產(chǎn)品編號
JJP64
Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit
96次
3403
研發(fā)的Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit (Human IL-38/IL-1F10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白細胞介素38酶/IL-1家族成員10聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的IL-38的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為32.2pg/ml，與人的IL-1Ra、IL-36Ra均沒有交叉反應(yīng)，與小鼠IL-38有17.9%交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
白細胞介素(Interleukin)是構(gòu)成免疫信號通路重要組成部分。白細胞介素38 (Interleukin 38, IL-38)，即IL-1家族成員10 (IL-1 family member 10, IL-1F10)，由IL-1F10基因編碼，屬于IL-1家族和IL-36亞家族的成員。IL-38在組織中廣泛表達，如皮膚、脾、胸腺、扁桃體等。成熟的IL-38由152個氨基酸組成，無信號肽和caspase-1切割位點，在先天性和適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。
IL-38的特異性受體是IL-1受體相關(guān)蛋白2 (IL-1 receptor related protein 2, IL-1 RRP2)，即IL-36R。IL-38的基因序列與IL-36受體拮抗劑(IL-1 Receptor antagonist, IL-36Ra)的基因具有43%的同源性，二者具有相似的生物學(xué)功能。IL-38可以以類似于IL-36Ra的形式阻斷IL-36R信號傳導(dǎo)的激活[1]。
IL-38與多種疾病有關(guān)，包括心血管和自身免疫疾病，可以作為抗炎細胞因子在炎癥性疾病中發(fā)揮作用。研究表明，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清中的IL-38濃度高于健康患者。當用重組IL-38治療自發(fā)性SLE的小鼠模型時，小鼠的蛋白尿和皮膚損傷等癥狀顯著較少。同時也發(fā)現(xiàn)這些小鼠血清中IL-17和IL-22的水平也較低， 這說明IL-38可以抑制Th17細胞產(chǎn)生IL-17和IL-22等炎癥介質(zhì)[2,3]。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-38/IL-1F10的濃度，其原理見圖1。人IL-38/IL-1F10特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的人IL-38/IL-1F10會與捕獲抗體結(jié)合。當加入生物素化的抗人IL-38/IL-1F10抗體后，生物素化抗人IL-38/IL-1F10抗體與人IL-38/IL-1F10結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人IL-38/IL-1F10濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中靶蛋白濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖 。
一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP64-1
人IL-38/IL-1F10抗體預(yù)包被板
8孔×12條
JJP64-2
樣品分析緩沖液
5ml
JJP64-3
標準品稀釋液
10ml
JJP64-4
人IL-38/IL-1F10標準品
2-4瓶
JJP64-5
人IL-38/IL-1F10生物素化抗體
10ml
JJP64-6
辣根過氧化物酶標記Streptavidin
10ml
JJP64-7
洗滌液(20X)
30ml
JJP64-8
TMB溶液
10ml
JJP64-9
終止液
5ml
JJP64-10
封板膜(透明)
2張
JJP64-11
封板膜(白色)
2張
—
說明書
1份
保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。