BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)

產(chǎn)品編號

JP2056-200μl
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
200μl

186

JP2056-1ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
1ml

688

JP2056-5ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
5ml

2598

的BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠),也稱Concanavalin A磁珠、ConA磁珠、刀豆凝集素A磁珠、刀豆凝集素磁珠、伴刀豆球蛋白A磁珠或伴刀豆球蛋白磁珠,由高質(zhì)量的刀豆素A (Concanavalin A, ConA)與超順磁性納米級磁珠共價偶聯(lián)而成,能夠快速、高效、靈敏、特異性地與糖蛋白、糖脂、多糖等帶有糖基化修飾分子結(jié)合,主要用于分離細胞或用于分離細胞或組織裂解液或血清中的糖蛋白等糖基化修飾分子等實驗,特別可以用于染色質(zhì)的核酸酶靶向切割和釋放(CUT&RUN)。
Concanavalin A,簡稱ConA或Con A,中文名為刀豆素A,又叫伴刀豆球蛋白A、刀豆蛋白A或刀豆凝集素A,是一種從Jack beans (Canavalia ensiformis)分離的甘露糖/葡萄糖結(jié)合凝集素(Lectin),是使用最廣泛的凝集素之一,CAS號為11028-71-0,其單體的分子量約為25.5kDa,可結(jié)合一個Ca2+和一個Mn2+,含一個糖基結(jié)合部位,對末端α-D-甘露糖基和α-D-葡糖基殘基具有高親和力。刀豆素A是一種T細胞有絲分裂原,可以激活免疫系統(tǒng),募集淋巴細胞并誘導(dǎo)細胞因子的產(chǎn)生。除了促有絲分裂活性外,刀豆素A還可以通過特定分子機制誘導(dǎo)程序性細胞死亡。據(jù)報道刀豆素A還可以激活NFAT(Nuclear factor of activated T cells),而NFAT是轉(zhuǎn)錄因子家族,在免疫系統(tǒng)的發(fā)育和發(fā)揮免疫功能中起重要作用。當(dāng)pH在5.8-7.0之間時,刀豆素A以四聚體形式存在,在pH6.5或更低的條件下解離為二聚體,pH高于7.0時可形成更大的聚合體 [1]。
ConA磁珠在免疫學(xué)、生物化學(xué)及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)應(yīng)用廣泛,如分離細胞,分離細胞或組織裂解液或血清中的糖蛋白等糖基化分子,包括在用于染色質(zhì)分析的新技術(shù)CUT&RUN (Cleavage Under Targets & Release Using Nuclease)等中,ConA磁珠起到了非常關(guān)鍵的作用。使用ConA磁珠分離或固定細胞非常便捷,并在后續(xù)清洗過程中最大程度減少細胞丟失,同時ConA磁珠也可以用于收集和固定細胞核[2-4]。ConA磁珠用于純化糖蛋白的實驗流程參考圖1,分離或固定細胞或細胞核等的流程相似。

圖1.BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)用于純化糖蛋白的實驗流程圖。
本產(chǎn)品結(jié)合特異性強。本產(chǎn)品對糖類具有高度專一的識別能力,可以特異性結(jié)合糖類,可分離細胞、細胞核或糖蛋白等含有適當(dāng)糖基化修飾的分子,可以直接用于CUT&RUN等實驗,獲得的糖基化蛋白可以用于Western、質(zhì)譜等的分析檢測。
本產(chǎn)品結(jié)合量高。與同類產(chǎn)品相比,本產(chǎn)品對糖類蛋白的結(jié)合量高,而且磁珠粒徑小,不易產(chǎn)生非特異吸附。本產(chǎn)品每毫升磁珠懸濁液含有≥1mg ConA,每個ConA蛋白具有4個糖基結(jié)合部位,每毫升磁珠懸濁液可結(jié)合≥1mg糖蛋白,可高效地進行細胞或糖蛋白等的分離純化等實驗。
本產(chǎn)品結(jié)合糖蛋白速度快,吸附時間短,可以高效結(jié)合糖基。本產(chǎn)品所使用的納米級磁珠(~200nm)具有超大比表面積,有效縮短了ConA與糖類結(jié)合所需的時間??s短操作時間可以避免在長時間操作過程中糖蛋白的降解,有效保證了糖蛋白的活性及完整性。使用本磁珠和國外同類產(chǎn)品Competitor C公司磁珠分離細胞的效果參考圖2。

