產(chǎn)品編號(hào)
JJP62
Human IL-37 ELISA Kit
96次
2922
生產(chǎn)的Human IL-37 ELISA Kit (Human IL-37 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白細(xì)胞介素-37酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-37的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明，最小檢出量為30.4pg/ml，與人的IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-38均沒(méi)有交叉反應(yīng)，與小鼠IL-18BP、IL-36α、IL-36γ、IL-38等均沒(méi)有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素(Interleukin)是構(gòu)成免疫信號(hào)通路重要組成部分。白細(xì)胞介素-37 (Interleukin 37, IL-37)，即IL-1家族成員7 (IL-1 family member 7, IL-1F7)，也被稱為FIL-1-zeta、IL-37、IL–1H4、IL-1HL或IL–1RP1，是一種抗炎細(xì)胞因子。IL-37基因在人基因組內(nèi)位于2號(hào)染色體的長(zhǎng)染色體臂上，在小鼠基因組中尚未發(fā)現(xiàn)任何同源基因。IL-37與IL-1家族的其它成員相同，是以前體形式合成的，完全激活需要Caspase 1的切割。Caspase-1切割后的IL-37可以轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，與磷酸化或未磷酸化的Smad3形成復(fù)合物，影響炎癥細(xì)胞因子IL-1β、IFN-γ等的表達(dá)。IL-37不僅具有抗炎作用，而且在抗菌反應(yīng)或抗腫瘤免疫中也發(fā)揮重要作用。
IL-37選擇性剪接產(chǎn)生5種在分子的N末端區(qū)域有缺失的剪接變體IL-37a-e，且所有IL-37變體都缺乏典型的信號(hào)肽。其中，IL-37b是最大和研究最多的一種，它共享分布在IL-1家族內(nèi)的β桶型結(jié)構(gòu)(Beta barrel structure)，分別與成熟的IL-1α、IL-1β和IL1-ra具有大約21%、24%和30%的氨基酸序列同源性。IL-37b在多種組織中均有表達(dá)，如腎、骨髓、皮膚、血液、呼吸系統(tǒng)以及泌尿生殖系統(tǒng)等。在外周血單核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中，炎癥刺激可上調(diào)IL-37b的表達(dá)。此外，人IL-37b對(duì)小鼠有一定的活性。在小鼠體內(nèi)，過(guò)表達(dá)IL-37b可抑制小鼠炎癥反應(yīng)并保護(hù)小鼠免受結(jié)腸炎和LPS誘導(dǎo)的炎癥性休克。
IL-37b與IL-18結(jié)構(gòu)相似，都具有兩個(gè)保守的氨基酸殘基(IL-37b的Glu-35和Lys-124分別對(duì)應(yīng)于IL-18的Glu-42和Lys-89)，因此可以與IL-18受體(IL-18R)相互作用。與IL-18相比，IL-37b對(duì)IL-18Rα的親和力要低得多，可結(jié)合IL-18Rα，但不產(chǎn)生任何激動(dòng)或拮抗IL-18的作用。然而，IL-37b可與IL-18的抑制性結(jié)合蛋白IL-18BP (IL-18 binding protein)結(jié)合，隨后與IL-18Rβ形成復(fù)合物，并通過(guò)它抑制IL-18的活性。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中人IL-37的濃度，其原理見(jiàn)圖1。人IL-37特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IL-37會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-37抗體后，生物素化抗人IL-37抗體與人IL-37結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人IL-37濃度與A450值呈正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖 。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP62-1
人IL-37抗體預(yù)包被板
8孔×12條
JJP62-2
樣品分析緩沖液
5ml
JJP62-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml
JJP62-4
人IL-37標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
JJP62-5
人IL-37生物素化抗體
10ml
JJP62-6
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml
JJP62-7
洗滌液(20X)
30ml
JJP62-8
TMB溶液
10ml
JJP62-9
終止液
5ml
JJP62-10
封板膜(透明)
2張
JJP62-11
封板膜(白色)
2張
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說(shuō)明書(shū)
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。