產(chǎn)品編號(hào)
JJP201S
InstantView??SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X，無(wú)氣味)
1ml
319
生產(chǎn)的InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)，即InstantView? SDS-PAGE Protein Staining and Loading Buffer (5X, Odorless)，是一種添加了安全無(wú)毒的特殊熒光染料的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)，能使蛋白在上樣前與上樣緩沖液的煮沸過(guò)程中被染色成紫色并帶上橙黃色熒光，這樣在電泳過(guò)程中或電泳后就可以直接肉眼觀察到蛋白的紫色條帶或者通過(guò)紫外或藍(lán)光設(shè)備觀察到蛋白的橙黃色熒光條帶。同時(shí)，本產(chǎn)品使用了更加安全健康的無(wú)氣味的還原劑。
本產(chǎn)品的原理和使用效果類似于VWR/Amresco的Protein EZ-Vision?，都使用了安全無(wú)毒的熒光染料，無(wú)需額外的染色和脫色步驟，在蛋白和上樣緩沖液變性的過(guò)程中就能完成染色步驟，在電泳完成后就可以直接觀察和記錄蛋白的電泳圖譜，兼容紫外和藍(lán)光檢測(cè)系統(tǒng)，并且兼容后續(xù)的Western檢測(cè)等。
安全無(wú)毒，染色便捷：使用安全無(wú)毒的染料，并且沒(méi)有任何額外的實(shí)驗(yàn)步驟，按照普通的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)的操作步驟操作即可。蛋白樣品加上1/4體積的本產(chǎn)品，混勻后，95℃水浴加熱5分鐘，就可以完成對(duì)蛋白樣品的染色，把蛋白染色成紫色同時(shí)使蛋白帶上橙黃色熒光。染色、電泳等可以在普通燈光下操作，無(wú)需采取額外的避光措施。
不影響電泳遷移率：染料分子小并且不帶電荷，不影響蛋白條帶的電泳遷移速率和最終形成的電泳圖譜。
可以即時(shí)觀察樣品電泳效果：使用本產(chǎn)品在電泳結(jié)束后可即時(shí)觀察蛋白樣品的電泳效果。蛋白條帶的量大于500ng時(shí)可直接肉眼觀察到紫色蛋白條帶，蛋白量較少時(shí)，可使用紫外燈或藍(lán)光燈(需要配合使用藍(lán)光濾光片)在暗室中觀察蛋白條帶的熒光。
無(wú)需凝膠染色：使用本產(chǎn)品后無(wú)需進(jìn)行任何凝膠染色，就可以直接拍照記錄蛋白樣品的電泳圖了。蛋白量大時(shí)可以直接拍照，蛋白量比較少時(shí)，可以使用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備進(jìn)行拍照和記錄。
兼容Western檢測(cè)：使用本產(chǎn)品上樣并電泳完成后，可以直接轉(zhuǎn)膜并進(jìn)行Western檢測(cè)，無(wú)需任何額外的處理。PVDF膜和硝酸纖維素膜(NC膜)都能適用。轉(zhuǎn)膜后可以同樣觀察蛋白的紫色條帶或橙黃色熒光條帶。通過(guò)對(duì)多種常用抗體的測(cè)試發(fā)現(xiàn)，使用本產(chǎn)品對(duì)于Western的檢測(cè)靈敏度沒(méi)有任何顯著影響。國(guó)外同類產(chǎn)品也可以完美兼容Western檢測(cè)。當(dāng)然不能排除本產(chǎn)品可能會(huì)影響個(gè)別抗體對(duì)于目的蛋白的檢測(cè)。
背景極低，游離染料不影響觀察和檢測(cè)：游離的染料分子與示蹤染料溴酚藍(lán)有幾乎相同的遷移速率，它們會(huì)共同電泳遷移至凝膠末端，確保凝膠的背景潔凈透明。
靈敏度高，低至25ng：使用本產(chǎn)品后，對(duì)于0.5μg或以上的單一蛋白條帶，其經(jīng)過(guò)熒光染料修飾后產(chǎn)生的粉紅色略偏紫色的條帶即使在日光燈下肉眼清晰可見(jiàn)(圖1)，0.2μg的蛋白條帶也隱約可見(jiàn)；使用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備，可以檢測(cè)到低至25ng左右的蛋白條帶(圖2)。
兼容紫外和藍(lán)光成像系統(tǒng)：無(wú)論使用紫外成像設(shè)備，還是使用對(duì)人體無(wú)害的藍(lán)光成像設(shè)備，都可檢測(cè)低至25ng的蛋白條帶。
兼容Tris-glycine和Hepes凝膠體系：對(duì)于最常見(jiàn)的Tris-glycine凝膠體系和較常見(jiàn)的Hepes凝膠體系都能很好地兼容。
染色穩(wěn)定性好：SDS-PAGE電泳結(jié)束后，蛋白條帶的熒光至少可以在4℃穩(wěn)定保存5小時(shí)。如果電泳結(jié)束后立即轉(zhuǎn)膜，膜上蛋白條帶的熒光至少可以在4℃穩(wěn)定保存24小時(shí)。
本產(chǎn)品更加安全健康。本產(chǎn)品使用了無(wú)氣味、水溶性更穩(wěn)定、還原能力相近的還原劑替代了有氣味的二硫蘇糖醇(DTT)或巰基乙醇(2-Mercaptoethanol)，從而可以確保本產(chǎn)品在正常使用或加熱時(shí)都不會(huì)有異味，使蛋白上樣操作更加安全健康。
主要用途：Western檢測(cè)時(shí)直接觀察記錄并確認(rèn)每個(gè)泳道的上樣量是否均衡，特別對(duì)于組織樣品的Western檢測(cè)尤為重要；SDS-PAGE時(shí)最快速便捷地觀察到目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)、分離純化等效果。
