透析袋產(chǎn)品使用方法

透析袋產(chǎn)品使用方法

透析通過(guò)在半透膜兩側(cè),從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)的擴(kuò)散過(guò)程,去除小分子。只有小于膜孔徑的分子可以通過(guò)膜,在全部料液中達(dá)到平衡。一旦達(dá)到平衡后,底物不再有“凈”移動(dòng),因?yàn)榉肿訉⒁韵嗤乃俾?,通過(guò)膜孔,進(jìn)入透析單元或出來(lái)。相反,不能通過(guò)膜孔的大分子,將被截留在其所處的膜的原有一側(cè)。

為去除不需要的底物,需要更換透析緩沖液,以形成新的濃度梯度。更換緩沖液后,顆粒會(huì)繼續(xù)從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)移動(dòng),直到再次達(dá)到平衡。每次更換透析緩沖液,膜內(nèi)部的底物按兩個(gè)部分的體積差,被進(jìn)一步純化。例如,在100mL的透析緩沖液中透析1ml的樣品,平衡時(shí),可透析底物的濃度將被稀釋100倍。每更換100mL新的緩沖液,將使樣品再稀釋100倍。如更換3次100mL的透析緩沖液,且假定每次更換透析緩沖液前,均達(dá)到完全平衡,樣品種底物的稀釋倍數(shù)將為100x100x100,即1,000,000倍。

影響透析速率的因素有很多,包括:1)透析緩沖液體積;2)緩沖液組成;3)緩沖液更換次數(shù);4)透析時(shí)間;5)溫度以及6)顆粒粒徑與膜孔徑的比值。相比僅稍小于膜孔的底物,遠(yuǎn)小于膜孔的底物會(huì)更快地達(dá)到平衡,即需要透過(guò)的分子的分子量與膜孔的截留分子量(MWCO)差別越大,透析速率越快。

從透析的影響因素可見(jiàn),特定樣品所需的透析時(shí)間很難預(yù)測(cè)。為徹底更換緩沖鹽,一般實(shí)驗(yàn)時(shí),多使用樣品體積200-500倍的透析緩沖液,在室溫條件下透析6-8h,并至少更換3次透析緩沖液。最后一次更換后,再4℃透析一日。這種方法也適合用于去除生物素標(biāo)記或交聯(lián)實(shí)驗(yàn)中過(guò)量的標(biāo)記試劑和反應(yīng)副產(chǎn)物。

此外,由于在透析過(guò)程中,分子是雙向透過(guò)半透膜的,且每種底物達(dá)到其自身平衡的過(guò)程與其它底物無(wú)關(guān),所以,較易發(fā)生樣品稀釋。如果某一底物的濃度在膜外側(cè)較高,且粒徑足夠小,可以自由通過(guò)膜孔,其會(huì)有從透析緩沖液進(jìn)入膜內(nèi)部樣品的“凈”移動(dòng)。

而水是非常小的分子,可以通過(guò)幾乎所有規(guī)格透析膜的膜孔。當(dāng)以較稀釋的緩沖液透析高溶質(zhì)濃度的樣品時(shí),會(huì)有通過(guò)膜進(jìn)入透析膜的水的“凈”移動(dòng)。當(dāng)樣品中含有甘油和某些糖時(shí),因其具有較強(qiáng)的吸濕性,擴(kuò)散通過(guò)膜達(dá)到平衡后,會(huì)顯著影響水的滲透性,導(dǎo)致樣品體積變化。

為降低水的移動(dòng)及其所導(dǎo)致的樣品體積的變化,透析時(shí)可使用“步進(jìn)式”方法,即需要使用低溶質(zhì)濃度緩沖液透析高溶質(zhì)濃度的樣品時(shí),可先用稍高濃度的透析緩沖液進(jìn)行透析,之后每次更換緩沖液時(shí),再逐步降低緩沖液濃度,并最終達(dá)到所需的緩沖液濃度,從而降低在透析過(guò)程每個(gè)階段,樣品和透析緩沖液的水“濃度”的影響。

