產(chǎn)品編號
PI489
Mouse IgM ELISA Kit
96次
3198
的Mouse IgM ELISA Kit (Mouse IgM Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠總免疫球蛋白M酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IgM的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為0.32ng/ml，本試劑盒采用特異性抗體識別小鼠IgM，與IgG、IgA沒有交叉反應(yīng)性，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
免疫球蛋白M (IgM)是成熟胎兒合成的第一類免疫球蛋白，也是在感染或面以后最早產(chǎn)生的免疫球蛋白，是5類免疫球蛋白中細(xì)胞毒活性和細(xì)胞溶解活性最強(qiáng)的。IgM為五聚體，分子結(jié)構(gòu)呈環(huán)形，含一個J鏈，各單位通過μ鏈倒數(shù)第二位的二硫鍵與J鏈互相連接。IgM可以結(jié)合補(bǔ)體成分C1并激活經(jīng)典途徑，誘導(dǎo)抗原的調(diào)理作用和細(xì)胞溶解，當(dāng)IgM分子和大顆?？乖磻?yīng)時，5個單位協(xié)同作用，效應(yīng)明顯增大。IgM凝集抗原能力大于IgG，激活補(bǔ)體能力超過IgG 1000倍。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測 樣品中小鼠IgM的濃度，其原理見圖1。小鼠IgM特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時，其中的小鼠IgM會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入辣根過氧化物酶標(biāo)記小鼠IgM抗體后，辣根過氧化物酶標(biāo)記小鼠IgM抗體與小鼠IgM結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。小鼠IgM濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
PI489-1
小鼠IgM抗體預(yù)包被板
8孔×12條
PI489-2
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(20X)
60ml
PI489-3
小鼠IgM標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
PI489-4
辣根過氧化物酶標(biāo)記小鼠IgM抗體
10ml
PI489-5
洗滌液(20X)
30ml
PI489-6
TMB溶液
10ml
PI489-7
終止液
5ml
PI489-8
封板膜(透明)
2張
PI489-9
封板膜(白色)
2張
—
說明書
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨(dú)立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。