(huì)產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物。藍(lán)色產(chǎn)物通??梢栽?70nm或620-650nm測(cè)定吸光度。不同濃度辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記二抗使用本產(chǎn)品的檢測(cè)效果參見圖1A。

圖1. JJP200 增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)的檢測(cè)效果圖。A. 本產(chǎn)品和JJP209 TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)的檢測(cè)效果對(duì)比圖。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記山羊抗兔IgG (A0208)用PBS稀釋至圖中所示濃度,各取20微升,加入200微升本產(chǎn)品,在5分鐘時(shí)檢測(cè)A370。從檢測(cè)結(jié)果可知,HRP標(biāo)記二抗?jié)舛戎辽僭?-0.02%范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,并且JP2010的檢測(cè)靈敏度比JJP209約高50%。B. 本產(chǎn)品直接檢測(cè)A370和添加終止液后檢測(cè)A450的檢測(cè)效果對(duì)比圖。圖中可見添加終止液后檢測(cè)A450的檢測(cè)靈敏度更高一些。實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)會(huì)因試劑、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
辣根過(guò)氧化物酶催化TMB顯藍(lán)色后可以使用的TMB顯色終止液(450nm, 不含硫酸) (JJP205)、TMB顯色終止液(650nm, 無(wú)腐蝕性) (JJP207) 或自行配制的2M H2SO4終止反應(yīng)。加入TMB顯色終止液(450nm, 不含硫酸)或硫酸后,溶液呈黃色,此時(shí)可以在450nm測(cè)定吸光度,吸光度會(huì)有顯著升高(圖1B);加入TMB顯色終止液(650nm, 無(wú)腐蝕性)后,溶液保持藍(lán)色不變,此時(shí)可在620-650nm測(cè)定吸光度。
本試劑盒最常用于ELISA檢測(cè),也可以用于檢測(cè)血液或血紅蛋白等樣品中的過(guò)氧化物酶含量。
用于ELISA檢測(cè)時(shí),每個(gè)樣品通常使用0.1毫升顯色液,每100ml本產(chǎn)品共可以檢測(cè)約1000個(gè)樣品。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

JJP200-100ml
增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)
100ml

JJP200-500ml
增強(qiáng)型TMB顯色液(ELISA HRP顯色用)
500ml


說(shuō)明書
1份

保存條件:
4℃避光保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
TMB對(duì)人體有刺激性,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品為微藍(lán)色透明溶液,如果發(fā)現(xiàn)TMB顯色液出現(xiàn)混濁或顏色變成較深的藍(lán)色,應(yīng)該停止使用。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Human FSL-1 ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PF322
Human FSL-1 ELISA Kit
96次

3198

的Human FSL-1 ELISA Kit (Human Follistatin-like 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人卵泡抑制素樣蛋白1酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的FSL-1的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為0.31ng/ml,與人Agrin、
Follistatin?(315)、FSTL4、FSTL5等均沒有交叉反應(yīng),與小鼠的FSL-1有11.7%的交叉反應(yīng)性,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
卵泡抑制素樣蛋白(follistatin-like?1,?FSL-1或FLTL-1),又被稱為FRP?(follistatin-related?protein)、Flik?(follistatin-like)或
TSC-36?(TGF-beta1-stimulated?clone?36),是一種分子量在45-55kDa之間的分泌型糖蛋白,屬于BM-40/SPARC/Osteonectin家族。人FSL-1的cDNA編碼產(chǎn)生308個(gè)氨基酸的前體蛋白,其中包括20個(gè)氨基酸的信號(hào)肽。成熟的人FSL-1與小鼠、大鼠、牛和馬的FSL-1分別具有94%、95%、98%和99%的氨基酸同源性。體外,F(xiàn)SL-1能夠直接與BMP-4相互作用,在體內(nèi),F(xiàn)SL-1參與調(diào)節(jié)正常肺發(fā)育過(guò)程中BMP-4的信號(hào)傳遞。FSL-1是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎常見的自身抗原。FSL-1能夠通過(guò)促進(jìn)炎性細(xì)胞因子分泌誘導(dǎo)炎癥產(chǎn)生,或者通過(guò)抑制基質(zhì)金屬蛋白酶和前列腺素表達(dá)阻止自身免疫性關(guān)節(jié)炎發(fā)生。在肌肉和心臟組織中,F(xiàn)SL-1能夠保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能,通過(guò)誘導(dǎo)蛋白激酶AKT1的表達(dá)和激活促進(jìn)局部缺血后的血管再生。FSL-1具有一定的腫瘤抑制作用,在多種腫瘤中FSL-1的表達(dá)都會(huì)出現(xiàn)下調(diào),在體外,F(xiàn)SL-1能夠增加FAS依賴性腫瘤細(xì)胞的凋亡。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測(cè)樣品中人FSL-1的濃度,其原理見圖1。人FSL-1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的人FSL-1會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人FSL-1抗體后,生物素化抗人FSL-1抗體與人FSL-1結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人FSL-1濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中人FSL-1濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PF322-1