四、透析袋應(yīng)用:
樣品溶液的緩沖液置換和PH值的調(diào)節(jié)
去除鹽類(lèi),表面活性劑和溶劑
DNA電洗脫
濃縮蛋白質(zhì),多肽和抗體
小分子污染物清除
電泳前稀釋蛋白的制備
組織培養(yǎng)的提取純化
結(jié)合研究
透析袋的區(qū)別:
纖維素透析袋 再生纖維素透析袋 普通型透析袋
分子量 100-500.500-1000?5k?10k,20k,50k,100k,300k 1k,2k.3.5k,8k,10k,25k,50k 3.5k,7k,8-14k
化學(xué)兼容性 適用于:甲醇,乙醇和異
不適用于:強(qiáng)極性溶劑(如丙酮,甲乙酮,二惡烷)
適用于:烴,鹵代烴,醇酮,酯,氧化物,含氮溶劑。不適用于鹽酸(濃度>25%),硝酸(濃度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氫氧化鈉和10%苯酚水溶液 與很多鹽兼容,比
如CaCl2、(NH4)2SO4,還可以有分子生物學(xué)和酶學(xué)常用的水溶液和有機(jī)溶液兼容,如異丙醇、乙醇、丙酮。
有機(jī)抗性 中等
污染物水平 不含重金屬和硫化物 不含重金屬和硫化物 破化物<0.3%,重金屬<50ppm
包裝 溫型,0.05%疊氮化鈉 溫型,0.05%疊氮化鈉 干型
扁平寬度 10,16,24,31mm 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm 25,34,44,77mm
PH范圍 2-9 2-12 5-9
溫度限度 37℃ 60℃ 可煮沸,可高壓滅菌
化學(xué)兼容性 無(wú)需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 無(wú)需預(yù)處理,只需用蒸餾水清洗即可使用 在沸水或1mmol/l EDTA(pH?8.0)中將透析袋煮沸10分鐘

五、透析袋的選擇:

正確選擇合適的戴留分子量
線留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分端,分一的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25。選擇做留分子量的經(jīng)驗(yàn)法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
選擇截留分子量值約為要保
留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留家。
正確選擇扁平寬度

進(jìn)析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管園擴(kuò)數(shù)距滴較長(zhǎng)較慢。為易于使用,建議使用總長(zhǎng)(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的進(jìn)析袋。

透析袋的化學(xué)相容性
化學(xué)相容性主要用作使用指導(dǎo),不作為化學(xué)相容的保證。溫度,濃度,長(zhǎng)時(shí)間哪光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用。建議您自設(shè)條件進(jìn)行測(cè)試。

透析袋分類(lèi):

兩種材質(zhì)的透析膜——纖維素酯和再生纖維素,同時(shí)提供兩種不同處理規(guī)模,標(biāo)準(zhǔn)級(jí)和生物技術(shù)級(jí),后者更適于對(duì)純度較為敏感的生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如涉及親和研究和核酸的實(shí)驗(yàn)。此外,仕必純提供預(yù)組裝的即用型透析裝置,用于小量樣品的透析處理,這種裝置操作簡(jiǎn)便,且可保證較高的樣品收率,可用于HPLC樣品制備、載體藥物的體外溶出等實(shí)驗(yàn)。

高精度、即用型透析袋(生物級(jí),使用前無(wú)需處理,去除了硫化物和重金屬離子,含0.05%疊氮鈉防腐液)

生物讀術(shù)進(jìn)析較的制通過(guò)程或有重金屬污染及破化物,無(wú)需預(yù)處理,只需用去離子水清洗而可使用,滿(mǎn)足對(duì)不同實(shí)驗(yàn)室透析量求,有兩種不同生物技術(shù)等級(jí)通析袋:
纖維素透析袋和再生纖維素透析鏡。
優(yōu)點(diǎn):
韌性膜材料,不易破損
雜質(zhì)含量極少,可無(wú)需預(yù)處理,只需用去高子水清洗即可使用?的
孔徑標(biāo)準(zhǔn)均一
對(duì)溶質(zhì)的吸附性小
可選分子量范圍廣100-300000
多種扁平寬度可選
特有生物技術(shù)膜,不含硫化物及金屬雜質(zhì)
二、普通干型透析袋(美國(guó)聯(lián)合碳化,甘油涂層,使用前需處理)
技術(shù)參數(shù):
△.PH穩(wěn)定范圍5-9
△污染物水平·硫化物<0.3%,重金屬<50ppm
△化學(xué)兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2.NHH4)2SO4;還可與分子生物學(xué)及酶學(xué)中常用的水落劑、有機(jī)溶劑兼容,比如異丙醇、乙醇和丙酮。
△蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1?ng
透析袋儲(chǔ)存條件:
透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。

