產(chǎn)品編號

PC201
Mouse CXCL12/SDF-1α ELISA Kit
96次

3198

的Mouse?CXCL12/SDF-1α?ELISA?Kit?(Mouse?Stromal?Cell-Derived?Factor?1α?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即小鼠趨化因子12/基質(zhì)細胞衍生因子1α酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液中的CXCL12/SDF-1α的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強，重復性好。多次重復檢測結果表明，最小檢出量為31.6pg/ml，與人和鼠的IP-10/CRG-2等均沒有交叉反應，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
基質(zhì)細胞衍生因子1?(Stromal?Cell-Derived?Factor1,?SDF-1)，又稱為C-X-C?motif?chemokine?12?(CXCL12)，屬于non-ELR?CXC趨化因子，在發(fā)育和造血過程中發(fā)揮重要作用。在小鼠體內(nèi)存在兩種SDF-1的選擇性剪切變體：SDF-1α和SDF-1β。成熟的SDF-1α是一種氨基酸長度為70的多肽，SDF-1β具有相同的N端70個氨基酸，唯一不同的是在C端還存在4個氨基酸的延伸段，目前C端延伸段的具體作用尚不明確。在腦內(nèi)，SDF-1β與白細胞活動相關，而SDF-1α則參與調(diào)節(jié)神經(jīng)元可塑性。SDF-1是一種強堿性的肝素結合蛋白，不存在糖基化現(xiàn)象。表達SDF-1的細胞主要有神經(jīng)元細胞、成纖維細胞、甲狀腺細胞、CD34+干細胞、血管平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞。小鼠SDF-1β與人SDF-1β具有97%的氨基酸同源性，而小鼠SDF-1α與人SDF-1α則有99%的氨基酸同源性。成熟的小鼠SDF-1α與大鼠SDF-1α具有96%的氨基酸同源性。
SDF-1與CXCR4受體(LESTR/fusin)結合并激活受體。受體的激活過程涉及受體二聚化，與Gai(抑制性G蛋白亞基)相互作用、JAK2/JAK3介導的磷酸化以及STAT?(Signal?Transducers?and?Activators?of?Transcription)因子磷酸化等過程。SDF-1與受體結合后能夠發(fā)揮多種生物學功能。對于造血祖細胞而言，SDF-1能夠提升其在骨髓及體內(nèi)循環(huán)過程中的存活能力，同時對自然殺傷細胞、T細胞、漿細胞和樹突狀細胞也具有化學趨化能力。在神經(jīng)系統(tǒng)中，SDF-1能夠吸引胚胎小腦外顆粒細胞，并且作為神經(jīng)元生長錐生長的化學排斥物。另外SDF-1對B淋巴細胞也具有一定調(diào)控，其能夠影響不同時期B細胞在骨髓中的數(shù)量。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測樣品中小鼠CXCL12/SDF-1α的濃度，其原理見圖1。小鼠CXCL12/SDF-1α特異的單克隆捕獲抗體已預包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時，其中的小鼠CXCL12/SDF-1α會與捕獲抗體結合。當加入生物素化的抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗體后，生物素化抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗體與小鼠CXCL12/SDF-1α結合，形成夾心的免疫復合物。隨后加入辣根過氧化物酶標記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會與夾心的免疫復合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測450nm處的吸光度值就能實現(xiàn)定量檢測。小鼠CXCL12/SDF-1α濃度與A450值呈正比，通過繪制標準曲線，對照樣品吸光度值，即可計算出樣品中小鼠CXCL12/SDF-1α濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個包裝的本試劑盒，包括標準品檢測，可以進行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

PC201-1

小鼠CXCL12/SDF-1α抗體預包被板

8孔×12條

PC201-2

樣品分析緩沖液

5ml

PC201-3

標準品稀釋液(5X)

10ml

PC201-4

小鼠CXCL12/SDF-1α標準品

2-4瓶

PC201-5

小鼠CXCL12/SDF-1α生物素化抗體

10ml

PC201-6

辣根過氧化物酶標記Streptavidin

10ml

PC201-7

洗滌液(20X)

30ml

PC201-8

TMB溶液

10ml

PC201-9

終止液

5ml

PC201-10

封板膜(透明)

2張

PC201-11

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
標準品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個月內(nèi)有效。除標準品外，試劑盒其它組分嚴禁凍存。
注意事項：
由于標準品一般是凍干粉，在制備后需要嚴格校準，所以標準品的瓶數(shù)及每瓶標準品所需加入的稀釋液體積請以實際收到的試劑盒及標準品標簽上的標注為準。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結晶，如果發(fā)現(xiàn)有結晶，請室溫水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標準品的精確性，標準品配制使用后，如果有剩余請勿再次使用。
TMB溶液請勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時，請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨立測試，所以請勿混用不同貨號和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個試劑盒同時檢測時，請獨立使用各個試劑盒中的試劑，請勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻對保證反應結果的精準性很重要，在加液后請輕輕晃動整個96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進行，要求嚴格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會導致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。
檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。