人FSL-1抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PF322-2

樣品分析緩沖液

5ml

PF322-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

PF322-4

人FSL-1標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PF322-5

人FSL-1生物素化抗體

10ml

PF322-6

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PF322-7

洗滌液(20X)

30ml

PF322-8

TMB溶液

10ml

PF322-9

終止液

5ml

PF322-10

封板膜(透明)

2張

PF322-11

封板膜(白色)

2張

說(shuō)明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其它組份4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Mouse EPO ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PE228
Mouse EPO ELISA Kit
96次

2925

的Mouse EPO ELISA Kit (Mouse Erythropoietin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠促紅細(xì)胞生成素酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的EPO的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為58pg/ml,與小鼠TPO沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin, EPO)是一種由腎臟產(chǎn)生的糖蛋白,參與調(diào)節(jié)哺乳類動(dòng)物中紅細(xì)胞生成。EPO的產(chǎn)生受到氧利用率變化的調(diào)節(jié),在缺氧條件下,EPO水平會(huì)有所上升,從而導(dǎo)致紅細(xì)胞數(shù)量增加。小鼠EPO基因編碼192個(gè)氨基酸殘基前體,包含26個(gè)氨基酸信號(hào)肽和166個(gè)氨基酸的成熟蛋白,其中有三個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn),小鼠EPO缺乏在人類EPO中發(fā)現(xiàn)的O-糖基化位點(diǎn)。糖基化對(duì)穩(wěn)定EPO的體內(nèi)活性具有重要作用[1],若缺乏糖鏈,EPO在體內(nèi)會(huì)被迅速水解而失活,但體外受體結(jié)合不需要糖鏈。根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的不同產(chǎn)生不同亞型的EPO,不同亞型的EPO的糖類組成和唾液酸含量不同。成熟的小鼠EPO與成熟的大鼠、人和貓科動(dòng)物EPO序列分別有94%、80%和82%的同源性。EPO通過(guò)兩個(gè)EPO受體(EPO receptor, EPO R)亞單位組成的高親和力的同源二聚體EPO R結(jié)合并發(fā)出信號(hào)。EPO R亞單位屬于I型細(xì)胞因子受體超家族的I型跨膜糖蛋白,EPO與EPO R同源二聚體的結(jié)合導(dǎo)致非受體型酪氨酸蛋白激酶JAK2的構(gòu)象變化、磷酸化和激活,從而使下游信號(hào)激活[2]。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中小鼠EPO的濃度,其原理見圖1。小鼠EPO特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的小鼠EPO會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠EPO抗體后,生物素化抗小鼠EPO抗體與小鼠EPO結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。小鼠EPO濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

PE228-1
小鼠EPO抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PE228-2
樣品分析緩沖液
5ml

PE228-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

PE228-4
小鼠EPO標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

PE228-5
小鼠EPO生物素化抗體
10ml

PE228-6
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

PE228-7
洗滌液(20X)
30ml

PE228-8
TMB溶液
10ml

PE228-9
終止液
5ml

PE228-10
封板膜(透明)
2張

PE228-11
封板膜(白色)
2張


說(shuō)明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Mouse Cys-C ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PC215
Mouse Cys-C ELISA Kit
96次

