Human IFN-β ELISA Kit

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產(chǎn)品編號(hào)

JJP52
Human IFN-β ELISA Kit
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的Human IFN-β ELISA Kit (Human IFN-β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人干擾素β酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IFN-β的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測(cè)結(jié)果表明，最小檢出量為7pg/ml，與人IFN-α/β R1、IFN-α/β R2/Fc Chimera、IFN-ε、IFN-δ2、IFN-γ及小鼠IFN-β沒(méi)有交叉反應(yīng)。板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
干擾素β (Interferon beta, IFN-β)，又稱成纖維細(xì)胞干擾素，是一種分子量大約為22kDa的分泌型蛋白，屬于I型干擾素家族。成熟的人IFN-β與小鼠和大鼠IFN-β分別具有47%和46%的氨基酸同源性。IFN-β主要由成纖維細(xì)胞分泌產(chǎn)生，但在機(jī)體受到病原體刺激的情況下，樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞也能分泌產(chǎn)生IFN-β。IFN-β的產(chǎn)生受到TRAF3, IRF3和NF-κB的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控。IFN-β通過(guò)與IFN-α/β異質(zhì)二聚體受體結(jié)合進(jìn)行信號(hào)傳遞，此過(guò)程中還有JAK1和TYK2等下游分子參與， IFN-β能夠引起STAT蛋白家族的激活和磷酸化。IFN-β通過(guò)調(diào)節(jié)抗炎細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)，促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生和抑制炎性小體活化等方式調(diào)控機(jī)體免疫應(yīng)答。
IFN-β對(duì)于機(jī)體免疫的調(diào)節(jié)作用使其在預(yù)防自身免疫性疾病中可能具有重要意義。實(shí)驗(yàn)證明，IFN-β缺陷的小鼠對(duì)于實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)敏感性較強(qiáng)。此外，IFN-β在人多發(fā)性硬化(MS)和EAE疾病中都表現(xiàn)出了Th17細(xì)胞響應(yīng)抑制的效果，也是MS常用的治療方式之一。IFN-β對(duì)于葡聚糖硫酸鈉鹽誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎也有很好的治療效果。研究人員推測(cè)，上述這些免疫抑制效果可能與IFN-β能夠誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞產(chǎn)生有關(guān)。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中人IFN-β的濃度，其原理見(jiàn)圖1。人IFN-β特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IFN-β會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IFN-β抗體后，生物素化抗人IFN-β抗體與人IFN-β結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái)而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。人IFN-β濃度與A450值呈正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1.雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)，可以進(jìn)行96次檢測(cè)。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

JJP52-1
人IFN-β抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJP52-2
樣品分析緩沖液
5ml

JJP52-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)
10ml

JJP52-4
人IFN-β標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJP52-5
人IFN-β生物素化抗體
10ml

JJP52-6
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJP52-7
洗滌液(20X)
30ml

JJP52-8
TMB溶液
10ml

JJP52-9
終止液
5ml

JJP52-10
封板膜(透明)
2張

JJP52-11
封板膜(白色)
2張

—
說(shuō)明書(shū)
1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)獨(dú)立測(cè)試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
洗滌過(guò)程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。