混合模式填料, Cellufine™ MAX IB 專門用于蛋白A步驟后的單克隆抗體（Mab）的純化。這款填料是通過在繊維素基球表面的耐鹽多胺基団上部分的修飾了丁基。這種配體設(shè)計理念可以靈活地將Cellufine MAX IB應(yīng)用于生物制藥純化的廣泛領(lǐng)域。
Cellufine™MAX IB應(yīng)用
Cellufine MAX IB可用作Mab陰離子（流穿）純化模式。 將Cellufine MAX IB裝入5mmID×13.5cmL（2.65mL）層析柱中，用20mM Tris-HCL pH7.0的緩沖液平衡，流速為1.325mL / min（407cm / h）。 在通過rProtein A柱初始捕獲后，將得到的60mM乙酸pH 3.5的洗脫樣品在pH 3.4下保持60分鐘進(jìn)行病毒滅活。在該步驟之后，將樣品（18.0mg / mL Mab）用Tris調(diào)節(jié)pH至pH7.0，用NaCl調(diào)電導(dǎo)率為6mS /cm或用上樣緩沖液稀釋調(diào)節(jié)。 在經(jīng)過0.22μM過濾后，將澄清樣品以150mg Mab / mL介質(zhì)加載到MAX IB層析柱上，收集流穿+洗滌部分。 CHO-HCP、dsDNA（HCD）、浸出的rProtein A和聚集體的去除效果顯示在下表1中。 以下為Cellufine MAX IB，MAX Q-h和聚合物改性瓊脂糖Q競爭性介質(zhì)，采用流穿純化模式。
| Elution Buffer from ProA | HCP (ng/mg mAb) | Leak ProA (ng/mg_mAb) | Aggregate(%) | HCD (pg/mg mAb) | Recovery(%) | |
| Loading solution (After virus inactivation) | 60 MM Acetate Buffer(pH 3.5) | 72 | 3 | 1.7 | 10 | 100 |
| Cellufine MAX Q-h | 22 | 2.1 | 1.9 | < 10 | 97 | |
| Polymer modified Agarose Q | 27 | 2.1 | 1.8 | 96 | ||
| Cellufine MAX IB | 3 | 0 | 1 | 95 |
纖維素作為具有化學(xué)和物理穩(wěn)定性的天然產(chǎn)物是眾所周知的，由于Cellufine來自纖維素，因而它對化學(xué)品的腐蝕性和酸性溶液也具有良好的穩(wěn)定性。 所有Cellufine填料可以用0.5M NaOH溶液進(jìn)行CIP清洗。使用過的填料清洗后放置在2-25℃的20％乙醇中保存。