3198

的Mouse Cys-C ELISA Kit (Mouse Cystatin C Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠胱氨酸蛋白酶抑制劑C酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Cys-C的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為12.8pg/ml,與小鼠E-Selectin、ICAM-1
、L-Selectin、P-Selectin及人Cys-C等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
半胱氨酸蛋白酶抑制劑C (Cystatin C, Cys-C),又稱胱抑素C,是一種由CJJP30基因編碼產(chǎn)生的分泌型半胱氨酸蛋白酶抑制劑,屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族。其含有120個(gè)氨基酸殘基,分子量在13kDa左右,以非糖基化的形式存在,在大鼠體內(nèi)存在有糖基化的Cys-C。成熟的小鼠和大鼠Cys-C之間具有88%的氨基酸同源性,與人Cys-C具有72%的氨基酸同源性。Cys-C容易在內(nèi)切蛋白酶的作用下得到N端縮短的Cys-C形式。木瓜蛋白酶家族中的半胱氨酸蛋白酶例如組織蛋白酶B、H、K、L及S都會(huì)受到Cys-C的影響。
多種組織均能產(chǎn)生Cys-C,在血漿、尿液及腦脊液等多種體液樣本中都可以檢測(cè)到Cys-C。Cys-C能夠輕松被腎小球?yàn)V過(guò),隨后被近端小管表皮細(xì)胞通過(guò)巨蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用所吸收代謝,因而無(wú)法重新回到血液中。因此血清中Cys-C的濃度與腎小球?yàn)V過(guò)率密切相關(guān)。其在血清或血漿中的濃度被認(rèn)為是評(píng)估藥物腎毒性的指標(biāo)之一,并且與肌酸酐相比,Cys-C受性別、年齡、體重及肝硬化影響較小。但是在慢性炎癥期間Cys-C的濃度會(huì)有所增加,這一部分是由于IL-6增加Cys-C產(chǎn)生有關(guān)。相反,一些抗炎性細(xì)胞因子如IL-10、IFN-β和IFN-γ則會(huì)減少Cys-C的表達(dá),降低其濃度。
Cys-C通過(guò)調(diào)節(jié)半胱氨酸蛋白酶的活性影響部分疾病發(fā)展。在人體內(nèi),腎功能正常狀態(tài)下Cys-C濃度過(guò)高通常與冠狀動(dòng)脈和心血管疾病相關(guān)。游離的Cys-C對(duì)腫瘤的轉(zhuǎn)移具有一定影響,異常的Cys-C水平過(guò)低,會(huì)導(dǎo)致組織蛋白酶B介導(dǎo)的細(xì)胞外基質(zhì)降解增加,從而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移,Cys-C濃度升高時(shí)則會(huì)表現(xiàn)出對(duì)TGF-β的拮抗作用,減慢腫瘤的侵襲和生長(zhǎng)。在小鼠阿爾茲海默病模型中,Cys-C還能夠抑制β-淀粉蛋白沉積,保護(hù)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞免受損害。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測(cè)樣品中小鼠Cys-C的濃度,其原理見圖1。小鼠Cys-C特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的小鼠Cys-C會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠Cys-C抗體后,生物素化抗小鼠Cys-C抗體與小鼠Cys-C結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。小鼠Cys-C濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中小鼠Cys-C濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PC215-1

小鼠Cys-C抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC215-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

PC215-3

小鼠Cys-C標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC215-4

小鼠Cys-C生物素化抗體

10ml

PC215-5

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC215-6

洗滌液(20X)

30ml

PC215-7

TMB溶液

10ml

PC215-8

終止液

5ml

PC215-9

封板膜(透明)

2張

PC215-10

封板膜(白色)

2張

說(shuō)明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4oC保存,1-2周內(nèi)有效,-20oC保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其它組份4oC保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Rat CRP ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PC188
Rat CRP ELISA Kit
96次

