JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg
JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg
pCMV-3X Flag-JP5是自行研發(fā)生產(chǎn)的在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)3X Flag標(biāo)簽的人源JP5(1-393aa)融合蛋白的質(zhì)粒,可以方便使用抗Flag標(biāo)簽的抗體來(lái)識(shí)別JP5蛋白的表達(dá),或進(jìn)行免疫共沉淀(Co-IP)分析等。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子,可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá);帶有氨芐青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性,可利用其氨芐青霉素抗性轉(zhuǎn)化大腸桿菌后篩選陽(yáng)性菌,而在轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞后,可使用G418 (JJP010081/JJP010081)篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。G418和新霉素效果一致,但G418的細(xì)胞毒性更低。
JP5中文名為細(xì)胞腫瘤抗原JP5 (Cellular tumor antigen JP5),是調(diào)控細(xì)胞周期的重要轉(zhuǎn)錄因子,主要功能包括調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、維持基因組穩(wěn)定性和抑制腫瘤血管生成等,野生型的JP5是一個(gè)重要的抑癌基因,在抑制癌癥發(fā)生過(guò)程中扮演重要的角色,因此被稱為“基因組的守護(hù)者”。JP5全長(zhǎng)393氨基酸,理論分子量為43.7kDa,1979年因其在SDS-PAGE凝膠電泳中展示的分子量約為53kDa而得名JP5,這種分子量的差異源自于JP5存在大量的脯氨酸殘基,減緩了其在SDS-PAGE凝膠電泳中的遷移速度[1-2]。
pCMV-3X Flag-JP5質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
235-818
3X Flag tag
907-972
human JP5
991-2169
bGH poly(A) signal
2274-2498
f1 ori
2544-2972
SV40 promoter
2986-3316
Neomycin resistance gene
3383-4177
SV40 poly(A) signal
4351-4472
ori
4923-5511
Ampicillin resistance gene
5682-6542
pCMV-3X Flag-JP5中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)包括:
AarI
AbsI
AccIII
Acc65I
AcvI
AflII
AgeI
AjiI
AleI
Aor13HI
AscI
AsiGI
AsiSI
AsJJP7I
AsuNHI
BaeI
BanIII
BarI
BbrPI
BfrI
BlpI
BmgBI
BmtI
Bpu1102I
Bsa29I
BseAI
BseCI
BshVI
BshTI
BsiWI
BsmBI
Bsp13I
Bsp1407I
Bsp1720I
BspDI
BspEI
BspOI
BspTI
BspXI
BsrGI
BJP908I
BstAFI
BstAUI
BstEII
BstENI
BstHPI
BstPI
Bsu15I
BsuTUI
BtrI
CelII
Cfr42I
ClaI
CspAI
Eco72I
Eco91I
EcoNI
EcoO65I
Esp3I
FseI
FspAI
HpaI
I-CeuI
I-PpoI
I-SceI
KflI
KpnI
Kpn2I
KspI
KspAI
MauBI
MreI
MroI
MspCI
MssI
NheI
OliI
PacI
PalAI
Pfl23II
PI-PspI
PI-SceI
PinAI
PmaCI
PmeI
PmlI
PpuMI
Psp5II
PspCI
PspEI
PspLI
PspPPI
PsrI
RgaI
RigI
SacII
SanDI
SbfI
SdaI
SfaAI
SfiI
Sfr303I
SgfI
SgrBI
SgsI
SmiI
SrfI
Sse8387I
SspBI
SstII
SwaI
Vha464I
XagI
pCMV-3X Flag-JP5中的單酶切位點(diǎn)包括:
AhdI
ApaI
AvrII
BamHI
BbvCI
BglII
BssHII
BstXI
BstZ17I
Bsu36I
CsiI
DraIII
EcoRI
EcoRV
KasI
MfeI
MluI
NarI
NdeI
NotI
NruI
PasI
PflFI
PfoI
PluTI
PshAI
PspOMI
PspXI
RsrII
ScaI
SexAI
SfoI
SgrAI
SgrDI
SmaI
SpeI
TspMI
Tth111I
XbaI
XhoI
XmaI
pCMV-3X Flag-JP5質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下:
CMV-F primer (769-789): 5′-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3′
BGH-R primer (2285-2268): 5′-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′
pCMV-3X Flag-JP5的全序列信息:JP07031 pCMV-3X Flag-JP5-全序列.txt。
在HEK293T細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)中共轉(zhuǎn)pCMV-3X Flag-JP5和pCMV-Myc-LTA (JP07036),經(jīng)免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,JP5和LTA兩種蛋白可以相互作用,具體參考Flag&Myc Co-IP陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒對(duì)(JP07041)。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JP07031-1μg
pCMV-3X Flag-JP5
1μg
JP07031-100μg
pCMV-3X Flag-JP5
100μg
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本質(zhì)粒僅經(jīng)過(guò)測(cè)序、免疫沉淀和免疫共沉淀驗(yàn)證,未經(jīng)過(guò)功能性驗(yàn)證。
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為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。