JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg

JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg

pCMV-3X Flag-JP5是自行研發(fā)生產(chǎn)的在哺乳動物細胞中表達3X Flag標簽的人源JP5(1-393aa)融合蛋白的質(zhì)粒，可以方便使用抗Flag標簽的抗體來識別JP5蛋白的表達，或進行免疫共沉淀(Co-IP)分析等。該質(zhì)粒含有CMV啟動子，可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達；帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性，可利用其氨芐青霉素抗性轉(zhuǎn)化大腸桿菌后篩選陽性菌，而在轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞后，可使用G418 (JJP010081/JJP010081)篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。G418和新霉素效果一致，但G418的細胞毒性更低。
JP5中文名為細胞腫瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5)，是調(diào)控細胞周期的重要轉(zhuǎn)錄因子，主要功能包括調(diào)節(jié)細胞周期、促進細胞凋亡、維持基因組穩(wěn)定性和抑制腫瘤血管生成等，野生型的JP5是一個重要的抑癌基因，在抑制癌癥發(fā)生過程中扮演重要的角色，因此被稱為“基因組的守護者”。JP5全長393氨基酸，理論分子量為43.7kDa，1979年因其在SDS-PAGE凝膠電泳中展示的分子量約為53kDa而得名JP5，這種分子量的差異源自于JP5存在大量的脯氨酸殘基，減緩了其在SDS-PAGE凝膠電泳中的遷移速度[1-2]。
pCMV-3X Flag-JP5質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide
Position

CMV promoter
235-818

3X Flag tag
907-972

human JP5
991-2169

bGH poly(A) signal
2274-2498

f1 ori
2544-2972

SV40 promoter
2986-3316

Neomycin resistance gene
3383-4177

SV40 poly(A) signal
4351-4472

ori
4923-5511

Ampicillin resistance gene
5682-6542
pCMV-3X Flag-JP5中沒有的酶切位點包括：

AarI
AbsI
AccIII
Acc65I
AcvI
AflII
AgeI

AjiI
AleI
Aor13HI
AscI
AsiGI
AsiSI
AsJJP7I

AsuNHI
BaeI
BanIII
BarI
BbrPI
BfrI
BlpI

BmgBI
BmtI
Bpu1102I
Bsa29I
BseAI
BseCI
BshVI

BshTI
BsiWI
BsmBI
Bsp13I
Bsp1407I
Bsp1720I
BspDI

BspEI
BspOI
BspTI
BspXI
BsrGI
BJP908I
BstAFI

BstAUI
BstEII
BstENI
BstHPI
BstPI
Bsu15I
BsuTUI

BtrI
CelII
Cfr42I
ClaI
CspAI
Eco72I
Eco91I

EcoNI
EcoO65I
Esp3I
FseI
FspAI
HpaI
I-CeuI

I-PpoI
I-SceI
KflI
KpnI
Kpn2I
KspI
KspAI

MauBI
MreI
MroI
MspCI
MssI
NheI
OliI

PacI
PalAI
Pfl23II
PI-PspI
PI-SceI
PinAI
PmaCI

PmeI
PmlI
PpuMI
Psp5II
PspCI
PspEI
PspLI

PspPPI
PsrI
RgaI
RigI
SacII
SanDI
SbfI

SdaI
SfaAI
SfiI
Sfr303I
SgfI
SgrBI
SgsI

SmiI
SrfI
Sse8387I
SspBI
SstII
SwaI
Vha464I

XagI

pCMV-3X Flag-JP5中的單酶切位點包括：

AhdI
ApaI
AvrII
BamHI
BbvCI
BglII
BssHII

BstXI
BstZ17I
Bsu36I
CsiI
DraIII
EcoRI
EcoRV

KasI
MfeI
MluI
NarI
NdeI
NotI
NruI

PasI
PflFI
PfoI
PluTI
PshAI
PspOMI
PspXI

RsrII
ScaI
SexAI
SfoI
SgrAI
SgrDI
SmaI

SpeI
TspMI
Tth111I
XbaI
XhoI
XmaI

pCMV-3X Flag-JP5質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
CMV-F primer (769-789): 5′-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3′
BGH-R primer (2285-2268): 5′-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′
pCMV-3X Flag-JP5的全序列信息:JP07031 pCMV-3X Flag-JP5-全序列.txt。
在HEK293T細胞(人胚腎細胞)中共轉(zhuǎn)pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA (JP07036)，經(jīng)免疫共沉淀(Co-IP)實驗驗證，JP5和LTA兩種蛋白可以相互作用，具體參考Flag&Myc Co-IP陽性對照質(zhì)粒對(JP07041)。
包裝清單：

產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝

JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg

JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg

－
說明書
1份

保存條件：
-20℃保存。
注意事項：
本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本質(zhì)粒僅經(jīng)過測序、免疫沉淀和免疫共沉淀驗證，未經(jīng)過功能性驗證。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。