3198

的Rat CRP ELISA Kit (Rat C-Reactive Protein Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠C反應(yīng)蛋白酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的CRP的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為112pg/ml,與大鼠Pentraxin 2、Leptin,人CRP,小鼠CRP 等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
C反應(yīng)蛋白(C-Reactive Protein, CRP),又叫正五聚蛋白1 (Pentraxin?1),是一種非糖基化蛋白,屬于正五聚蛋白家族,該家族中還包括正五聚蛋白2 (Pentraxin 2/SAP)和正五聚蛋白3 (Pentraxin 3/TSG-14)。CRP的主要功能是作為先天性免疫反應(yīng)的傳感器和活化劑。在人體內(nèi),CRP是一種主要的急性時(shí)相蛋白,其循環(huán)濃度在炎癥初始時(shí)會(huì)顯著升高。然而在小鼠體內(nèi),血漿CRP水平在炎癥發(fā)生期間僅出現(xiàn)輕微上升,正五聚蛋白2則具有與CRP在人體內(nèi)相類似的濃度變化。CRP蛋白通過(guò)非共價(jià)鍵自組裝形成分子量在110-120kDa之間的五聚體,成熟的大鼠CRP與小鼠CRP和人CRP分別具有71%和64%的氨基酸同源性。
CRP能夠與凋亡的細(xì)胞及細(xì)菌結(jié)合并促進(jìn)其被吞噬細(xì)胞吞噬,CRP還能與補(bǔ)體級(jí)聯(lián)系統(tǒng)中的一些蛋白如C1q、C4BP和Factor H結(jié)合,增強(qiáng)經(jīng)典補(bǔ)體激活途徑的活化,并增加C3b蛋白的沉積,在之后的應(yīng)答過(guò)程中,CRP能夠通過(guò)與C4BP和Factor?H結(jié)合抑制補(bǔ)體調(diào)節(jié)細(xì)胞的溶解。這些作用能夠誘導(dǎo)補(bǔ)體抑制蛋白CD46、CD59和CD55/DAF的表達(dá),抑制膜攻擊復(fù)合物(Membrane?Attack?Complex,?MAC)的合成。
CRP與巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞表面的Fcγ?RIA和Fcγ?RIIB結(jié)合使得CRP連接的靶細(xì)胞被細(xì)胞吞噬清除,F(xiàn)c受體也是這一過(guò)程的必不可少的受體之一。CRP與Fcγ?R?I結(jié)合,誘導(dǎo)Src活化,并抑制炎癥反應(yīng)。另外CRP還能夠促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟,增強(qiáng)體液免疫。但在心血管疾病當(dāng)中,CRP能夠與被氧化的低密度脂蛋白結(jié)合,加劇冠狀動(dòng)脈梗塞部位的組織損傷,抑制受損血管內(nèi)皮的修復(fù)。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中大鼠CRP的濃度,其原理見圖1。大鼠CRP特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的大鼠CRP會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗大鼠CRP抗體后,生物素化抗大鼠CRP抗體與大鼠CRP結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。大鼠CRP濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中大鼠CRP濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PC188-1

大鼠CRP抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC188-2

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

20ml

PC188-3

大鼠CRP標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC188-4

大鼠CRP生物素化抗體

10ml

PC188-5

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC188-6

洗滌液(20X)

30ml

PC188-7

TMB溶液

10ml

PC188-8

終止液

5ml

PC188-9

封板膜(透明)

2張

PC188-10

封板膜(白色)

2張

說(shuō)明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其他組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Human Cortisol ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PC169
Human Cortisol ELISA Kit
96次

