JP07033-1μg
pCMV-HA-JP5
1μg

JP07033-100μg
pCMV-HA-JP5
100μg

pCMV-HA-JP5是自行研發(fā)生產(chǎn)的在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)HA標(biāo)簽的人源JP5(1-393aa)融合蛋白的質(zhì)粒，可以方便使用抗HA標(biāo)簽的抗體來(lái)識(shí)別JP5蛋白的表達(dá)，或進(jìn)行免疫共沉淀(Co-IP)分析等。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)；帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性，可利用其氨芐青霉素抗性轉(zhuǎn)化大腸桿菌后篩選陽(yáng)性菌，而在轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞后，可使用G418 (JJP010081/JJP010081)篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。G418和新霉素效果一致，但G418的細(xì)胞毒性更低。
JP5中文名為細(xì)胞腫瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5)，是調(diào)控細(xì)胞周期的重要轉(zhuǎn)錄因子，主要功能包括調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、維持基因組穩(wěn)定性和抑制腫瘤血管生成等，野生型的JP5是一個(gè)重要的抑癌基因，在抑制癌癥發(fā)生過(guò)程中扮演重要的角色，因此被稱為“基因組的守護(hù)者”。JP5全長(zhǎng)393氨基酸，理論分子量為43.7kDa，1979年因其在SDS-PAGE凝膠電泳中展示的分子量約為53kDa而得名JP5，這種分子量的差異源自于JP5存在大量的脯氨酸殘基，減緩了其在SDS-PAGE凝膠電泳中的遷移速度[1-2]。
pCMV-HA-JP5質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide
Position

CMV promoter
235-818

HA tag
904-930

human JP5
943-2121

bGH poly(A) signal
2226-2450

f1 ori
2496-2924

SV40 promoter
2938-3268

Neomycin resistance gene
3335-4129

SV40 poly(A) signal
4303-4424

ori
4875-5463

Ampicillin resistance gene
5634-6494

pCMV-HA-JP5中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)包括：

AarI
AbsI
AccIII
Acc65I
AcvI
AflII
AgeI

AleI
Aor13HI
AscI
AsiGI
AsiSI
AsJJP7I
AsuNHI

BaeI
BanIII
BarI
BbrPI
BfrI
BlpI
BmtI

Bpu1102I
Bsa29I
BseAI
BseCI
BshVI
BshTI
BsiWI

BsmBI
Bsp13I
Bsp1407I
Bsp1720I
BspDI
BspEI
BspOI

BspTI
BspXI
BsrGI
BJP908I
BstAFI
BstAUI
BstEII

BstENI
BstHPI
BstPI
Bsu15I
BsuTUI
CelII
Cfr42I

ClaI
CspAI
Eco72I
Eco91I
EcoNI
EcoO65I
Esp3I

FseI
FspAI
HpaI
I-CeuI
I-PpoI
I-SceI
KflI

KpnI
Kpn2I
KspI
KspAI
MauBI
MreI
MroI

MspCI
MssI
NheI
OliI
PacI
PalAI
Pfl23II

PI-PspI
PI-SceI
PinAI
PmaCI
PmeI
PmlI
PpuMI

Psp5II
PspCI
PspEI
PspLI
PspPPI
PsrI
RgaI

RigI
SacII
SanDI
SbfI
SdaI
SfaAI
SfiI

Sfr303I
SgfI
SgrBI
SgsI
SmiI
SrfI
Sse8387I

SspBI
SstII
SwaI
Vha464I
XagI

pCMV-HA-JP5中的單酶切位點(diǎn)包括：

AhdI
ApaI
AvrII
BamHI
BbvCI
BglII
BmgBI

BssHII
BstBI
BstXI
BstZ17I
Bsu36I
DraIII
EcoRI

EcoRV
HindIII
KasI
MfeI
MluI
NarI
NdeI

NotI
NruI
PaeR7I
PasI
PflFI
PfoI
PluTI

PshAI
PspOMI
PspXI
PvuI
RsrII
ScaI
SexAI

SfoI
SgrAI
SgrDI
SmaI
SnaBI
SpeI
TspMI

Tth111I
XbaI
XhoI
XmaI

pCMV-HA-JP5質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
T7-F primer (863-882): 5′-TAATACGACTCACTATAGGG-3′
SP6-R primer (2181-2200): 5′-ATTTAGGTGACACTATAGAA-3′
pCMV-HA-JP5的全序列信息:JP07033 pCMV-HA-JP5-全序列.txt。
在HEK293T細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)中共轉(zhuǎn)pCMV-HA-JP5和pCMV-3X Flag-LTA(JP07032)，經(jīng)免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，JP5和LTA兩種蛋白可以相互作用，具體參考Flag&HA Co-IP陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(JP07043)。
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產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

JP07033-1μg
pCMV-HA-JP5
1μg

JP07033-100μg
pCMV-HA-JP5
100μg

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