產(chǎn)品編號(hào)
JJP51
Mouse IL-22 ELISA Kit
96次
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的Mouse IL-22 ELISA Kit (Mouse Interleukine-22 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠白細(xì)胞介素22酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)小鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-22的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明，最小檢出量為22.6pg/ml，與小鼠IL-15、IL-20、IL-22R、IL-29、Leptin、LIF、MIF、TNF-α、TNF-β等均沒(méi)有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素22 (Interleukine-22, IL-22)，又稱IL-10相關(guān)T細(xì)胞來(lái)源誘導(dǎo)因子(IL-10 related T cell-derived Inducible Factor, IL-TIF)，是一種分子量在25-40kDa之間的糖蛋白，屬于IFN/IL-10細(xì)胞因子家族。小鼠IL-22首先合成179個(gè)氨基酸的前體蛋白，其中包含33個(gè)氨基酸的信號(hào)肽和146個(gè)氨基酸的成熟肽段。在部分小鼠種群中還存在有另一種IL-22基因，被命名為IL-22β，其編碼所產(chǎn)生的蛋白與常見(jiàn)的成熟小鼠IL-22(α)在序列上存在3個(gè)氨基酸差異。在正常情況下，IL-22主要以單體形式存在，但在濃度升高時(shí)，IL-22能夠通過(guò)非二硫鍵相連形成同源二聚體。成熟的小鼠IL-22與大鼠IL-22和人IL-22分別具有92%和81%的氨基酸同源性，IL-22主要由活化的T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞表達(dá)并分泌。
IL-22通過(guò)與異質(zhì)二聚體受體復(fù)合物結(jié)合實(shí)現(xiàn)信號(hào)傳遞，該受體復(fù)合物由IL-22 R1和IL-10 Rβ組成，二者均屬于II型細(xì)胞因子受體家族。單體IL-22首先與高親和受體亞基IL-22 R結(jié)合，隨后招募IL-10 Rβ形成受體復(fù)合物，經(jīng)由JAK-STATs通路傳遞信號(hào)。IL-10 Rβ幾乎在所有細(xì)胞都有表達(dá)，同時(shí)也是IL-10、IL-26、IL-28和IL-29等多種細(xì)胞因子的受體復(fù)合物組成部分，然而IL-22 R1僅在部分組織器官的上皮細(xì)胞和實(shí)質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，IL-22 R1同時(shí)也是IL-20和IL-24受體復(fù)合物的組成部分。除了與膜表面的IL-22 R1結(jié)合，IL-22還能夠與游離的IL-22結(jié)合蛋白(IL-22 BP)結(jié)合，該蛋白又被稱為IL-22 Rα2。與IL-22 R1不同，IL-22 BP并不能夠與其它IL-10家族成員結(jié)合。
IL-22在先天免疫中具有重要作用，同時(shí)對(duì)表達(dá)IL-22?R1的細(xì)胞也有一定影響。在皮膚角質(zhì)細(xì)胞中，IL-22能夠調(diào)節(jié)部分基因的表達(dá)，這些基因能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖，對(duì)傷口愈合和組織重構(gòu)具有重要意義。在肝臟和小腸中，IL-22能夠誘導(dǎo)急性時(shí)相蛋白的產(chǎn)生，保護(hù)肝臟免受損傷。在胰腺中，IL-22能夠上調(diào)胰腺炎相關(guān)蛋白1?(Pancreatitis-associated?Protein-1,?PAP1)蛋白表達(dá)，該蛋白在抵御組織損傷中具有重要作用。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中小鼠IL-22的濃度，其原理見(jiàn)圖1。小鼠IL-22特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的小鼠IL-22會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠IL-22抗體后，生物素化抗小鼠IL-22抗體與小鼠IL-22結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin?(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。小鼠IL-22濃度與A450值呈正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中小鼠IL-22濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP51-1
小鼠IL-22抗體預(yù)包被板
8孔×12條
JJP51-2
樣品分析緩沖液
5ml
JJP51-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml
JJP51-4
小鼠IL-22標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
JJP51-5
小鼠IL-22生物素化抗體
10ml
JJP51-6
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml
JJP51-7
洗滌液(20X)
30ml
JJP51-8
TMB溶液
10ml
JJP51-9
終止液
5ml
JJP51-10
封板膜(透明)
2張
JJP51-11
封板膜(白色)
2張
–
說(shuō)明書(shū)
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組份4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組份嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。