3198

的Human CortisolELISA Kit(Human CortisolEnzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit),即人皮質(zhì)醇酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿、唾液及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的皮質(zhì)醇的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為78pg/ml,與11-脫氧皮質(zhì)醇的交叉反應(yīng)性為0.9%,與氫化潑尼松的交叉反應(yīng)性為5.6%,與皮質(zhì)酮的交叉反應(yīng)性為0.6%,與脫氧皮質(zhì)酮、孕酮、17-己酸羥孕酮、睪酮、雌三醇、達(dá)那唑等的交叉反應(yīng)性小于0.1%板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
皮質(zhì)醇(Cortisol),也稱氫化可的松(Hydrocortisone)或化合物F(Compound F),是從腎上腺皮質(zhì)中提取的對(duì)糖類代謝具有最強(qiáng)作用的腎上腺皮質(zhì)激素,屬于糖皮質(zhì)激素的一種。皮質(zhì)醇有多種作用,但最為人所熟知的就是它對(duì)新陳代謝和免疫系統(tǒng)功能的影響。它是膽固醇的代謝物和其它類固醇激素激素如鹽皮質(zhì)激素、雌激素、雄激素和孕激素的前體。皮質(zhì)醇水平由下丘腦-垂體-腎上腺軸(hypothalamic-pituitary-adrenalaxis,HPAaxis)控制。垂體前葉釋放的促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)調(diào)控腎上腺皮質(zhì)分泌皮質(zhì)醇。ACTH的分泌受到促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)和精氨酸加壓素(arginine vasopressin)等多肽的調(diào)控。而皮質(zhì)醇對(duì)CRH的釋放具有抑制作用。正常的皮質(zhì)醇代謝遵循一種生理節(jié)奏,是一個(gè)周期為24小時(shí)的循環(huán),一般皮質(zhì)醇水平最高點(diǎn)在早晨約6-8點(diǎn),最低點(diǎn)在凌晨約0-2點(diǎn)。
大約由90%的皮質(zhì)醇與結(jié)合蛋白相結(jié)合,主要是皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(corticosteroid-binding globulin, CBG),但是皮質(zhì)醇一般在游離的條件下發(fā)揮生理效應(yīng),也有一些證據(jù)表明CBG結(jié)合形式也可能作為一種生物介質(zhì)。游離皮質(zhì)醇穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入胞漿,與廣泛表達(dá)的糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor, GR)結(jié)合。雖然目前只有一個(gè)GR基因被鑒定出來(lái),但至少有兩個(gè)選擇性剪接的亞型(α以及β)存在并可能具有不同的表達(dá)模式和活動(dòng)。一般認(rèn)為,激素/受體復(fù)合物作為二聚體進(jìn)入細(xì)胞核,在那里通過(guò)結(jié)合糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件(glucocorticoid response elements, GRE)調(diào)控轉(zhuǎn)錄。除了GR外,皮質(zhì)醇與鹽皮質(zhì)激素受體(mineralcorticoidreceptor, MR)具有一定的親和力,MR是醛固酮(aldosterone)的典型受體。
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA(Competitive ELISA)檢測(cè)樣品中Cortisol的濃度,其原理見圖1。高特異性識(shí)別Cortisol的抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,同時(shí)加入樣品和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol,樣品中的Cortisol與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合酶標(biāo)板中包被的抗體。隨后洗去游離的Cortisol與游離的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的TMB氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。如果樣本中Cortisol含量越多,則與抗體結(jié)合的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol就越少,顏色越淺,即顏色與樣品中的濃度成反比。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。Cortisol濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中Cortisol濃度。

圖1.競(jìng)爭(zhēng)法ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

PC169-1
Cortisol抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PC169-2
樣品稀釋液
16ml

PC169-3
Cortisol標(biāo)準(zhǔn)品
2管

PC169-4
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol
2-4瓶

PC169-5
洗滌液(20X)
30ml

PC169-6
TMB溶液
10ml

PC169-7
樣品酸化液
10ml

PC169-8
樣品中和液
10ml

PC169-9
終止液
5ml

PC169-10
封板膜(透明)
2張

PC169-11
封板膜(白色)
2張


說(shuō)明書
1份

保存條件:
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol 4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
唾液中含有皮質(zhì)醇,所以建議實(shí)驗(yàn)時(shí)佩戴口罩和手套,以免樣品被污染。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol的精確性,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Cortisol復(fù)溶后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Mouse CCL2/JE/MCP-1 ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PC125
Mouse CCL2/JE/MCP-1 ELISA Kit
96次

