產(chǎn)品編號(hào)
JJP505
Human IFN-α ELISA Kit
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的Human?IFN-α?ELISA?Kit?(Human?Interferon-α Enzyme-Linked?ImmunoSorbent?Assay?Kit)，即人干擾素α酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IFN-α的ELISA試劑盒。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為15pg/ml，與小鼠IFN-α，大鼠IFN-α等均沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
干擾素(Interferons, IFNs)是哺乳動(dòng)物中常見的細(xì)胞因子家族，能夠抑制感染、抑制增殖、免疫調(diào)節(jié)和其它多種生物學(xué)活性。在受到病毒、核酸、糖皮質(zhì)激素、丁酸等物質(zhì)刺激下，單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞類型都能夠產(chǎn)生并分泌IFN-α。人IFN-α具有多種亞型，不同亞型間具有85%的氨基酸同源性。IFN-α不同亞型之間具有一部分相同的生物學(xué)功能，但也具有各自獨(dú)特的生物活性。
IFN-α與相應(yīng)的受體相互作用會(huì)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)的快速傳遞，主要激活JAK1-STAT信號(hào)通路，通常能夠產(chǎn)生一定的抗病毒作用。IFN-α與受體結(jié)合后會(huì)增加2’-5’-寡腺苷酸合成酶、Mx蛋白和蛋白激酶R等基因的表達(dá)，從而阻止多種感染的發(fā)生。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IFN-α的濃度，其原理見圖1。人IFN-α特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IFN-α?xí)c捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IFN-α抗體后，生物素化抗人IFN-α抗體與人IFN-α結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。人IFN-α濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中人IFN-α濃度。
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
JJP505-1
人IFN-α抗體預(yù)包被板
8孔×12條
JJP505-2
樣品分析緩沖液
5ml
JJP505-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(5X)
20ml
JJP505-4
人IFN-α標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶
JJP505-5
人IFN-α生物素化抗體
10ml
JJP505-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml
JJP505-7
洗滌液(20X)
30ml
JJP505-8
TMB溶液
10ml
JJP505-9
終止液
5ml
JJP505-10
封板膜(透明)
2張
JJP505-11
封板膜(白色)
2張
–
說明書
1份
保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效；試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。