BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)

產(chǎn)品編號(hào)

JP2056-200μl
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
200μl

186

JP2056-1ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
1ml

688

JP2056-5ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
5ml

2598

的BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠),也稱(chēng)Concanavalin A磁珠、ConA磁珠、刀豆凝集素A磁珠、刀豆凝集素磁珠、伴刀豆球蛋白A磁珠或伴刀豆球蛋白磁珠,由高質(zhì)量的刀豆素A (Concanavalin A, ConA)與超順磁性納米級(jí)磁珠共價(jià)偶聯(lián)而成,能夠快速、高效、靈敏、特異性地與糖蛋白、糖脂、多糖等帶有糖基化修飾分子結(jié)合,主要用于分離細(xì)胞或用于分離細(xì)胞或組織裂解液或血清中的糖蛋白等糖基化修飾分子等實(shí)驗(yàn),特別可以用于染色質(zhì)的核酸酶靶向切割和釋放(CUT&RUN)。
Concanavalin A,簡(jiǎn)稱(chēng)ConA或Con A,中文名為刀豆素A,又叫伴刀豆球蛋白A、刀豆蛋白A或刀豆凝集素A,是一種從Jack beans (Canavalia ensiformis)分離的甘露糖/葡萄糖結(jié)合凝集素(Lectin),是使用最廣泛的凝集素之一,CAS號(hào)為11028-71-0,其單體的分子量約為25.5kDa,可結(jié)合一個(gè)Ca2+和一個(gè)Mn2+,含一個(gè)糖基結(jié)合部位,對(duì)末端α-D-甘露糖基和α-D-葡糖基殘基具有高親和力。刀豆素A是一種T細(xì)胞有絲分裂原,可以激活免疫系統(tǒng),募集淋巴細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞因子的產(chǎn)生。除了促有絲分裂活性外,刀豆素A還可以通過(guò)特定分子機(jī)制誘導(dǎo)程序性細(xì)胞死亡。據(jù)報(bào)道刀豆素A還可以激活NFAT(Nuclear factor of activated T cells),而NFAT是轉(zhuǎn)錄因子家族,在免疫系統(tǒng)的發(fā)育和發(fā)揮免疫功能中起重要作用。當(dāng)pH在5.8-7.0之間時(shí),刀豆素A以四聚體形式存在,在pH6.5或更低的條件下解離為二聚體,pH高于7.0時(shí)可形成更大的聚合體 [1]。
ConA磁珠在免疫學(xué)、生物化學(xué)及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)應(yīng)用廣泛,如分離細(xì)胞,分離細(xì)胞或組織裂解液或血清中的糖蛋白等糖基化分子,包括在用于染色質(zhì)分析的新技術(shù)CUT&RUN (Cleavage Under Targets & Release Using Nuclease)等中,ConA磁珠起到了非常關(guān)鍵的作用。使用ConA磁珠分離或固定細(xì)胞非常便捷,并在后續(xù)清洗過(guò)程中最大程度減少細(xì)胞丟失,同時(shí)ConA磁珠也可以用于收集和固定細(xì)胞核[2-4]。ConA磁珠用于純化糖蛋白的實(shí)驗(yàn)流程參考圖1,分離或固定細(xì)胞或細(xì)胞核等的流程相似。

圖1.BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)用于純化糖蛋白的實(shí)驗(yàn)流程圖。
本產(chǎn)品結(jié)合特異性強(qiáng)。本產(chǎn)品對(duì)糖類(lèi)具有高度專(zhuān)一的識(shí)別能力,可以特異性結(jié)合糖類(lèi),可分離細(xì)胞、細(xì)胞核或糖蛋白等含有適當(dāng)糖基化修飾的分子,可以直接用于CUT&RUN等實(shí)驗(yàn),獲得的糖基化蛋白可以用于Western、質(zhì)譜等的分析檢測(cè)。
本產(chǎn)品結(jié)合量高。與同類(lèi)產(chǎn)品相比,本產(chǎn)品對(duì)糖類(lèi)蛋白的結(jié)合量高,而且磁珠粒徑小,不易產(chǎn)生非特異吸附。本產(chǎn)品每毫升磁珠懸濁液含有≥1mg ConA,每個(gè)ConA蛋白具有4個(gè)糖基結(jié)合部位,每毫升磁珠懸濁液可結(jié)合≥1mg糖蛋白,可高效地進(jìn)行細(xì)胞或糖蛋白等的分離純化等實(shí)驗(yàn)。
本產(chǎn)品結(jié)合糖蛋白速度快,吸附時(shí)間短,可以高效結(jié)合糖基。本產(chǎn)品所使用的納米級(jí)磁珠(~200nm)具有超大比表面積,有效縮短了ConA與糖類(lèi)結(jié)合所需的時(shí)間??s短操作時(shí)間可以避免在長(zhǎng)時(shí)間操作過(guò)程中糖蛋白的降解,有效保證了糖蛋白的活性及完整性。使用本磁珠和國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品Competitor C公司磁珠分離細(xì)胞的效果參考圖2。