2798

的Mouse?CCL2/JE/MCP-1?ELISA?Kit?(Mouse?Monocyte?Chemoattractant?Protein1?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit),即小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MCP-1的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為16.2pg/ml,與小鼠MCP-2、MCP-3、MCP-4、人MCP-1、MCP-5、MARC等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
小鼠JE基因最初被認(rèn)為是小鼠成纖維細(xì)胞中血小板來(lái)源的生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)基因。JE基因所編碼的蛋白都屬于炎性細(xì)胞因子或免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子,屬于CC趨化因子家族。在所有CC趨化因子家族成員中,JE在結(jié)構(gòu)上和功能上都與MCP/eotaxin具有一定相關(guān)性。在MCP/eotaxin亞族中,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的成員有人MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4和eotaxin以及小鼠JE/MCP-1、MCP-3/MARC、MCP-5和eotaxin。成熟的人MCP-1與小鼠JE、MARC、MCP-5分別具有55%、59%和66%的氨基酸同源性。
單核細(xì)胞趨化蛋白(Monocyte?Chemoattractant?Protein?1, MCP-1),也被稱為單核細(xì)胞趨化與激活因子(Monocyte Chemotactic and Activating Factor, MCAF)。小鼠MCP-1 cDNA編碼產(chǎn)生148個(gè)氨基酸的前體蛋白,經(jīng)剪切掉23個(gè)氨基酸的信號(hào)肽后得到成熟的小鼠MCP-1。與人MCP-1相比,小鼠MCP-1具有49個(gè)氨基酸的羧基端延伸,主要由絲氨酸和蘇氨酸構(gòu)成,MCP-1的羧基端被證實(shí)并非MCP-1發(fā)揮活性所必需。除了成纖維細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞外,小鼠MCP-1在巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞和成釉質(zhì)細(xì)胞上也有所表達(dá)。小鼠MCP-1的表達(dá)主要受到炎性刺激因子和TNF-α、IL-1、IFN-γ和PDGF等細(xì)胞因子的影響。
小鼠MCP-1是一種有效的單核細(xì)胞,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞化學(xué)引誘物。MCP-1能夠調(diào)節(jié)Th1/Th2淋巴細(xì)胞分化,通過(guò)刺激IL-4的產(chǎn)生從而抑制IL-2分泌,促進(jìn)Th2細(xì)胞生成。G蛋白偶聯(lián)受體CCR2參與調(diào)節(jié)MCP-1的活性,小鼠CCR2?cDNA編碼產(chǎn)生373個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的蛋白,與人MCP-1受體CCR2B具有80%的氨基酸同源性。單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面表達(dá)大量的CCR2。
MCP-1與受體結(jié)合后能夠通過(guò)活化Smad3和JP42/44?MAPK及PI3K/AKT通路影響腫瘤細(xì)胞的遷移和存活,還能夠影響ERK1/ERK2/JNK-AP1和NF-κB信號(hào)通路發(fā)揮作用。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測(cè)樣品中小鼠MCP-1的濃度,其原理見圖1。小鼠MCP-1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的小鼠MCP-1會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠MCP-1抗體后,生物素化抗小鼠MCP-1抗體與小鼠MCP-1結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。小鼠MCP-1濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中小鼠MCP-1濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PC125-1

小鼠CCL2/JE/MCP-1抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC125-2

樣品分析緩沖液

5ml

PC125-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

PC125-4

小鼠CCL2/JE/MCP-1標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC125-5

小鼠CCL2/JE/MCP-1生物素化抗體

10ml

PC125-6

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC125-7

洗滌液(20X)

30ml

PC125-8

TMB溶液

10ml

PC125-9

終止液

5ml

PC125-10

封板膜(透明)

2張

PC125-11

封板膜(白色)

2張

說(shuō)明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Human CCL11/Eotaxin ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PC115
Human CCL11/Eotaxin ELISA Kit
96次

