產(chǎn)品編號
PF322
Human FSL-1 ELISA Kit
96次
3198
的Human FSL-1 ELISA Kit (Human Follistatin-like 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人卵泡抑制素樣蛋白1酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的FSL-1的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為0.31ng/ml，與人Agrin、
Follistatin?(315)、FSTL4、FSTL5等均沒有交叉反應(yīng)，與小鼠的FSL-1有11.7%的交叉反應(yīng)性，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
卵泡抑制素樣蛋白(follistatin-like?1,?FSL-1或FLTL-1)，又被稱為FRP?(follistatin-related?protein)、Flik?(follistatin-like)或
TSC-36?(TGF-beta1-stimulated?clone?36)，是一種分子量在45-55kDa之間的分泌型糖蛋白，屬于BM-40/SPARC/Osteonectin家族。人FSL-1的cDNA編碼產(chǎn)生308個(gè)氨基酸的前體蛋白，其中包括20個(gè)氨基酸的信號肽。成熟的人FSL-1與小鼠、大鼠、牛和馬的FSL-1分別具有94%、95%、98%和99%的氨基酸同源性。體外，F(xiàn)SL-1能夠直接與BMP-4相互作用，在體內(nèi)，F(xiàn)SL-1參與調(diào)節(jié)正常肺發(fā)育過程中BMP-4的信號傳遞。FSL-1是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎常見的自身抗原。FSL-1能夠通過促進(jìn)炎性細(xì)胞因子分泌誘導(dǎo)炎癥產(chǎn)生，或者通過抑制基質(zhì)金屬蛋白酶和前列腺素表達(dá)阻止自身免疫性關(guān)節(jié)炎發(fā)生。在肌肉和心臟組織中，F(xiàn)SL-1能夠保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能，通過誘導(dǎo)蛋白激酶AKT1的表達(dá)和激活促進(jìn)局部缺血后的血管再生。FSL-1具有一定的腫瘤抑制作用，在多種腫瘤中FSL-1的表達(dá)都會出現(xiàn)下調(diào)，在體外，F(xiàn)SL-1能夠增加FAS依賴性腫瘤細(xì)胞的凋亡。
??????本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中人FSL-1的濃度，其原理見圖1。人FSL-1特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人FSL-1會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人FSL-1抗體后，生物素化抗人FSL-1抗體與人FSL-1結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。人FSL-1濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中人FSL-1濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
PF322-1
人FSL-1抗體預(yù)包被板
8孔×12條
PF322-2
樣品分析緩沖液
5ml
PF322-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml
PF322-4
人FSL-1標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
PF322-5
人FSL-1生物素化抗體
10ml
PF322-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml
PF322-7
洗滌液(20X)
30ml
PF322-8
TMB溶液
10ml
PF322-9
終止液
5ml
PF322-10
封板膜(透明)
2張
PF322-11
封板膜(白色)
2張
–
說明書
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組份4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測時(shí)，請獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。