產(chǎn)品編號(hào)

PC201
Mouse CXCL12/SDF-1α ELISA Kit
96次

3198

的Mouse?CXCL12/SDF-1α?ELISA?Kit?(Mouse?Stromal?Cell-Derived?Factor?1α?Enzyme-Linked?
ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即小鼠趨化因子12/基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的CXCL12/SDF-1α的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明，最小檢出量為31.6pg/ml，與人和鼠的IP-10/CRG-2等均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1?(Stromal?Cell-Derived?Factor1,?SDF-1)，又稱為C-X-C?motif?chemokine?12?(CXCL12)，屬于non-ELR?CXC趨化因子，在發(fā)育和造血過程中發(fā)揮重要作用。在小鼠體內(nèi)存在兩種SDF-1的選擇性剪切變體：SDF-1α和SDF-1β。成熟的SDF-1α是一種氨基酸長度為70的多肽，SDF-1β具有相同的N端70個(gè)氨基酸，唯一不同的是在C端還存在4個(gè)氨基酸的延伸段，目前C端延伸段的具體作用尚不明確。在腦內(nèi)，SDF-1β與白細(xì)胞活動(dòng)相關(guān)，而SDF-1α則參與調(diào)節(jié)神經(jīng)元可塑性。SDF-1是一種強(qiáng)堿性的肝素結(jié)合蛋白，不存在糖基化現(xiàn)象。表達(dá)SDF-1的細(xì)胞主要有神經(jīng)元細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、甲狀腺細(xì)胞、CD34+干細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。小鼠SDF-1β與人SDF-1β具有97%的氨基酸同源性，而小鼠SDF-1α與人SDF-1α則有99%的氨基酸同源性。成熟的小鼠SDF-1α與大鼠SDF-1α具有96%的氨基酸同源性。
SDF-1與CXCR4受體(LESTR/fusin)結(jié)合并激活受體。受體的激活過程涉及受體二聚化，與Gai(抑制性G蛋白亞基)相互作用、JAK2/JAK3介導(dǎo)的磷酸化以及STAT?(Signal?Transducers?and?Activators?of?Transcription)因子磷酸化等過程。SDF-1與受體結(jié)合后能夠發(fā)揮多種生物學(xué)功能。對(duì)于造血祖細(xì)胞而言，SDF-1能夠提升其在骨髓及體內(nèi)循環(huán)過程中的存活能力，同時(shí)對(duì)自然殺傷細(xì)胞、T細(xì)胞、漿細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞也具有化學(xué)趨化能力。在神經(jīng)系統(tǒng)中，SDF-1能夠吸引胚胎小腦外顆粒細(xì)胞，并且作為神經(jīng)元生長錐生長的化學(xué)排斥物。另外SDF-1對(duì)B淋巴細(xì)胞也具有一定調(diào)控，其能夠影響不同時(shí)期B細(xì)胞在骨髓中的數(shù)量。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich?ELISA)檢測(cè)樣品中小鼠CXCL12/SDF-1α的濃度，其原理見圖1。小鼠CXCL12/SDF-1α特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的小鼠CXCL12/SDF-1α?xí)c捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗體后，生物素化抗小鼠CXCL12/SDF-1α抗體與小鼠CXCL12/SDF-1α結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。小鼠CXCL12/SDF-1α濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中小鼠CXCL12/SDF-1α濃度。

圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。

一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

PC201-1

小鼠CXCL12/SDF-1α抗體預(yù)包被板

8孔×12條

PC201-2

樣品分析緩沖液

5ml

PC201-3

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)

10ml

PC201-4

小鼠CXCL12/SDF-1α標(biāo)準(zhǔn)品

2-4瓶

PC201-5

小鼠CXCL12/SDF-1α生物素化抗體

10ml

PC201-6

辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin

10ml

PC201-7

洗滌液(20X)

30ml

PC201-8

TMB溶液

10ml

PC201-9

終止液

5ml

PC201-10

封板膜(透明)

2張

PC201-11

封板膜(白色)

2張

–

說明書

1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測(cè)試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。