 

使用前處理:(試驗(yàn)要求不高的可以使用簡(jiǎn)易處理方法:在沸水中煮沸10分鐘左右即可使用)

1. 把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段。

2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

5. 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。

6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿(mǎn)水然后排出,將之清洗干凈。

貨號(hào) 品名 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 截留分子量 產(chǎn)地品牌
131060 透析袋31-100D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 100D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
131096 透析袋31-500D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 500D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132636 透析袋18-1000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 1000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132640 透析袋45-1000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 1000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
1-0150-45 透析袋45-1000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 1000D 美國(guó)MFPI
132620 透析袋18-2000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 2000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132633 透析袋45-2000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 2000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132590 透析袋18-3500D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 3500D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132592 透析袋45-3500D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 3500D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
1-0550-18 透析袋18-5000D RC膜,寬度18mm,直徑11.5mm 5000D 美國(guó)MFPI
1-0550-30 透析袋30-5000D RC膜,寬度30mm,直徑19.1mm 5000D 美國(guó)MFPI
1-0550-40 透析袋40-5000D RC膜,寬度40mm,直徑25.5mm 5000D 美國(guó)MFPI
132579 透析袋12-8000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 8000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132586 透析袋50-8000D RC膜,寬度50mm,直徑32mm 8000D 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132570 透析袋12-10000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 10KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132576 透析袋45-10000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 10KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132560 透析袋12-15000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 15KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132566 透析袋45-15000D RC膜,寬度45mm,直徑29mm 15KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
131348 透析袋31-20000D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 20KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132550 透析袋12-25000D RC膜,寬度12mm,直徑7.5mm 25KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132554 透析袋34-25000D RC膜,寬度34mm,直徑22mm 25KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
132544 透析袋34-50000D RC膜,寬度34mm,直徑22mm 50KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
131420 透析袋31-100000D CE膜,寬度31mm,直徑20mm 100KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
131450 透析袋16-300000D CE膜,寬度16mm,直徑10mm 300KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
131486 透析袋16-1000000D CE膜,寬度16mm,直徑10mm 1000KD 美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)
六、透析袋的使用:
下述透析程序是一個(gè)普遍的基礎(chǔ)透析過(guò)程。在開(kāi)始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù)。透析樣品溶劑、膜的化學(xué)相容性、
順的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會(huì)影響透析速率,因此,一些應(yīng)用中下述透析過(guò)程可能需要適
當(dāng)?shù)淖兓?br /> 1.把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品)。
2.裁剪適當(dāng)長(zhǎng)度的透析管。預(yù)留一段額外長(zhǎng)度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間
3.把透析管插入打開(kāi)的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。
4.由透析管開(kāi)口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長(zhǎng)度,夾緊透析夾。
5.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6.透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過(guò)夜透析。在持續(xù)透析的過(guò)程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時(shí),6-8小時(shí)和10-14小時(shí)(第2天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時(shí)的透析。
注:對(duì)于高濃度污染物,樣品可能需要較長(zhǎng)的時(shí)間透析,透析液需要更頻繁的更換。
7.透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類(lèi)型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達(dá)60℃。

 

七、透析袋的貯存和保質(zhì)期:
在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存情條件下,保質(zhì)期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲(chǔ)存在聚乙烯袋中。未開(kāi)封的透析袋4℃儲(chǔ)存。一旦變濕,透析袋應(yīng)浸泡在下列之一的溶液中:005%疊氮化鈉,1%的苯甲酸鈉或1%%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會(huì)造成孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌)。