生產(chǎn)的InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)檢測(cè)蛋白的靈敏度與染色效果可參考圖1和圖2。
圖1. 使用InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)對(duì)不同上樣量的BSA樣品染色電泳后的凝膠照片效果示意圖。0.2、0.5、1、2、5、10μg的BSA蛋白樣品與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)混合后，95℃水浴加熱5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后凝膠拍照的示意圖片，其中0.5μg蛋白條帶肉眼清晰可見(jiàn)，0.2μg蛋白條帶肉眼也隱約可見(jiàn)。
圖2. InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)對(duì)不同上樣量的BSA樣品和菌液樣品染色電泳后用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備的檢測(cè)效果示意圖。A, B. 25、50、100、200和500ng的BSA樣品與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)混合后，95℃水浴加熱5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后凝膠使用紫外(A)和藍(lán)光成像設(shè)備(B)拍照的示意圖片，其中25ng蛋白條帶都清晰可見(jiàn)；C. 取10μg用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)前和誘導(dǎo)表達(dá)35kD目的蛋白后的細(xì)菌裂解液與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)混合后，95℃水浴加熱5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后，凝膠直接使用紫外(左)、藍(lán)光成像設(shè)備(中)拍照的示意圖片和考馬斯亮藍(lán)染色(右)后的示意圖片，其中誘導(dǎo)表達(dá)的35kD蛋白條帶清晰可見(jiàn)。圖中可見(jiàn)考馬斯亮藍(lán)染色的靈敏度顯著低于本產(chǎn)品。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以用于4ml蛋白樣品的染色和上樣。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP201S-1
InstantView? Protein Staining Dye
For 1ml
JJP201S-2
InstantView? Protein Loading Buffer (5X, Odorless)
1ml
—
說(shuō)明書(shū)
1份
保存條件：
-20℃避光保存，一年有效。4℃避光保存，3個(gè)月內(nèi)有效；室溫保存，2周內(nèi)有效。
注意事項(xiàng)：
本產(chǎn)品用于蛋白變性時(shí)，建議95℃水浴或PCR儀加熱5分鐘，溫度過(guò)高(如100℃)或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如超過(guò)15分鐘)，有可能會(huì)導(dǎo)致蛋白降解或上樣緩沖液中指示劑的顏色異常。
InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)中不含劇毒的巰基乙醇和有刺激性氣味的DTT，但還原效果一致，對(duì)于蛋白樣品的處理效果和電泳效果一致。
配制好的InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)必須完全溶解后再使用。
低pH會(huì)顯著影響染色效果。如果蛋白樣品溶液的pH值低于5，為了獲得更好的顯色效果，建議將pH值調(diào)整至7以上。
大多數(shù)預(yù)染和非預(yù)染的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)與本產(chǎn)品不兼容。未添加上樣緩沖液并且溶于水或生理鹽水的非預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)，可以與InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X, 無(wú)氣味)進(jìn)行反應(yīng)以制備成帶有橙黃色熒光的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。
經(jīng)本產(chǎn)品進(jìn)行染色的蛋白條帶不推薦用于后續(xù)的蛋白測(cè)序、蛋白質(zhì)譜分析或抗體制備。
本產(chǎn)品須-20℃避光保存。室溫避光放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(超過(guò)2-3周)，由于氧化會(huì)降低染色效果，此時(shí)可額外添加適量DTT，蛋白條帶會(huì)重新變得清晰和明亮，但添加DTT的終濃度不要超過(guò)20mM。
本產(chǎn)品對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。