圖2.BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)分離細(xì)胞的效果圖。使用本產(chǎn)品(BeyoMag? ConA Magnetic Beads)與國(guó)外C公司同類(lèi)產(chǎn)品(Competitor C)分別用于分離L929 (小鼠上皮成纖維細(xì)胞)和NRK (大鼠腎細(xì)胞) (C7827),然后培養(yǎng)2小時(shí)后拍照。實(shí)際結(jié)果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞狀態(tài)等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本產(chǎn)品使用便捷。本產(chǎn)品儲(chǔ)存在特殊保護(hù)液中,不含甘油,磁性分離,無(wú)需離心。本產(chǎn)品不僅適用于少量樣本的檢測(cè),也適用于高通量篩選(High-throughput screening)的自動(dòng)化操作系統(tǒng),不同操作方法之間一致性高。
本產(chǎn)品的主要指標(biāo)如下表:

Characteristics
Description

Product content
10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer

Beads size
~200nm

Magnetization
Superparamagnetic

Coupled protein
Concanavalin A

M.W. of protein
~102kDa (tetramer)

Protein?concentration
≥1mg?Concanavalin A?per ml beads

Binding capacity
≥1mg?glycan/glycoproteins?per ml beads

Specificity
Glycan and glycoconjugates

Application
Isolating?cells or?glycoproteins, CUT&RUN

如果每個(gè)樣品使用10μl磁珠,每毫升本產(chǎn)品可以用于100個(gè)樣品。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
包裝

JP2056-200μl
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
200μl

JP2056-1ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
1ml

JP2056-5ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
5ml


說(shuō)明書(shū)
1份

保存條件:
4℃保存,兩年有效。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品需維持pH為6-8,避免高速離心、干燥或凍存;請(qǐng)勿長(zhǎng)時(shí)間將磁珠置于磁場(chǎng)中,否則可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán)。
本產(chǎn)品使用前要適當(dāng)充分重懸,即顛倒若干次使磁珠混合均勻,混勻操作須輕柔,不宜劇烈渦旋震蕩等,避免ConA變性等。
在用于沉淀或純化時(shí),建議設(shè)置適當(dāng)?shù)年?yáng)性和陰性對(duì)照組。
待結(jié)合分子的類(lèi)型、大小等都會(huì)影響結(jié)合效率,建議通過(guò)稀釋法來(lái)確定每種具體應(yīng)用的磁珠用量,同時(shí)可以考慮加大磁珠用量至待結(jié)合分子2-3倍摩爾數(shù)量以確保結(jié)合充分。
ConA需要Ca2+和Mn2+離子存在才能有活性,所以實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)避免使用含有EDTA或其它金屬離子螯合劑的試劑。
糖蛋白樣品收集后宜盡快完成純化工作,并應(yīng)始終放置在4℃或冰浴,以減緩糖蛋白降解。為有效抑制蛋白降解,可以在蛋白樣品中添加適量的蛋白酶抑制劑混合物,例如的JP1005/JP1006 蛋白酶抑制劑混合物(通用型)、JP1048/JP1049 蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型, 質(zhì)譜兼容, 50X)、JP1010/JP1011 蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動(dòng)物樣品抽提用, 100X)、JP1050/JP1051 蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(哺乳動(dòng)物樣品抽提用, 50X)等,但各個(gè)蛋白酶抑制劑混合物中的EDTA不能添加。
如果使用真空泵等儀器吸取上清液,須注意真空泵的吸液強(qiáng)度,以免吸力過(guò)大而吸取到磁珠。
與細(xì)胞孵育時(shí)ConA磁珠可能會(huì)發(fā)生聚集,屬于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。