圖2.BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)分離細胞的效果圖。使用本產(chǎn)品(BeyoMag? ConA Magnetic Beads)與國外C公司同類產(chǎn)品(Competitor C)分別用于分離L929 (小鼠上皮成纖維細胞)和NRK (大鼠腎細胞) (C7827),然后培養(yǎng)2小時后拍照。實際結(jié)果會因?qū)嶒灄l件、細胞類型、細胞狀態(tài)等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
本產(chǎn)品使用便捷。本產(chǎn)品儲存在特殊保護液中,不含甘油,磁性分離,無需離心。本產(chǎn)品不僅適用于少量樣本的檢測,也適用于高通量篩選(High-throughput screening)的自動化操作系統(tǒng),不同操作方法之間一致性高。
本產(chǎn)品的主要指標(biāo)如下表:

Characteristics
Description

Product content
10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer

Beads size
~200nm

Magnetization
Superparamagnetic

Coupled protein
Concanavalin A

M.W. of protein
~102kDa (tetramer)

Protein?concentration
≥1mg?Concanavalin A?per ml beads

Binding capacity
≥1mg?glycan/glycoproteins?per ml beads

Specificity
Glycan and glycoconjugates

Application
Isolating?cells or?glycoproteins, CUT&RUN

如果每個樣品使用10μl磁珠,每毫升本產(chǎn)品可以用于100個樣品。
包裝清單:

產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝

JP2056-200μl
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
200μl

JP2056-1ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
1ml

JP2056-5ml
BeyoMag? Concanavalin A Magnetic Beads (刀豆素A磁珠)
5ml


說明書
1份

保存條件:
4℃保存,兩年有效。
注意事項:
本產(chǎn)品需維持pH為6-8,避免高速離心、干燥或凍存;請勿長時間將磁珠置于磁場中,否則可能會引起磁珠聚團。
本產(chǎn)品使用前要適當(dāng)充分重懸,即顛倒若干次使磁珠混合均勻,混勻操作須輕柔,不宜劇烈渦旋震蕩等,避免ConA變性等。
在用于沉淀或純化時,建議設(shè)置適當(dāng)?shù)年栃院完幮詫φ战M。
待結(jié)合分子的類型、大小等都會影響結(jié)合效率,建議通過稀釋法來確定每種具體應(yīng)用的磁珠用量,同時可以考慮加大磁珠用量至待結(jié)合分子2-3倍摩爾數(shù)量以確保結(jié)合充分。
ConA需要Ca2+和Mn2+離子存在才能有活性,所以實驗過程中應(yīng)避免使用含有EDTA或其它金屬離子螯合劑的試劑。
糖蛋白樣品收集后宜盡快完成純化工作,并應(yīng)始終放置在4℃或冰浴,以減緩糖蛋白降解。為有效抑制蛋白降解,可以在蛋白樣品中添加適量的蛋白酶抑制劑混合物,例如的JP1005/JP1006 蛋白酶抑制劑混合物(通用型)、JP1048/JP1049 蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型, 質(zhì)譜兼容, 50X)、JP1010/JP1011 蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 100X)、JP1050/JP1051 蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 50X)等,但各個蛋白酶抑制劑混合物中的EDTA不能添加。
如果使用真空泵等儀器吸取上清液,須注意真空泵的吸液強度,以免吸力過大而吸取到磁珠。
與細胞孵育時ConA磁珠可能會發(fā)生聚集,屬于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。