產(chǎn)品編號

PC208
Human CXCL10/IP-10 ELISA Kit
96次

3198

的Human CXCL10/IP-10 ELISA Kit (Human CXCL10/IP-10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit)，即CXC趨化因子配體10/干擾素γ誘導(dǎo)蛋白10酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的CXCL10/IP-10的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為29pg/ml，與人GRO、MIG、TNF-α、Lymphotactin、TYK-2等沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
趨化因子(chemokines)是一類對不同靶細胞具有趨化效應(yīng)的細胞因子家族，通過與靶細胞膜上相應(yīng)的趨化性細胞因子受體結(jié)合，引起靶細胞的定向遷移。CXC趨化因子配體10 (CXC chemokine ligand-10,CXCL10)又稱為干擾素γ誘導(dǎo)蛋白10 (interferon-gamma-induced protein 10, IP-10)，屬于CXC趨化因子超家族的非谷氨酸-亮氨酸-精氨酸序列(glutamic acid-leucine-arginine, ELR motif)類，分子量為10.8kDa。CXCL10由單核細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等多種細胞類型分泌，可對干擾素γ(interferon-γ,IFN-γ)產(chǎn)生應(yīng)答。分泌后，CXCL10被切割成分子量為8.7kDa的生物活性蛋白，通過與細胞表面趨化因子受體3(CXC chemokine receptor 3, CXCR3)結(jié)合對T細胞、NK細胞、單核-巨噬細胞和樹突狀細胞產(chǎn)生趨化作用。此外，CXCL10通過抑制骨髓集落形成和血管生成而具有抗腫瘤活性。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人CXCL10/IP-10的濃度，其原理見圖1。人CXCL10/IP-10特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上，當(dāng)加入標準品或樣品時，其中的人CXCL10/IP-10會與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人CXCL10/IP-10抗體后，生物素化抗人CXCL10/IP-10抗體與人CXCL10/IP-10結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。人CXCL10/IP-10濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1.雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝

PC208-1
人CXCL10/IP-10抗體預(yù)包被板
8孔×12條

PC208-2
樣品分析緩沖液
5ml

PC208-3
標準品稀釋液
10ml

PC208-4
人CXCL10/IP-10標準品
2-4瓶

PC208-5
人CXCL10/IP-10生物素化抗體
10ml

PC208-6
辣根過氧化物酶標記Streptavidin
10ml

PC208-7
洗滌液(20X)
30ml

PC208-8
TMB溶液
10ml

PC208-9
終止液
5ml

PC208-10
封板膜(透明)
2張

PC208-11
封板膜(白色)
2張

—
說明書
1份

保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。