Human IL-11 ELISA Kit

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產(chǎn)品編號(hào)

JJP60
Human IL-11 ELISA Kit
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的HumanIL-11ELISA Kit (HumanIL-11Enzyme-Linked ImmunoSorbent AssayKit)，即人白細(xì)胞介素-11酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-11的ELISA試劑盒。
? 本產(chǎn)品檢測靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好。多次重復(fù)檢測結(jié)果表明，最小檢出量為28.4pg/ml，與人的Cardiotrophin-1、CNTF、G-CSF、IL-6、LIF、Leptin、OSM沒有交叉反應(yīng)，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
白細(xì)胞介素-11 (Interleukin 11, IL-11)是一種由造血微環(huán)境基質(zhì)細(xì)胞和部分間葉細(xì)胞產(chǎn)生的多功能細(xì)胞因子，最初是由IL-1刺激骨髓基質(zhì)細(xì)胞系產(chǎn)生的一個(gè)因子而被發(fā)現(xiàn)，該因子對(duì)IL-6響應(yīng)的小鼠漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系有促有絲分裂作用。人IL-11的cDNA編碼199個(gè)氨基酸的前體蛋白，該蛋白包含一個(gè)22個(gè)氨基酸的疏水信號(hào)肽。成熟的IL-11有178個(gè)氨基酸構(gòu)成，沒有半胱氨酸殘基或潛在的糖基化位點(diǎn)。人的IL-11和小鼠的IL-11有88%的同源性。IL-11通過一種特定的受體IL-11r發(fā)揮生物活性，該受體通過gp130發(fā)出信號(hào)，gp130是IL-6、LIF、OSM和CNTF的信號(hào)亞單位。IL-11單獨(dú)與IL-11r蛋白結(jié)合，親和力低；當(dāng)IL-11r與gp130結(jié)合時(shí)，親和力較高。
人的IL-11可與IL-3、IL -4、IL -7、IL -12、IL -13、SCF、Flt-3配基及GM-CSF協(xié)同作用，促進(jìn)造血干細(xì)胞的增殖。IL-11與IL-3、SCF和促血小板生成素協(xié)同作用可促進(jìn)血小板和巨核細(xì)胞的生成。IL-11可促進(jìn)紅細(xì)胞生成、骨骼細(xì)胞的生長、淋巴細(xì)胞的增殖，甚至還能調(diào)節(jié)造血微環(huán)境。肺泡和支氣管上皮細(xì)胞在炎性細(xì)胞因子的刺激下可產(chǎn)生IL-11。IL-11可刺激破骨細(xì)胞的生長，刺激急性反性時(shí)相應(yīng)產(chǎn)物的生長，同時(shí)IL-11可抑制脂肪的生成。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測樣品中人IL-11的濃度，其原理見圖1。人IL-11特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的人IL-11會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗人IL-11抗體后，生物素化抗人IL-11抗體與人IL-11結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin(HRP-Streptavidin)，由于生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)可以特異性地結(jié)合，因此鏈霉親和素連接的HRP就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來而被固相捕獲。最后加入顯色劑TMB溶液，固相捕獲的辣根過氧化物酶就會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測。人IL-11濃度與A450值呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照樣品吸光度值，即可計(jì)算出樣品中靶蛋白濃度。

圖1.雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒，包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測，可以進(jìn)行96次檢測。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝

JJP60-1
人IL-11抗體預(yù)包被板
8孔×12條

JJP60-2
樣品分析緩沖液
5ml

JJP60-3
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ml

JJP60-4
人IL-11標(biāo)準(zhǔn)品
2-4瓶

JJP60-5
人IL-11生物素化抗體
10ml

JJP60-6
辣根過氧化物酶標(biāo)記Streptavidin
10ml

JJP60-7
洗滌液(20X)
30ml

JJP60-8
TMB溶液
10ml

JJP60-9
終止液
5ml

JJP60-10
封板膜(透明)
2張

JJP60-11
封板膜(白色)
2張

—
說明書
1份

保存條件：
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存，1-2周內(nèi)有效，-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效，試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外，試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
注意事項(xiàng)：
由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉，在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn)，所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶，請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
為保證標(biāo)準(zhǔn)品的精確性，標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后，如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬，否則容易失效。
加樣時(shí)，請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。
由于本試劑盒均經(jīng)過獨(dú)立測試，所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分，即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測時(shí)，請(qǐng)獨(dú)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑，請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的精準(zhǔn)性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板，以保證混勻。
本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行，要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致最終檢測到的吸光度顯著下降。
洗滌過程非常重要，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。
加樣過程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。