產(chǎn)品編號(hào)
JJJP6
Human IL-36β ELISA Kit
96次
3518
的Human?IL-36β?ELISA?Kit?(Human Interleukin 36β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白細(xì)胞介素36β酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-36β的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為9.6pg/ml，與人IL-36α、IL-36γ，小鼠IL-36β等均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素36β?(Interleukin?36β,IL-36β)，又被稱為IL-1F8和IL-1H2，是IL-1家族中的一員。IL-1家族中還包括IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra/IL-1F5、IL-36α/IL-1F6、IL-37/IL-1F7、IL-36γ/IL-1F9和IL-1F10。人IL-36β具有157個(gè)氨基酸殘基，不具有信號(hào)肽。由于C端70個(gè)氨基酸的不同存在兩種亞型：IL-36β1和IL-36β2。IL-36β1缺少IL-1家族保守的4個(gè)β折疊結(jié)構(gòu)。人IL-36β2與小鼠、犬、牛和馬相應(yīng)的IL-36亞型分別具有62%、67%、63%和59%的同源性。
IL-36β主要表達(dá)在角質(zhì)細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中。當(dāng)發(fā)生炎癥反應(yīng)刺激以及在出現(xiàn)牛皮癬損傷時(shí)，角質(zhì)細(xì)胞和滑液成纖維細(xì)胞所表達(dá)的IL-36β會(huì)出現(xiàn)上調(diào)。IL-36β能夠通過活化樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞增強(qiáng)機(jī)體炎癥應(yīng)答。還能夠促進(jìn)多種細(xì)胞因子、趨化因子和抗菌肽的產(chǎn)生。IL-36β通過與受體復(fù)合物結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)功能，該受體復(fù)合物包含兩部分：IL-1 Rrp2和IL-1 RAcP。IL-36 Ra同樣也能與IL-1 Rrp2結(jié)合，從而發(fā)揮拮抗作用。當(dāng)N端的四個(gè)氨基酸分子被酶切除去后，IL-36β活性會(huì)有所增強(qiáng)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人IL-36β的濃度，其原理見圖1。人IL-36β特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IL-36β會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-36β抗體后，生物素化抗人IL-36β抗體與人IL-36β結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。人IL-36β濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中人IL-36β濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JJJP6-1
人IL-36β抗體預(yù)包被板
8孔×12條
JJJP6-2
樣品分析緩沖液
5ml
JJJP6-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml
JJJP6-4
人IL-36β標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
JJJP6-5
人IL-36β生物素化抗體
10ml
JJJP6-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml
JJJP6-7
洗滌液(20X)
30ml
JJJP6-8
TMB溶液
10ml
JJJP6-9
終止液
5ml
JJJP6-10
封板膜(透明)
2張
JJJP6-11
封板膜(白色)
2張
–
說明書
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。