3198

的Human?CCL11/Eotaxin?ELISA?Kit?(Human?CCL11/Eotaxin?Enzyme-Linked?ImmunoSorbent Assay Kit),即人嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的CCL11/Eotaxin的ELISA試劑盒。
ImmunoSorbent?Assay?Kit),即小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的MCP-1的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為12.6pg/ml,與人的MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、 RANTES及小鼠的Eotaxin等均沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin),又稱CCL11 (Chemokine C-C motif Ligand 11),是一種分子量為8.3kDa、含有74個(gè)氨基酸的非糖基化多肽,屬于CC細(xì)胞因子家族。人Eotaxin具有一定的種間交叉反應(yīng)性,與小鼠和豚鼠具有60%的氨基酸同源性。與其它CC家族細(xì)胞因子相比,Eotaxin與MCP-1具有66%的氨基酸同源性,與MCP-4具有58%的氨基酸同源性,與Eotaxin-2僅有39%的氨基酸同源性。炎性細(xì)胞因子IL-1、TNF-α和IFN-γ能夠誘導(dǎo)Eotaxin產(chǎn)生。能夠產(chǎn)生Eotaxin的細(xì)胞有許多類型,例如內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等。
在炎性和過(guò)敏反應(yīng)中,Eotaxin是嗜酸性粒細(xì)胞有效的選擇性化學(xué)誘導(dǎo)物,CCR3受體參與調(diào)節(jié)Eotaxin活性。CCR3分子量在45-55kDa,含有355個(gè)氨基酸,具有7次跨膜結(jié)構(gòu)。盡管CCR3是目前已知的Eotaxin唯一受體,但其它細(xì)胞因子例如Eotaxin-2、MCP-4、MCP-3、Leukotactin-1和RANTES也能與CCR3結(jié)合,只是親和力有所不同。pH和離子強(qiáng)度的改變會(huì)影響Eotaxin和CCR3的結(jié)合,這表明組織微環(huán)境中的細(xì)微變化可能是調(diào)控Eotaxin生物學(xué)效應(yīng)的機(jī)制之一。表達(dá)CCR3的細(xì)胞主要嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和Th2輔助T細(xì)胞。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測(cè)樣品中人CCL11/Eotaxin的濃度,其原理見圖1。人CCL11/Eotaxin特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的人CCL11/Eotaxin會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人CCL11/Eotaxin抗體后,生物素化抗人CCL11/Eotaxin抗體與人CCL11/Eotaxin結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人CCL11/Eotaxin濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中人CCL11/Eotaxin濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PC115-1

人CCL11/Eotaxin抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC115-2

樣品分析緩沖液

5ml

PC115-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ml

PC115-4

人CCL11/Eotaxin標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC115-5

人CCL11/Eotaxin生物素化抗體

10ml

PC115-6

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC115-7

洗滌液(20X)

30ml

PC115-8

TMB溶液

10ml

PC115-9

終止液

5ml

PC115-10

封板膜(透明)

2張

PC115-11

封板膜(白色)

2張

說(shuō)明書

1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效;試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Human C5a ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PJJP010094
Human C5a ELISA Kit
96次

3198

的Human C5aELISA Kit(Human C5aEnzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit),即人補(bǔ)體成分C5a酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的C5a的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為17.5pg/ml,與人C3a沒有交叉反應(yīng),與C3有25%的交叉反應(yīng)性,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
補(bǔ)體系統(tǒng)(complement system)是由30多種血漿蛋白和膜蛋白組成,廣泛存在于血液、組織液和細(xì)胞表面,是一種具有精密調(diào)控機(jī)制的蛋白反應(yīng)系統(tǒng)。補(bǔ)體的主要生理功能是促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬能力和溶解靶細(xì)胞,因此是機(jī)體免疫防御機(jī)制的重要組成部分。C5a是由蛋白酶C5轉(zhuǎn)化酶將補(bǔ)體組分C5切割成C5a和C5b片段而釋放的蛋白質(zhì)片段,相對(duì)分子質(zhì)量約為11kDa。人的C5a與小鼠和大鼠的C5a分別有60%和54%的同源性。C5起源于肝細(xì)胞,但其也可以在巨噬細(xì)胞中合成。在巨噬細(xì)胞中合成時(shí),可能導(dǎo)致C5a的局部增加。
C5a是一種趨化劑和過(guò)敏毒素,是補(bǔ)體裂解片段中顯示過(guò)敏毒素作用最強(qiáng)的介質(zhì),是先天免疫必不可少的一部分,也與適應(yīng)性免疫有關(guān),其含量的增加與許多炎癥性疾病相關(guān)。C5a可不依賴肥大細(xì)胞釋放組胺,而是通過(guò)直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞而增加血管的通透性,刺激平滑肌收縮。高濃度的C5a是中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的趨化劑,可誘導(dǎo)這些細(xì)胞順濃度梯度方向移動(dòng)。C5a與C5aR(CD88)結(jié)合,激活下游G蛋白偶聯(lián)的通路,引起中性粒細(xì)胞趨化性和內(nèi)皮細(xì)胞的活化。C5a也會(huì)引起巨噬細(xì)胞與中性粒細(xì)胞的急劇氧化。此外,C5a對(duì)免疫應(yīng)答有明顯的增強(qiáng)作用,可誘導(dǎo)單核細(xì)胞分泌IL-1、IL-6、IL-8及TNF-α等細(xì)胞因子,促進(jìn)抗原及同種異體抗原誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖及B細(xì)胞產(chǎn)生抗體等。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中人C5a的濃度,其原理見圖1。人C5a特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的人C5a會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人C5a抗體后,生物素化抗人C5a抗體與人C5a結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人C5a濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1.雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

