產(chǎn)品編號
JJP200
InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)
1ml
295
生產(chǎn)的InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)，即InstantView? SDS-PAGE Protein Staining and Loading Buffer (5X)，是一種添加了安全無毒的特殊熒光染料的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)，能使蛋白在上樣前與上樣緩沖液的煮沸過程中被染色成紫色并帶上橙黃色熒光，這樣在電泳過程中或電泳后就可以直接肉眼觀察到蛋白的紫色條帶或者通過紫外或藍(lán)光設(shè)備觀察到蛋白的橙黃色熒光條帶。
本產(chǎn)品的原理和使用效果類似于VWR/Amresco的Protein EZ-Vision?，都使用了安全無毒的熒光染料，無需額外的染色和脫色步驟，在蛋白和上樣緩沖液煮沸的過程中就能完成染色步驟，在電泳完成后就可以直接觀察和記錄蛋白的電泳圖譜，兼容紫外和藍(lán)光檢測系統(tǒng)，并且兼容后續(xù)的Western檢測等。
安全無毒，染色便捷：使用安全無毒的染料，并且沒有任何額外的實驗步驟，按照普通的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)的操作步驟操作即可。蛋白樣品加上1/4體積的本產(chǎn)品，混勻后，95-100℃水浴加熱5分鐘，就可以完成對蛋白樣品的染色，把蛋白染色成紫色同時使蛋白帶上橙黃色熒光。染色、電泳等可以在普通燈光下操作，無需采取額外的避光措施。
不影響電泳遷移率：染料分子小并且不帶電荷，不影響蛋白條帶的電泳遷移速率和最終形成的電泳圖譜。
可以即時觀察樣品電泳效果：使用本產(chǎn)品在電泳結(jié)束后可即時觀察蛋白樣品的電泳效果。蛋白條帶的量大于500ng時可直接肉眼觀察到紫色蛋白條帶，蛋白量較少時，可使用紫外燈或藍(lán)光燈(需要配合使用藍(lán)光濾光片)在暗室中觀察蛋白條帶的熒光。
無需凝膠染色：使用本產(chǎn)品后無需進(jìn)行任何凝膠染色，就可以直接拍照記錄蛋白樣品的電泳圖了。蛋白量大時可以直接拍照，蛋白量比較少時，可以使用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備進(jìn)行拍照和記錄。
兼容Western檢測：使用本產(chǎn)品上樣并電泳完成后，可以直接轉(zhuǎn)膜并進(jìn)行Western檢測，無需任何額外的處理。PVDF膜和硝酸纖維素膜(NC膜)都能適用。轉(zhuǎn)膜后可以同樣觀察蛋白的紫色條帶或橙黃色熒光條帶。通過對多種常用抗體的測試發(fā)現(xiàn)，使用本產(chǎn)品對于Western的檢測靈敏度沒有任何顯著影響。國外同類產(chǎn)品也可以完美兼容Western檢測。當(dāng)然不能排除本產(chǎn)品可能會影響個別抗體對于目的蛋白的檢測。
背景極低，游離染料不影響觀察和檢測：游離的染料分子與示蹤染料溴酚藍(lán)有幾乎相同的遷移速率，它們會共同電泳遷移至凝膠末端，確保凝膠的背景潔凈透明。
靈敏度高，低至25ng：使用本產(chǎn)品后，對于0.5μg或以上的單一蛋白條帶，其經(jīng)過熒光染料修飾后產(chǎn)生的粉紅色略偏紫色的條帶即使在日光燈下肉眼清晰可見(圖1)，0.2μg的蛋白條帶也隱約可見；使用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備，可以檢測到低至25ng左右的蛋白條帶(圖2)。
兼容紫外和藍(lán)光成像系統(tǒng)：無論使用紫外成像設(shè)備，還是使用對人體無害的藍(lán)光成像設(shè)備，都可檢測低至25ng的蛋白條帶。
兼容Tris-glycine和Hepes凝膠體系：對于最常見的Tris-glycine凝膠體系和較常見的Hepes凝膠體系都能很好地兼容。
染色穩(wěn)定性好：SDS-PAGE電泳結(jié)束后，蛋白條帶的熒光至少可以在4℃穩(wěn)定保存5小時。如果電泳結(jié)束后立即轉(zhuǎn)膜，膜上蛋白條帶的熒光至少可以在4℃穩(wěn)定保存24小時。
主要用途：Western檢測時直接觀察記錄并確認(rèn)每個泳道的上樣量是否均衡，特別對于組織樣品的Western檢測尤為重要；SDS-PAGE時最快速便捷地觀察到目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)、分離純化等效果。
生產(chǎn)的InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)檢測蛋白的靈敏度與染色效果可參考圖1和圖2。
圖1. 使用InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)對不同上樣量的BSA樣品染色電泳后的凝膠照片。0.2、0.5、1、2、5、10μg的BSA蛋白樣品與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)混合后，100℃水浴煮沸5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后凝膠的實拍圖片，其中0.5μg蛋白條帶肉眼清晰可見，0.2μg蛋白條帶肉眼也隱約可見。 圖2. InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)對不同上樣量的BSA樣品和菌液樣品染色電泳后用紫外或藍(lán)光成像設(shè)備的檢測效果圖。A, B. 25、50、100、200和500ng的BSA樣品與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)混合后，100℃水浴煮沸5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后凝膠使用紫外(A)和藍(lán)光成像設(shè)備(B)的實拍圖片，其中25ng蛋白條帶都清晰可見；C. 取10μg用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)前和誘導(dǎo)表達(dá)35kD目的蛋白后的細(xì)菌裂解液與適量InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)混合后，100℃水浴煮沸5分鐘，上樣進(jìn)行SDS-PAGE后，凝膠直接使用紫外(左)、藍(lán)光成像設(shè)備(中)的實拍圖片和考馬斯亮藍(lán)染色(右)后的實拍圖片，其中誘導(dǎo)表達(dá)的35kD蛋白條帶清晰可見。圖中可見考馬斯亮藍(lán)染色的靈敏度顯著低于本產(chǎn)品。
一個包裝的本產(chǎn)品可以用于4ml蛋白樣品的染色和上樣。
包裝清單：
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP200-1
InstantView? Protein Staining Dye
For 1ml
JJP200-2
InstantView? Protein Loading Buffer (5X)
1ml
—
說明書
1份
保存條件：
-20℃避光保存，一年有效。4℃避光保存，3個月內(nèi)有效；室溫保存，2周內(nèi)有效。
注意事項：
低pH會顯著影響染色效果。如果蛋白樣品溶液的pH值低于5，為了獲得更好的顯色效果，建議將pH值調(diào)整至7以上。
大多數(shù)預(yù)染和非預(yù)染的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)與本產(chǎn)品不兼容。未添加上樣緩沖液并且溶于水或生理鹽水的非預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)，可以與InstantView? SDS-PAGE蛋白染色及上樣緩沖液(5X)進(jìn)行反應(yīng)以制備成帶有橙黃色熒光的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)。
經(jīng)本產(chǎn)品進(jìn)行染色的蛋白條帶不推薦用于后續(xù)的蛋白測序、蛋白質(zhì)譜分析或抗體制備。
本產(chǎn)品須-20℃避光保存。室溫避光放置時間過長(超過2-3周)，由于氧化會降低染色效果，此時可額外添加適量DTT，蛋白條帶會重新變得清晰和明亮，但添加DTT的終濃度不要超過20mM。
本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。