PJJP010094-1
人C5a抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PJJP010094-2
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)
60ml

PJJP010094-3
人C5a標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

PJJP010094-4
人C5a生物素化抗體
10ml

PJJP010094-5
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

PJJP010094-6
洗滌液(20X)
30ml

PJJP010094-7
TMB溶液
10ml

PJJP010094-8
終止液
5ml

PJJP010094-9
封板膜(透明)
2張

PJJP010094-10
封板膜(白色)
2張


說(shuō)明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。/p>
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Human C3a ELISA Kit

產(chǎn)品編號(hào)

PJJP010091
Human C3a ELISA Kit
96次

3198

的Human C3aELISA Kit(Human C3aEnzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit),即人補(bǔ)體成分C3a酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的C3a的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明,最小檢出量為42pg/ml,與人的C5a等沒有交叉反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
補(bǔ)體系統(tǒng)(complement system)是由30多種血漿蛋白和膜蛋白組成,廣泛存在于血液、組織液和細(xì)胞表面,是一種具有精密調(diào)控機(jī)制的蛋白反應(yīng)系統(tǒng)。補(bǔ)體的主要生理功能是促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬能力和溶解靶細(xì)胞,因此是機(jī)體免疫防御機(jī)制的重要組成部分。補(bǔ)體C3a是補(bǔ)體固有分子C3的活化裂解產(chǎn)物。在C3轉(zhuǎn)化酶的作用下,C3被激活裂解成C3a和C3b兩個(gè)具有生物學(xué)活性的片段。C3b主要參與補(bǔ)體調(diào)理作用。C3a是一個(gè)分子量約為65-95kDa、帶正電荷的強(qiáng)堿性多肽,它由86個(gè)氨基酸組成,具有趨化和激活白細(xì)胞,促進(jìn)白細(xì)胞脫顆粒、釋放組胺等炎癥介質(zhì)的功能。C3a參與補(bǔ)體系統(tǒng)三個(gè)激活途徑,包括經(jīng)典途徑、旁路途徑和凝集素途徑。C3a、C4a、C5a這三種補(bǔ)體激活時(shí)產(chǎn)生的活性片段統(tǒng)稱為過(guò)敏毒素(anaphylatoxin,AT),它們作為配體能與炎癥細(xì)胞表面相應(yīng)受體結(jié)合,起到啟動(dòng)、調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用。
C3a參與先天性免疫和后天獲得性免疫過(guò)程。在過(guò)敏引起的支氣管炎性反中,C3a活化肥大細(xì)胞和中性粒細(xì)胞,觸發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒反應(yīng)。C3a能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞及其它細(xì)胞對(duì)脂多糖引起的前列腺素、細(xì)胞因子及趨化因子等分泌的增加。此外,C3a能增強(qiáng)Th2型炎性反應(yīng),刺激平滑肌細(xì)胞收縮和白細(xì)胞的趨化性。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中人C3a的濃度,其原理見圖1。人C3a特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的人C3a會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人C3a抗體后,生物素化抗人C3a抗體與人C3a結(jié)合,形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin),由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合,因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人C3a濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè),可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

PJJP010091-1
人C3a抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PJJP010091-2
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)
60ml

PJJP010091-3
人C3a標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

PJJP010091-4
人C3a生物素化抗體
10ml

PJJP010091-5
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

PJJP010091-6
洗滌液(20X)
30ml

PJJP010091-7
TMB溶液
10ml

PJJP010091-8
終止液
5ml

PJJP010091-9
封板膜(透明)
2張

PJJP010091-10
封板膜(白色)
2張


說(shuō)明書
1份

保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng):
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡWC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。